Avaliação de um exame de sangue para medir a função imunológica em pessoas HIV positivas em comparação com pessoas HIV negativas (QFM)

Os testes virológicos e imunológicos de rotina para monitorar o HIV-1 em indivíduos infectados em terapia antirretroviral altamente ativa (HAART) incluem enumeração de células T CD4, carga viral plasmática do HIV-1 e teste de resistência genotípica do HIV-1 na linha de base para pacientes virgens de tratamento e após falha virológica durante a HAART.

A contagem de células T CD4 é uma medida do número de linfócitos T auxiliares e, em conjunto com a razão CD4/cluster de diferenciação 8 (CD8), são marcadores substitutos para avaliar o estado do sistema imunológico e usados ​​para monitorar a progressão e definir os estágios da doença do HIV em indivíduos infectados com ou sem tratamento. Uma contagem de CD4 crescente ou alta e uma relação CD4/CD8 entre 1 e 4 sugere o controle da replicação do vírus como resultado da HAART (ou da atividade imune inerente em indivíduos não tratados), enquanto uma contagem de CD4 decrescente ou baixa e uma relação CD4/CD8 <1 sugere falha HAART e/ou deterioração do sistema imunológico.

A carga viral plasmática do HIV-1 mede o número de cópias de RNA do HIV-1 derivadas de partículas virais no plasma. Uma carga viral plasmática detectável indica replicação do HIV-1, enquanto uma carga viral plasmática indetectável sugere controle da replicação do HIV-1. No entanto, com o limite inferior de detecção de 50 cópias de HIV-1 RNA/mL para ensaios comerciais, níveis mais baixos de vírus no plasma podem permanecer não detectados por esses ensaios, mas detectáveis ​​em aproximadamente 70% dos pacientes em HAART usando ensaios de pesquisa com um corte de <50 copia HIV-1 RNA/ml. Tais ensaios de carga viral de plasma baseados em pesquisa nunca são usados ​​para monitoramento de rotina no tratamento clínico de indivíduos infectados.

Embora as contagens de CD4 e a carga viral plasmática do HIV-1 estejam inextricavelmente relacionadas no contexto da doença do HIV-1 e atualmente os testes aprovados para determinar a resposta do HIV-1 ao HAART, esses testes apresentam deficiências significativas para o tratamento eficaz do HIV, conforme definido abaixo:

• contagem de CD4 e disfunção imune. Contagens de CD4 elevadas ou elevadas ou proporções normais de CD4/CD8 como resultado da HAART podem não representar necessariamente um sistema imunológico descomprometido, mas podem representar um estado de disfunção imune como resultado da ativação imune da replicação contínua do HIV.
• Reservatórios celulares de HIV: Baixos níveis de replicação de HIV associados a células não detectados no plasma pelo ensaio padrão de carga viral no plasma. A replicação do HIV associada à célula é determinada pela reação em cadeia da polimerase (PCR) do HIV a partir do RNA total da célula extraída e purificada ou hibridação in situ para o RNA do HIV-1 associado à célula em células intactas, e detectado em aproximadamente 62% a 80% dos pacientes em HAART com carga viral plasmática <50 cópias HIV-1 RNA/mL. O tratamento direcionado, a eficácia do medicamento para o HIV associado às células, a resistência ao HIV associada às células e a identificação da fonte celular do HIV podem ser determinados por ensaios de reservatórios de células do HIV e não pela carga viral plasmática.
• Diferenças funcionais da resposta imune com base na atividade transcricional do HIV-1 associada à célula e na carga viral plasmática não indetectável. As respostas imunes em pacientes em HAART com baixo nível crônico de replicação do HIV nos linfócitos T circulantes e carga viral plasmática indetectável incluem proliferação in vitro significativa para o antígeno p24 do HIV-1, nenhuma resposta significativa para recordar o toxóide tetânico do antígeno e respostas mais altas aos antígenos patógenos em comparação a pacientes em HAART com replicação indetectável do HIV em linfócitos T de memória e carga viral plasmática indetectável.
• Aderência de vírions HIV-1 derivados de plasma a eritrócitos. Os eritrócitos sequestram vírions do HIV-1 associados ao plasma no sangue total de alguns pacientes em HAART. Embora esses pacientes tenham carga viral plasmática indetectável, o sangue total correspondente tem valores de carga viral variando de 234 a 82.878 cópias de RNA do HIV-1/mL de sangue total. Esses pacientes com carga viral detectável no sangue total, mas com carga viral plasmática indetectável, apresentam infecção pelo HIV clinicamente avançada.
• Contagens de CD4 e resposta inexplicável ao HAART. Uma diminuição nas contagens de CD4 com uma carga viral plasmática indetectável pode ser explicada pelo sequestro do vírus HIV plasmático para os eritrócitos ou baixos níveis de replicação do HIV associada à célula.
• Virions defeituosos/não infecciosos: os ensaios de carga viral plasmática de HIV-1 não podem ser usados ​​para diferenciar entre partículas virais infecciosas e não infecciosas ou defeituosas, pois <0,2% de virions HIV-1 circulantes (ou de 1:477 a 1:117.803) são infeccioso. Consequentemente, os ensaios genotípicos e fenotípicos de resistência a medicamentos e os ensaios de tropismo do HIV-1 que utilizam o RNA do HIV-1 derivado do RNA do HIV-1 do vírus plasmático gerarão resultados principalmente de vírus não infecciosos ou defeituosos. A diferença nas sequências de ácidos nucleicos entre vírus infecciosos e não infecciosos ou defeituosos não foi adequadamente investigada em relação a testes de diagnóstico e monitoramento. As implicações da utilização de sequências virais de partículas virais predominantemente não infecciosas ou defeituosas em oposição a partículas virais infecciosas para resistência a drogas e testes de tropismo no atendimento clínico de pacientes infectados pelo HIV são desconhecidas.

Consequentemente, evidências crescentes demonstram que a contagem de CD4 e a carga viral plasmática não podem ser usadas para interpretar totalmente a resposta do HIV à HAART. Além disso, dados crescentes provam que a replicação contínua do HIV-1 na ausência de carga viral plasmática detectável gera HIV e antígeno viral, resultando em ativação imune, permitindo assim a patogênese do HIV, conforme demonstrado pelos níveis aumentados de renovação e proliferação de células T, apoptose de células T não infectadas como bem como células B policlonais, células assassinas naturais (NK) e ativação de monócitos. Vários marcadores baseados em células foram associados à patogênese do HIV, incluindo marcadores de ativação imunológica Antígeno Leucocitário Humano (HLA) - Receptor de Superfície Celular (DR) (HLA-DR), agrupamento de diferenciação 38 (CD38), agrupamento de diferenciação 69 (CD69), agrupamento de diferenciação 71 (CD71), agrupamento de marcadores de senescência de diferenciação 57 (CD57), marcador de proliferação Ki67 e agrupamento de marcadores de apoptose de diferenciação 95 (CD95) (FasR). Juntos, esses marcadores da patogênese do HIV permitem respostas inflamatórias, reservatórios de re-semeadura, evolução do HIV-1 e resistência a medicamentos e doenças não oportunistas com deterioração gradual do sistema imunológico.

Os testes de função imune avaliam a funcionalidade de um componente do sistema imunológico. Eles geralmente são ensaios baseados em in vitro e são projetados para medir um resultado após a exposição de linfócitos a antígenos ou mitógenos específicos. O resultado pode ser a medição de um marcador de estimulação imune, como a secreção de interferon gama, incorporação de timidina tritiada no DNA genômico celular como resultado de uma resposta celular linfoproliferativa para recordar o antígeno e/ou mitógeno ou, no caso do in- Teste cutâneo de tuberculina baseado em vivo, o tamanho do endurecimento da pele no local da administração do derivado de proteína purificada de tuberculina.

A Cellestis Limited - uma empresa Qiagen, desenvolveu recentemente o teste QuantiFERON® Monitor (QFM ou CST007) baseado na tecnologia patenteada QuantiFERON® para fornecer uma medida da função imunológica mediada por células. É um teste de diagnóstico in vitro que utiliza uma combinação de estimulantes para estimular especificamente diferentes células imunes no sangue total e mede o interferon-gama liberado no plasma por ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática). Portanto, os objetivos deste estudo abordarão a utilidade do QFM no cenário de imunocomprometimento do HIV e, como marcadores associados à célula, a patogênese do HIV influencia a função imune, o teste de sangue do HIV Viral Reservoir será incluído para entender melhor o nível da função imune dentro e entre as coortes .

Quanto tempo vai demorar? Uma visita de cerca de 1 hora com o Dr. Gatpolintan e seu Coordenador de Estudos Clínicos para responder a perguntas, depois cerca de 10 minutos para uma coleta de sangue (nove quarteirões do consultório do Dr. Gatpolintan).

As medidas dos resultados do estudo (correlação entre QFM e contagens de CD4 e taxas de CD4/CD8) serão avaliadas, incluindo apresentação de dados, dentro de um período médio de 1 ano após a inscrição do sujeito do estudo.