結腸直腸癌患者の予後マーカーとしての免疫スコア (IMMUCOL)

主な目的は、臨床診療における免疫スコアの影響を評価することです。 この目的のために、結腸直腸癌 (ステージ I ～ IV) の免疫パラメーター (CD3、CD8、CD45RO) は、大規模な多施設研究を通じて前向きに評価されます。 400 人の CRC ステージ I から IV の患者が含まれます (6 か所の対象センター; Paris-HEGP、Dijon、Bobigny-Avicenne、Besancon、Poitiers、Rouen)。 含まれる患者の数は、24 か月の包含期間、3 年間の追跡調査 (協調融資により 4 年目と 5 年目のデータの収集が計画されている) に基づいて計算されています。 20% のイベント率、399 人の CRC 患者のレトロスペクティブ研究 (*1) で観察されたものと同様の免疫パラメーターの予後値、および 90% の検出力。 初期管理とフォローアップの両方で、すべての治療手順が登録されます (手術、放射線療法、化学療法など)。 データは、結腸直腸癌の入院中に通常行われる臨床検査、放射線検査、および生物学的検査から収集されます。腹部超音波、胸部X線;臨床医の要求に応じたコンピューター断層撮影 (CT) および磁気共鳴画像法 (MRI)。癌胎児性抗原（CEA）の標準的な臨床検査と血液検査。 TNM分類に従って、外科的切除マージンの状態、癌の組織学的タイプ、壁浸潤のレベル、検査されたリンパ節の数、および転移性リンパ節の数を含む腫瘍の組織病理学的研究。 推奨されるように、患者は最初の 2 年間は 3 か月ごと、残りの追跡期間は 6 か月ごとに追跡調査を受けます。 各患者は最大5年間追跡されます。 臨床データ、生物学データ、および放射線データは、特定の CRF に登録されます。 含有物の検証とデータのモニタリングは、HEGP 臨床研究ユニット (URC HEGP) と主任研究者によって行われます。 データ管理の計画は、モニタリングに沿って構築されます。 また、アンケートは 5 年間、6 か月ごとに患者に送信されます。 このアンケートは、(i) 免疫障害 (アレルギー、自己免疫、炎症過程など) の存在、および (ii) 患者の心理状態 (例: うつ）。 モニタリング後、すべてのデータは、二重データ入力システムを使用して、URC-HEGP によって設計された MS-Access データベースと、主任研究者のチームによって作成された TME.dB データベースに保存されます。 2 つのデータベースは統合され、最終的なデータベースは統計分析のために凍結されます。 サンプルの準備: 各センターの病理学者は、腫瘍の核と浸潤縁を含む腫瘍ブロックを選択します。 この腫瘍ブロックは、診断のために病理部門によって定期的に処理される腫瘍サンプルの一部です。 4 ミクロンの 3 つの組織切片が作成され、スライド ガラスに堆積して免疫組織化学を実行します。 4 ミクロンの 4 つの組織切片が作成され、エッペンドルフのセーフ ロック チューブに置かれ、遺伝子解析が行われます。 スライドとチューブ上の匿名の患者名は、患者のコード番号とイニシャルを使用して提供されます。 診断目的の生検が利用できる場合 (つまり、 最初の入院中に患者に対して行われたもの（症例の50％）、各生検の組織切片が行われます。 すべてのスライドとチューブは、免疫浸潤の分析のためにHEGPプラットフォームに、遺伝子分析のために生物学部門に郵送されます。 免疫スコアは、次の手順を使用して決定されます。Benchmark XT 自動化での CD3、CD8、CD45RO の免疫染色。浜松スキャナーでの免疫染色のスキャン: 結腸直腸癌に適応した組織学的構造の認識に基づく専用の画像解析モジュールを使用した、特定の腫瘍領域 (コアおよび浸潤縁) における免疫集団の定量化。 このモジュールは、Definiens 社との関連で当社グループによって開発されました。 半自動手順により、各腫瘍領域の染色細胞を定量化できます。 各領域は、側面が 800 ミクロンのタイルに分割されます (腫瘍ごとに 500 ～ 700 タイルが分析されます)。 各マーカーの密度は、各腫瘍領域で最も浸潤している 3 つのタイルの平均密度を使用して計算されます。 関心のある各腫瘍領域の各マーカーの高密度 (Hi) または低 (Lo) への分類が実行されます。 この分類は、観測された密度を、250 CRC のレトロスペクティブ研究で DFS および OS について以前に決定した最適なカットオフ密度 (最小 p 値アプローチ) と比較することによって行われます。 遺伝子解析: 患者の遺伝子解析用のセクションを含むチューブは、遺伝子調査のために署名されたインフォームド コンセントを持つ患者の遺伝子解析セクションを含む、生物学部門、Hôpital Européen Georges Pompidou に転送されます。 各標本の腫瘍細胞の割合は、病理学者によって決定されます (H&E 評価に基づく; 10% 未満、10 ～ 20%、20 ～ 50%、最大 50% の腫瘍細胞)。DNA 抽出が行われます。 . 遺伝子検査には、MSI ステータス、K-Ras および BRAF 変異の存在が含まれます。