全身性肥満細胞症における骨髄トリプターゼの診断的価値 (EvaTryMS)
成人全身性肥満細胞症における骨髄トリプターゼレベルの診断的価値の評価
この研究の仮説は、骨髄トリプターゼ (MT) レベルが全身性肥満細胞症 (SM) の診断マーカーであるというものです。 骨髄吸引液 (BMA) 中の骨髄トリプターゼの測定は、感度が 100% に近く、偽陰性率が低い全身性肥満細胞症の新しい診断基準となる可能性があります。 この新しい検査は、全身性肥満細胞症（特に無痛型）を正確に診断する能力を向上させるのに役立つ可能性があります。 骨髄生検と比較して侵襲性が低いため、骨髄生検の前に実施される検査と見なすこともできます。 骨髄トリプターゼが高い患者のみが骨髄生検を受ける。
将来、この研究によって検証された場合、骨髄トリプターゼはマスト細胞負荷の有用なマーカーとなり、全身性肥満細胞症の治療効果を監視するのに役立ちます.
調査の概要
詳細な説明
肥満細胞症は、さまざまな器官におけるマスト細胞のクローン性蓄積を特徴とする一連の疾患です。 肥満細胞症の診断は困難であり、患者は何年も診断されないままです。 世界保健機関 (WHO) によって定義された診断基準を使用すると、肥満細胞症は皮膚肥満細胞症 (CM) と全身性肥満細胞症 (SM) に分けることができます。
研究は、骨髄吸引物（BMAから）からの血漿中のトリプターゼの測定がSMの診断に役立つ可能性があることを示唆しました.トゥールーズ大学病院での予備研究の結果は、50 μg/L 以上の骨髄トリプターゼ レベル (MT) が、BMB の組織学的結果 (主要な診断基準) よりも感度の高い診断基準 (感度 94.7%) である可能性を示唆しています。皮膚の肥満細胞症患者における SM の診断には、専門センターで感度 68 ～ 80% の SM
この予備研究は限られた数の患者を対象に 1 つのセンターで行われたため、SM の診断における MT の診断上の価値は、より多くの代表的な集団で確認する必要があります。
さらに、研究者は以下を評価することを提案しています。
- 皮膚に肥満細胞症のない患者におけるSMの診断のためのMTの診断精度;
- 皮膚の肥満細胞症の有無にかかわらず、SM の診断のための絶対的および修正された MT の診断精度。
- 皮膚の肥満細胞症の有無にかかわらず、SM の診断のための MT/ST 比の診断精度。
- BMA によって収集され、皮膚の肥満細胞症の有無にかかわらず SM を診断するための保存溶液で維持された細胞に対して実行されるフローサイトメトリーの診断精度。
- 皮膚の肥満細胞症の有無にかかわらずSMを診断するための末梢血中のKIT変異陽性細胞の割合の定量化の診断精度。
- 末梢血中の KIT 変異陽性細胞の割合の定量化の結果を、MT レベルの結果、MT/ST 比の結果、および絶対および補正 MT の結果と相関させます。
- EDTA/TransFix® チューブとヘパリン ナトリウム チューブの両方で実行された CF の結果を相関させ、CF の輸送条件 (24 ～ 96 時間以内に 20 ～ 25°C) を検証します。これらの分析は、BMA の最初の 50 サンプルに対して実行されます。
これらの診断テストのサンプルは、組み込みの日に作成されます。 登録された患者ごとに、末梢血 (EDTA) の 5 mL サンプル 1 つと BM 吸引液の 1 mL サンプル (EDTA/TransFix® チューブで 0.5 mL、ヘパリン酸ナトリウム チューブで 0.5 mL) が同じように収集されます。 24 ～ 96 時間 (+20 ～ 25°C) 以内に中央研究所に発送されます。
各患者について、総白血球からのゲノム DNA を末梢血 EDTA サンプルから精製し、後でリアルタイム qPCR によるキット変異の定量化に使用します。 血漿トリプターゼレベルは、DNA抽出のためにアリコートを採取した後、末梢血EDTAサンプルから測定されます。 骨髄吸引サンプルは、最初にフローサイトメトリー (FC) による BM 肥満細胞の免疫表現型検査に使用され、次に遠心分離後に BM トリプターゼ レベルの測定に使用されます。 末梢血による BM 吸引液の希釈度は、BM サンプル中の CD16bright 顆粒球と CD16low 顆粒球の割合を比較することで推定され、BM トリプターゼの調整に使用されます。 トリプターゼ測定は、自動分析装置で標準化されたフルオロ酵素イムノアッセイを使用して、EDTA または Na、ヘパリン酸血漿から行われます。 BM 肥満細胞の免疫表現型検査は、TransFix® (細胞抗原安定化試薬) によって安定化された BM 吸引で実行されます (および、Na、ヘパリン酸塩中の BM 吸引の最初の 50 サンプルについては)、抗 CD45/CD117/CD34/適切な蛍光色素と結合した CD2/CD25/CD16 抗体。 BM白血球からのゲノムDNAは、Promega DNA自動抽出器を使用して300～500μLの末梢血(両方ともEDTAで凝固防止)から抽出され、その後+4°Cで保存されます。 定量的 PCR は、7900HT Fast Real-Time PCR System (Life Technologies) を備えた検証済みの qPCR アッセイ (Life Technologies、Foster City、CA) を使用して実行されます。
研究訪問の終了は、患者が行われた臨床および実験室調査の結果を知らされたのと同じ日に行われます。 この日は、肥満細胞症の計画的な医学的管理が議論される日でもあります。
研究の種類
入学 (実際)
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究場所
-
-
-
Bordeaux、フランス
- CHU Bordeaux Hôpital Haut-Lévêque, service de dermatologie
-
Caen、フランス
- CHU de Caen, service d'hématologie
-
Limoges、フランス
- CHU Dupuytren service d'hématologie
-
Lyon、フランス
- CHU Lyon Sud, service de médecine interne
-
Paris、フランス
- Hôpital Necker, service d'hématologie
-
Paris、フランス
- Hôpital Pité Salpétrière
-
Toulouse、フランス
- CHU Toulouse, Hôpital Larrey, service de dermatologie
-
-
-
-
-
Fort-de-France、マルティニーク
- CHU Fort de France, service de dermatologie
-
-
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
説明
包含基準:
- 全身性肥満細胞症の疑いがあり、骨髄サンプリング（骨髄生検および/または骨髄吸引）が、参照センターおよび肥満細胞症のコンピテンスセンターでの疾患の通常の精査の一環として実施されている。
- -書面によるインフォームドコンセントが得られた患者。
除外基準:
- -骨髄サンプリングが禁忌の患者（抗凝固剤および/または抗凝固剤治療、
- 血小板減少症 < 50,000/mm2) 肥満細胞疾患の最終的なタイプを正式に結論付けることは不可能です: SM、CM、肥満細胞活性化症候群。
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：診断
- 割り当て：なし
- 介入モデル：単一グループの割り当て
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
|---|---|
|
他の：肥満細胞症の診断
登録された被験者ごとに、5 mL の末梢血サンプルと 1 mL の BM 吸引液サンプルを同じ日に収集して、肥満細胞症の診断テストを行います (qPCR によるキット変異の定量化、血漿トリプターゼレベル、フローサイトメトリーによる BM 肥満細胞の免疫表現型検査、 BM トリプターゼ レベル、BM 吸引液の希釈度...) 参照標準として WHO 基準を使用します。
|
いくつかのサンプルは、診断テストを行うために、組み込み日に骨髄吸引液と末梢血から抽出されます。
参照基準として WHO 基準が使用されます。
|
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
骨髄トリプターゼレベル
時間枠：骨髄吸引後4日目
|
骨髄吸引サンプルのアリコートは、骨髄トリプターゼレベルの測定のために遠心分離後に使用されます。
|
骨髄吸引後4日目
|
二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
全身性肥満細胞症と細胞マスト活性化症候群の鑑別診断のための骨髄トリプターゼレベル
時間枠：骨髄吸引後4日目
|
骨髄吸引サンプルのアリコートは、骨髄トリプターゼレベルの測定のために遠心分離後に使用されます。
|
骨髄吸引後4日目
|
|
皮膚の肥満細胞症の有無にかかわらず、全身性肥満細胞症の診断のための骨髄トリプターゼ/血清トリプターゼ比
時間枠：骨髄吸引後4日目
|
骨髄吸引後4日目
|
|
|
皮膚の肥満細胞症を伴うまたは伴わない全身性肥満細胞症の診断のための骨髄トリプターゼの絶対値および補正値
時間枠：骨髄吸引後4日目
|
末梢血による骨髄吸引液の希釈度は、骨髄サンプル中の CD16bright 顆粒球と CD16low 顆粒球の割合を比較することで推定され、骨髄トリプターゼの調整に使用されます。
|
骨髄吸引後4日目
|
|
皮膚の肥満細胞症を伴うまたは伴わない全身性肥満細胞症の診断のために、CD25 および/または CD2 を発現する肥満細胞を検出するために、骨髄吸引液によって収集され、保存液 (TransFix®) で維持された細胞に対して実行されるフローサイトメトリー
時間枠：骨髄吸引後4日目
|
骨髄肥満細胞の免疫表現型検査は、抗 CD45/CD117/CD34/CD2/CD25/CD16 抗体の事前に定義された混合物を使用して、Transfix によって安定化された骨髄吸引に対して実行されます。
|
骨髄吸引後4日目
|
|
全身性肥満細胞症診断のための末梢血中の KIT 変異陽性細胞画分の定量化、髄質トリプターゼレベル、髄質/全身トリプターゼ比、絶対および補正された髄質トリプターゼレベルの結果との相関
時間枠：骨髄吸引後4日目
|
全白血球からのゲノム DNA は、末梢血サンプルから精製され、qPCR によるキット変異の定量化に使用されます。
|
骨髄吸引後4日目
|
協力者と研究者
捜査官
- 主任研究者：Cristina Livideanu, MD、CHU Toulouse
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- Paul C, Sans B, Suarez F, Casassus P, Barete S, Lanternier F, Grandpeix-Guyodo C, Dubreuil P, Palmerini F, Mansfield CD, Gineste P, Moussy A, Hermine O, Lortholary O. Masitinib for the treatment of systemic and cutaneous mastocytosis with handicap: a phase 2a study. Am J Hematol. 2010 Dec;85(12):921-5. doi: 10.1002/ajh.21894.
- Valent P, Horny HP, Escribano L, Longley BJ, Li CY, Schwartz LB, Marone G, Nunez R, Akin C, Sotlar K, Sperr WR, Wolff K, Brunning RD, Parwaresch RM, Austen KF, Lennert K, Metcalfe DD, Vardiman JW, Bennett JM. Diagnostic criteria and classification of mastocytosis: a consensus proposal. Leuk Res. 2001 Jul;25(7):603-25. doi: 10.1016/s0145-2126(01)00038-8.
- Valent P, Akin C, Escribano L, Fodinger M, Hartmann K, Brockow K, Castells M, Sperr WR, Kluin-Nelemans HC, Hamdy NA, Lortholary O, Robyn J, van Doormaal J, Sotlar K, Hauswirth AW, Arock M, Hermine O, Hellmann A, Triggiani M, Niedoszytko M, Schwartz LB, Orfao A, Horny HP, Metcalfe DD. Standards and standardization in mastocytosis: consensus statements on diagnostics, treatment recommendations and response criteria. Eur J Clin Invest. 2007 Jun;37(6):435-53. doi: 10.1111/j.1365-2362.2007.01807.x.
- Akin C, Valent P, Metcalfe DD. Mast cell activation syndrome: Proposed diagnostic criteria. J Allergy Clin Immunol. 2010 Dec;126(6):1099-104.e4. doi: 10.1016/j.jaci.2010.08.035. Epub 2010 Oct 28.
- Alvarez-Twose I, Gonzalez de Olano D, Sanchez-Munoz L, Matito A, Esteban-Lopez MI, Vega A, Mateo MB, Alonso Diaz de Durana MD, de la Hoz B, Del Pozo Gil MD, Caballero T, Rosado A, Sanchez Matas I, Teodosio C, Jara-Acevedo M, Mollejo M, Garcia-Montero A, Orfao A, Escribano L. Clinical, biological, and molecular characteristics of clonal mast cell disorders presenting with systemic mast cell activation symptoms. J Allergy Clin Immunol. 2010 Jun;125(6):1269-1278.e2. doi: 10.1016/j.jaci.2010.02.019.
- Barete S, Assous N, de Gennes C, Grandpeix C, Feger F, Palmerini F, Dubreuil P, Arock M, Roux C, Launay JM, Fraitag S, Canioni D, Billemont B, Suarez F, Lanternier F, Lortholary O, Hermine O, Frances C. Systemic mastocytosis and bone involvement in a cohort of 75 patients. Ann Rheum Dis. 2010 Oct;69(10):1838-41. doi: 10.1136/ard.2009.124511. Epub 2010 Jun 22.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (見積もり)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。