シュタルガルト病におけるサフラン補給 (STARSAF02)

研究計画の背景 シュタルガルト病 (STGD/FFM) は、最も一般的な遺伝性劣性黄斑ジストロフィー (Blacharski、1988) であり、若年から若年成人への発症、中枢性視覚障害、黄斑および網膜色素上皮 (RPE) の進行性両側萎縮を特徴とします。黄斑および/または網膜中部周辺に分布するオレンジ色/黄色の斑点が頻繁に出現する (Noble and Carr, 1971)。 臨床的に類似した網膜疾患である黄色斑眼底 (FFM) は、発症年齢が遅く、進行が遅いことがよくあります。 STGD と FFM が対立遺伝子障害を表すことが示唆され、実証されています (Allikmets et al., 1997)。 染色体 1p13-p21 にマッピングされる ATP 結合カセット (ABC) トランスポーター (ABCR) をコードする遺伝子の変異が、STGD の原因であることがわかっています (Allikmets et al., 1997)。 ABCR 遺伝子は、杆体光受容体と錐体体光受容体の両方で、専ら網膜に高レベルで発現します (Molday et al., 2000)。 Weng らによる最近の研究。 (1999) は、ABCR ノックアウト マウスにおける光受容体変性の根底にある分子メカニズムを調査し、リポフスチン蓄積による RPE の「中毒」と RPE サポートの役割の喪失の結果として光受容体が死ぬことを提案しました。 化合物 A2E の RPE 細胞内での蓄積は、ホスファチジルエタノールアミンと光活性化ロドプシンから放出されるオールトランスレチナールの縮合から形成され (Sparrow et al., 2000)、おそらく in vivo で青色光の吸収の増加と光毒性につながるRPE細胞の損傷。 変異誘発性疾患は、比較的初期の段階で、桿体と錐体の両方の光受容体に影響を与える可能性があります。 インビトロ研究 (Sun and Nathans, 2001) も、ABCR 自体が全トランス レチナール媒介性光酸化損傷の効率的な標的であることを示しました。

臨床的には、STGD/FFM における黄斑と周辺錐体、および桿体の機能異常が多くの報告で報告されています (Moloney et al., 1983; Lachapelle et al., 1990)。 また、STGD/FFM が異なるパターンの網膜機能不全、黄斑機能の選択的関与、または家族内の一貫性を示す錐体および/または桿体機能を含むより広範な機能不全と関連している可能性があるという証拠もあります (Lois et al., 2001)。 適応曲線の最後の枝のベースライン感度への漂白後の回復の遅延を含む、暗順応の特徴的な異常（Aleman et al。、1999）も説明されています。 桿体暗順応における同様の異常が、ABCR遺伝子のヌル変異のヘテロ接合体マウスで最近発見された(Mata et al., 2001)。 臨床的証拠 (Parisi et al., 2002) は、STG/FF では漂白後の錐体感度の回復も著しく損なわれていることを示しており、光酸化損傷につながるレチノイド再利用の大幅な変化が錐体視細胞で特異的に起こることを示唆しています。

最近の実験結果 (Maccarone et al., 2008) は、Crocus Sativus のめしべに由来するサフランが、酸化損傷に対する網膜神経保護剤としての役割を果たしている可能性があることを示しています。 実際、サフランは、光誘発性光受容体変性のラットモデルにおいて、形態と機能の両方に対して保護的であることが示されています。 このモデルでは、細胞死は、酸素分圧の長期にわたる増加と光酸化によって引き起こされる酸化ストレスに起因すると考えられています。 サフランは、Crocus sativus の柱頭がクロシン、クロセチン (Giaccio, 2004) などの興味深い化合物を生物学的に高濃度で含んでいるため、テスト対象として魅力的な候補です。 何世紀にもわたってスパイスとして使用されており、既知の悪影響がないことは、安全な適用性への信頼を高めていることは言うまでもありません. さらに、クロシンは代謝経路を活性化してアポトーシスから細胞を保護し、単離された光受容体の光誘導死を減少させることができることが最近報告された (Laabich et al., 2006) が、クロセチン (Giaccio 、2004）は、プラズマなどの液体を介した酸素拡散性を高めます。 光受容体の高い代謝率を考慮すると、酸素の利用可能性は、光受容体を死から保護する上で重要な要素になる可能性があります。 さらに、カナキスら。 (Kanakis et al, 2007) は、抗酸化フラボノイドの代謝産物が DNA に直接結合し、ベータ DNA へのその部分的なコンフォメーションを誘導し、それによって細胞を損傷から保護することを示しました。 これらの観察に基づいて、サフラン抽出物が単純な抗酸化剤として作用しないことが明らかになります. サフラン成分の特異な特徴は、抗酸化活性から遺伝子発現の直接制御まで、非常に異なる作用経路が関与しているという仮説を支持しています. これらの成分は、老化した網膜の酸化的損傷に対する保護剤としてヒトで作用する可能性があり、STG / FFに関連する初期の光受容体損傷を修復する可能性があります.網膜の外側に酸化的損傷を引き起こします。 STG/FF 眼では、疾患の初期段階では、正常な数の錐体視細胞が部分的に保持されていますが、細胞は機能不全に陥っている可能性があります。 サフランの救済効果の結果として、損傷しているが生存可能な光受容体のプールがその反応を高め、網膜の感度を改善する可能性があります.

現在のプロジェクトの目的は、ABCR 変異-STD/FF の結果として、サフランの補給が損傷した網膜に対して有益な神経保護効果をもたらすかどうかを評価することです。

臨床プロトコール患者 30 人の STG/FF 患者のグループ (男性 14 人、女性 16 人、年齢範囲: 15 ～ 68 歳) がこの研究に含まれます。 患者は以下の選択基準を満たします: 1. 標準的なガンツフェルド網膜電図検査および暗順応眼底視野検査によって決定される、典型的な眼底病変 (網膜斑点) および網膜機能不全の錐体桿状パターンを伴う黄斑および周辺網膜変性、および古典的な眼底外観、2.比較的保存された中心網膜機能（Goldmann V / 4eによる視野> 30°、修正EDTRS視力> 20/80）およびVisuskopeによって決定される安定した中心固視、3.既知の遺伝子型または研究中の遺伝子型、4.過去 3 年間に少なくとも 4 回のフォローアップ臨床検査、5. 眼中混濁がないか、最小限である 6. 付随する接眼レンズなし (例: 緑内障、弱視）または全身性疾患。 研究の目的と手順が詳細に説明された後、すべての患者とコントロールのインフォームドコンセントが得られます。

治療と試験のスケジュール 患者は 2 つのグループに分けられます。15 人は 90 日間、1 日用量のサフランの経口補給で治療され、15 人は同じ期間にプラセボ治療を受けます。 90日間の期間の終わりに、患者はクロスオーバーされ、それぞれプラセボまたはサフラン補給に割り当てられます. すべての患者において、校正された標準スネレンチャートを使用した視力検査、直接および間接検眼鏡による眼底検査、FERG検査を含む臨床検査は、研究登録時（ベースライン）および180日間の治療またはプラセボ後に実施されます。 いずれの場合も、コンプライアンスは電話インタビューと錠剤数によって判断されます。 有害な副作用が報告されます。

電気生理学的方法 FERG テストは、以前に公開された技術 (Falsini et al., 2000) に従って実行されます。 簡単に言えば、ERG は、円形の均一なフィールド (直径 18°、平均輝度 80 cd/m2、主波長: 630 nm) の LED 生成正弦波輝度変調によって誘発され、背面に 41 Hz の周波数で提示されます。刺激と同じ平均輝度で照らされたガンツフェルド ボウル。 一連の FERG 応答は、16.5 と% と 93.8% を 0.1 ～ 0.3 log 単位のステップで。 FERG 信号は、16.5 ～ 93.5% の変調度の 6 つの値に対して順番に取得され、昇順で表示されます。 各患者の FERG 対数振幅は、対数変調深度の関数としてプロットされます。 結果の関数の勾配は、線形回帰によって決定されます。 同じ回帰直線から、対数変調深度の値から FERG しきい値が推定され、S/N 比 3 に対応する基準振幅が得られます。

精神物理学 ブリーチング曝露後の錐体システムの感度の回復を評価するために、増分しきい値法が使用されます。 精神物理学的閾値は、20 cd/sqm の光適応背景に 0.5 秒の点滅光を提示することにより、視覚感度が保存された傍中心視野位置で決定されます。 ベースライン評価に続いて、フラッシュ光の閾値強度が測定され、時間の関数としてプロットされます。次に、順応光 (校正された間接検眼鏡を使用してマクスウェル ビューで提供されます) に 30 秒間さらされた後、その強度は約 30 漂白剤と推定されます。円錐光色素の %。 結果として得られる動的回復関数は、指数関数によって適合され、漂白後の明所視システムの感度回復を表し、遊離オプシン不活性化または光色素合成の速度を反映します。 錐体システムの退色適応を測定するために、市販の装置を使用するコンピューター制御システムが開発された (Fadda et al., 2001)。

統計分析 この研究のための患者のサンプルサイズの推定値は、以前の調査 (Parisi et al., 2001) に基づいており、FERG パラメータの被験者間および被験者内の変動性 (データ SD として表される) が STG/FF 患者で決定されました。 FERG の振幅と位相がそれぞれ 0.1 logmicroV と 20 度の被験者間および被験者内の SD であると仮定すると、サフランとプラセボの両方に割り当てられた患者のサンプル サイズは、アルファ = 0.05 で 80% の検出力を提供します。それぞれ、振幅と位相で 0.1 logmicroV (SD: 0.1) と 30 度 (SD: 20) のテストと再テストの差 (つまり、90 日からベースライン テストを差し引いたもの) をグループ化します。 結果は、多変量統計 (反復測定の多変量分散分析、MANOVA) によって分析されます。 すべての分析において、p < 0.05 は統計的に有意であると見なされます。