免疫评分作为结直肠癌患者的预后标志物 (IMMUCOL)

主要目的是评估免疫评分在临床实践中的影响。 为此，将通过一项大型多中心研究对结直肠癌（I-IV 期）的免疫参数（CD3、CD8、CD45RO）进行前瞻性评估。 将包括 400 名 I 至 IV 期 CRC 患者（6 个纳入中心；Paris-HEGP、Dijon、Bobigny-Avicenne、Besancon、Poitiers、Rouen）。 纳入患者的数量是根据 24 个月的纳入期、3 年的随访（计划在第 4 年和第 5 年收集数据并共同出资）、预期事件发生率为 20%，免疫参数的预后值类似于在 399 名 CRC 患者的回顾性研究中观察到的值 (*1)，检验的功效为 90%。 在初始管理和随访期间，所有治疗程序都将被登记（手术、放疗、化疗……）。 数据将从通常在结直肠癌住院期间进行的临床检查、放射学检查和生物测试中收集：腹部超声、胸部X光；根据临床医生的要求进行计算机断层扫描（CT）和磁共振成像（MRI）；癌胚抗原 (CEA) 的标准实验室测试和血液化验；根据 TNM 分类，肿瘤的组织病理学研究包括手术切除边缘的状态、癌症的组织学类型、壁层浸润水平、检查的淋巴结数量和转移淋巴结数量。 按照建议，在前 2 年内每 3 个月对患者进行一次随访，在接下来的随访期间每 6 个月对患者进行一次随访。 每个患者将被随访长达 5 年。 临床、生物学和放射学数据将登记到特定的 CRF 中。 HEGP 临床研究单位 (URC HEGP) 和主要研究者将对包含物进行验证并监测数据。 将根据监测制定数据管理计划。 还将每六个月向患者发送一份调查问卷，为期五年。 这份问卷由 Pr F Pagès 和心理学家及精神病学家设计，旨在搜索有关 (i) 是否存在免疫紊乱（例如过敏、自身免疫、炎症过程）和 (ii) 患者的心理状态（例如，精神分裂症）的信息。 沮丧）。 监测后，所有数据将使用双数据输入系统存储在由 URC-HEGP 设计的 MS-Access 数据库和由首席研究员团队创建的 TME.dB 数据库中。 两个数据库将合并，最终的数据库将被冻结用于统计分析。 标本制备：各中心的病理学家会选择一个包含肿瘤核心和浸润边缘的肿瘤块。 这个肿瘤块是病理科常规处理诊断的肿瘤标本的一部分。 将制作三个 4 微米的组织切片并将其沉积在载玻片上以进行免疫组织化学。将制作四个 4 微米的组织切片并将其存放在 Eppendorf 安全锁管上以进行基因分析。 载玻片和试管上的匿名患者姓名将使用患者的代码和首字母提供。 如果可以进行用于诊断目的的活检（即 那些在初次住院期间为患者进行的检查（50% 的病例），将完成每次活检的组织切片。 所有载玻片和试管将通过邮件发送到 HEGP 平台进行免疫浸润分析，并发送到生物学部门进行遗传分析。 免疫评分将使用以下步骤确定：在 Hamamatsu 扫描仪上扫描免疫染色：使用基于适应结直肠癌的组织学结构识别的专用图像分析模块，对特定肿瘤区域（核心和浸润边缘）的免疫群体进行量化。 该模块由我们的团队与 Definiens 公司共同开发。 半自动程序允许对每个肿瘤区域中的染色细胞进行量化。 每个区域被分成边长为 800 微米的区块（每个肿瘤分析 500 到 700 个区块）。 每个标记的密度是使用每个肿瘤区域中浸润最多的三个图块的平均密度计算的。 将对每个感兴趣的肿瘤区域中的每个标志物进行高密度 (Hi) 或低密度 (Lo) 分类。 这种分类是通过将观察到的密度与我们之前在 250 CRC 的回顾性研究中确定的 DFS 和 OS 的最佳截止密度（最小 p 值方法）进行比较来完成的。 基因分析：包含患者基因分析部分的试管已签署基因调查知情同意书，将被转移到 Hôpital Européen Georges Pompidou 生物系。 每个标本的肿瘤细胞百分比将由病理学家确定（基于 H&E 评估；低于 10%、10-20%、20-50%、高达 50% 的肿瘤细胞），然后进行 DNA 提取. 基因调查将包括 MSI 状态、K-Ras 和 BRAF 突变的存在