HIV 陽性者と HIV 陰性者の免疫機能を測定する血液検査の評価 (QFM)

高活性抗レトロ ウイルス療法 (HAART) を受けている感染者の HIV-1 を監視するためのルーチンのウイルス学的および免疫学的検査には、CD4 T 細胞の計数、HIV-1 血漿ウイルス量、および未治療患者のベースラインでの HIV-1 遺伝子型耐性検査が含まれます。 HAART中のウイルス学的失敗に続く。

CD4 T 細胞数はヘルパー T リンパ球の数の測定値であり、CD4/分化 8 クラスター (CD8) 比とともに、免疫系の状態を評価するための代理マーカーであり、進行を監視するために使用されます。治療の有無にかかわらず、感染した被験者のHIV病の段階を定義します。 CD4 数および CD4/CD8 比が 1 から 4 の間で増加または高ければ、HAART の結果として (または未治療の被験者の固有の免疫活動による) ウイルス複製の制御が示唆されますが、CD4 数が減少または減少し、CD4/CD8 比が 1 未満である場合HAARTの失敗および/または免疫系の悪化を示唆しています。

HIV-1 血漿ウイルス量は、血漿中のウイルス粒子に由来する HIV-1 RNA コピーの数を測定します。 検出可能な血漿ウイルス量は HIV-1 複製を示し、検出不能な血漿ウイルス量は HIV-1 複製の制御を示唆します。 それにもかかわらず、商用アッセイの検出下限は 50 コピー HIV-1 RNA/mL であり、低レベルの血漿ウイルスはこれらのアッセイでは検出されないままである可​​能性がありますが、カットオフが 50 未満の研究アッセイを使用して HAART の約 70% の患者で検出可能です。 HIV-1 RNA/ml をコピーします。 このような研究に基づく血漿ウイルス負荷アッセイは、感染した被験者の臨床ケアにおける日常的なモニタリングには決して使用されません。

CD4 数と HIV-1 血漿ウイルス量は、HIV-1 疾患と密接に関連しており、HAART に対する HIV-1 の反応を判断するために現在承認されている検査では、以下に定義するように、これらのアッセイには HIV の効果的な治療には重大な欠点があります。

• CD4 数と免疫機能障害。 HAART の結果としての CD4 数の増加または高値、または正常な CD4/CD8 比率は、必ずしも免疫システムが損なわれていないことを表すとは限りませんが、継続的な HIV 複製による免疫活性化の結果としての免疫機能不全の状態を表す可能性があります。
• HIV 細胞リザーバー: 標準的な血漿ウイルス負荷アッセイでは血漿中で検出されない低レベルの細胞関連 HIV 複製。 細胞関連 HIV 複製は、抽出および精製された全細胞関連 RNA からの HIV ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) または無傷細胞内の細胞関連 HIV-1 RNA への in-situ ハイブリダイゼーションによって決定され、HAART の約 62% から 80% の患者で検出されます。 HIV-1 RNA/mL の 50 コピー未満の血漿ウイルス負荷。 標的治療、細胞関連 HIV 薬効、細胞関連 HIV 耐性、および HIV の細胞源の同定は、血漿ウイルス負荷ではなく、HIV 細胞リザーバーアッセイによって決定できます。
• 機能的な免疫応答の違いは、細胞関連の HIV-1 転写活性に基づいており、検出できない血漿ウイルス量ではありません。 循環 T リンパ球における慢性的で低レベルの HIV 複製および検出不能な血漿ウイルス負荷を伴う HAART 患者の免疫応答には、HIV-1 p24 抗原に対する有意な in vitro 増殖、リコール抗原破傷風トキソイドに対する有意な応答がなく、病原体抗原に対するより高い応答が含まれます。メモリー T リンパ球での検出不能な HIV 複製と検出不能な血漿ウイルス負荷を伴う HAART を受けている患者に。
• 血漿由来HIV-1ビリオンの赤血球への付着。 赤血球は、一部の HAART 患者の全血中の血漿関連 HIV-1 ビリオンを隔離します。 これらの患者の血漿ウイルス負荷は検出不能ですが、対応する全血のウイルス負荷値は 234 ～ 82,878 コピー HIV-1 RNA/mL 全血です。 全血ウイルス量は検出可能であるが、血漿ウイルス量は検出不可能なこれらの患者は、臨床的に進行した HIV 感染を示します。
• CD4 カウントと HAART に対する不可解な反応。 血漿ウイルス量が検出できない場合の CD4 数の減少は、赤血球への HIV 血漿ウイルスの隔離または細胞関連 HIV 複製の低レベルによって説明される可能性があります。
• 欠陥/非感染性ビリオン: HIV-1 プラズマ ウイルス量アッセイは、循環 HIV-1 ビリオンが 0.2 % 未満 (または 1:477 から 1: 117,803) であるため、感染性および非感染性または欠陥のあるウイルス粒子を区別するために使用することはできません。感染性。 その結果、これらの遺伝子型および表現型薬剤耐性アッセイ、および血漿ウイルス HIV-1 RNA 由来の HIV-1 RNA を利用する HIV-1 向性アッセイは、ほとんど非感染性または欠陥のあるウイルスから結果を生成します。 感染性ウイルスと非感染性ウイルスまたは欠陥ウイルスとの間の核酸配列の違いは、診断およびモニタリング試験に関して適切に調査されていません。 HIV感染患者の臨床ケアにおける薬剤耐性および向性試験のために、感染性ウイルス粒子とは対照的に、主に非感染性または欠陥のあるウイルス粒子からのウイルス配列を利用することの意味は不明です。

その結果、CD4 数と血漿ウイルス量を使用して HAART に対する HIV の反応を完全に解釈することはできないことを示す証拠が増えています。 さらに、増加するデータは、検出可能な血漿ウイルス負荷の非存在下での継続的な HIV-1 複製が HIV およびウイルス抗原を生成し、免疫活性化をもたらし、それによって T 細胞の代謝回転および増殖のレベルの増加、感染していない T 細胞のアポトーシスから実証されるように HIV の病因を可能にすることを証明しています。ポリクローナル B 細胞、ナチュラル キラー (NK) 細胞、単球の活性化。 免疫活性化マーカー、ヒト白血球抗原 (HLA) - 細胞表面受容体 (DR) (HLA-DR)、分化クラスター 38 (CD38)、分化クラスター 69 (CD69)、クラスター分化７１（ＣＤ７１）、分化５７の老化マーカークラスター（ＣＤ５７）、増殖マーカーＫｉ６７および分化９５のアポトーシスマーカークラスター（ＣＤ９５）（ＦａｓＲ）。 全体として、これらの HIV 病因のマーカーは、炎症反応、リザーバーの再播種、HIV-1 の進化と薬剤耐性、および免疫系の漸進的な悪化を伴う非日和見疾患を可能にします。

免疫機能検査では、免疫系の構成要素の機能を評価します。 それらは一般にインビトロベースのアッセイであり、リンパ球を特定の抗原またはマイトジェンに曝露した後の結果を測定するように設計されています。 結果は、ガンマインターフェロンの分泌、リコール抗原および/またはマイトジェンに対するリンパ球増殖細胞応答の結果としての細胞ゲノムDNAへのトリチウム化チミジンの取り込みなどの免疫刺激マーカーの測定である可能性があります。生体内ツベルクリン皮膚試験、ツベルクリン精製タンパク質誘導体投与部位の皮膚硬結の大きさ。

Cellestis Limited - Qiagen Company は最近、特許取得済みの QuantiFERON® テクノロジーに基づく QuantiFERON® モニター (QFM または CST007) テストを開発し、細胞性免疫機能の測定を提供しました。 これは、刺激剤の組み合わせを使用して全血中のさまざまな免疫細胞を特異的に刺激し、血漿中に放出されたインターフェロン-ガンマを ELISA (酵素結合免疫吸着アッセイ) によって測定する体外診断検査です。 したがって、この研究の目的は、HIV免疫不全環境におけるQFMの有用性に対処し、細胞関連マーカーとして、HIV病因が免疫機能に影響を与えるため、コホート内およびコホート間の免疫機能のレベルをよりよく理解するために、HIVウイルスリザーバーアッセイの血液検査が含まれます。 .

どのくらい時間がかかりますか？ ガトポリンタン博士と彼の臨床研究コーディネーターとの約1時間の訪問で質問に答え、その後約10分間採血を行います（ガトポリンタン博士のオフィスから9ブロック）。

研究結果の尺度（QFMとCD4カウントとCD4 / CD8比の相関）は、データの提示を含め、研究対象登録後平均1年以内に評価されます。