慢性炎症性腸疾患の評価における I-スキャンおよび共焦点レーザー内視鏡検査の価値 (I-Scan-CLE-IBD)

慢性炎症性腸疾患の評価における I-スキャンおよび共焦点レーザー内視鏡検査の価値

背景 大腸内視鏡検査は、慢性炎症性腸疾患 (IBD) の診断、活動の評価、延長、および治療への反応において重要な役割を果たしています。 従来の検査は、組織学と比較して疾患の範囲と活動性を過小評価しているため、粘膜生検はこれらの患者の内視鏡検査の重要な要素です。 複数の生検を行うには時間がかかり、二次出血のリスクは低いが無視できないものであり、組織学的分析を待つ間、診断が遅れる原因となります。

共焦点レーザー内視鏡検査は、進行中の内視鏡検査中に実際に生体内顕微鏡分析を可能にする新しい技術として近年登場しました。 内視鏡検査は、専用の内視鏡 (eCLE) またはミニプローブ ベースのシステム (pCLE) [1] を使用して実行できます。 これは造影剤に基づく技術であり、最も広く使用されている薬剤は静脈内投与されるフルオレセインです [2]。 プローブベースの内視鏡検査システムは、マイクロ対物レンズにリンクされた光ファイバーの束を表す柔軟なカテーテルプローブ、レーザースキャニングユニット、および制御および取得ソフトウェア (Cellvizio; Mauna Kea Technology、パリ、フランス) で構成されています。 柔軟な共焦点ミニプローブは、標準的な内視鏡、胆道カテーテル、または胆管鏡の作業チャネルを通過するように特別に設計されているため、pCLE システムは任意の内視鏡検査ユニットに簡単に統合できます。 この技術の原理は、定義された波長のレーザービームが標的組織に向かって集束され、再捕捉された信号が単一の水平面に「光生検」として表示されることに基づいています。

CLE の潜在的な役割は、上部および下部の両方の消化管の病理学で調査されており、組織および血管パターンの即時評価に基づいて最終的な組織病理学的診断を予測するための優れた精度を示しています [3]。 スキャン領域が小さいため、この技術は他の「赤信号」技術と組み合わせて使用​​して、関心のある領域の粘膜をスクリーニングし、組織学的診断のために CLE で調べることができます [4]。

I-scan テクノロジー (Pentax、東京、日本) は、新しい画像強調内視鏡技術であり、3 種類のアルゴリズムで構成されています: 表面強調 (SE; エッジの認識による構造の強調)、コントラスト強調 (CE; の強調)低密度領域のカラー表示によるくぼんだ領域と構造の違い) およびトーン強調 (TE; 各ピクセルの RGB コンポーネントの組み合わせの変更による個々の臓器に合わせた強調) [5,6]。 狭帯域イメージングと同様に、i-scan は仮想色素内視鏡検査を実現できますが、これまで、炎症性腸疾患の活動性の評価におけるこの技術の役割を決定する研究はありませんでした [7]。

研究の目的 研究の目的は、p-CLE の画像所見を I-スキャン内視鏡検査と組み合わせて、活動スコアおよび組織学的診断と比較することです。

患者と方法 この研究には、選択基準と除外基準を満たす活動性潰瘍性大腸炎またはクローン病の患者が前向きに含まれます。 すべての患者は、従来の結腸内視鏡検査、続いてIスキャン検査およびp-CLEによって検査され、結腸の各セグメントについて生検サンプルが採取されます。 次に、「ゴールド スタンダード」としての組織学、活動スコア (潰瘍性大腸炎の Mayo スコア、クローン病のクローン病活動指数)、および画像所見の間の相関関係が、病理学的領域と正常領域の両方について計算されます。

包含基準

• 年齢 > 18 歳、男性または女性
• -活動性潰瘍性大腸炎（MAYOスコア> 3）またはクローン病（CDAIスコア> 150）と診断され、治療および大腸内視鏡検査の適応が存在する患者。 新たに診断された患者だけでなく、すでに経口 5-ASA 療法を受けている患者も含まれる場合があります。
• -大腸内視鏡検査およびp-CLE検査に対する署名済みのインフォームドコンセント -除外基準
• インフォームドコンセントの不履行
• 大腸内視鏡検査が禁忌の患者
• フルオレセインに対する既知のアレルギー
• 妊娠中または授乳中の患者
• -プレドニゾロン、アザチオプリンまたは生物学的薬剤による進行中の全身免疫抑制療法。

各参加者について収集されるデータには、次のものが含まれます。

• 個人データ（姓名、年齢、性別）
• これまでの調査結果
• 臨床評価（排便回数、直腸出血、発熱、腹痛、腸管外症状、腹部腫瘤）および活動指数計算用の血球数（潰瘍性大腸炎の Mayo スコア、クローン病の CDAI スコア）
• 内視鏡所見
• 組織学的および免疫組織化学的所見
• 分子解析所見

画像検査

• すべての患者は、Iスキャン大腸内視鏡検査によって検査され、急性炎症の程度と分布が評価されます。
• p-CLE 検査は、造影剤 (2.5 ml フルオレセイン 10%) の静脈内投与後、結腸の正常領域と病的領域の両方のセグメントに続きます。
• 画像データは、オフライン分析用にデジタル保存されます (検査された領域ごとに 10 ～ 20 秒の動画)。
• 生検サンプルは、組織学的、免疫組織化学的、および分子分析のために、p-CLEによって検査される各領域から採取されます。

研究中に収集された生物学的材料 (これには、正常組織およびそれぞれ 2 ～ 3 mm の変更された領域からの 1 ml の全血および組織生検が含まれます) は凍結され、保存されます。 参加者の予想数に達すると、サンプルは、プロトコルでさらに詳しく説明されているように、血管新生のマーカーを評価するための分子研究を受けます。 生物学的材料は、試験開始から推定 18 か月間保存および分析されます。 研究の完了後、生体材料は処分されます。

分子検査用の生体サンプル:

• 血液サンプルは、画像処理手順の前に収集されます

  1. DNA 抽出の場合、2 ～ 5 ml の血液を EDTA を含むチューブに採取し、4°C で 1 日保存するか、-80°C の冷凍庫に移して長期保存することができます。
  2. RNA 抽出の場合、2 ～ 5 ml の血液を PAX チューブに採取し、室温で最長 2 時間保存した後、-80 °C の冷凍庫に移して長期保存する必要があります。
• 組織サンプル:

さらなる分子分析 (RNA/DNA/タンパク質) のために組織サンプルを安定化させる可能な方法:

1. 0.3 ～ 0.5 cm の組織をすぐに RNAlater Solution を含むチューブに入れ、4°C で約 24 時間保存します。この後、RNAlater 溶液をチューブから取り出し (無菌条件下で)、RNA/DNA 抽出までサンプルを -80°C で凍結します。
2. 0.3 ～ 0.5 cm の組織をすぐに空の極低温チューブに保存し、液体窒素またはドライアイスとメタノールを含む容器に入れます。

主要な結果の測定:

• p-CLE の所見を記録し、従来の結腸内視鏡検査および I-スキャン結腸内視鏡検査の所見と比較します。
• p-CLE および I-スキャン結腸内視鏡所見は、組織サンプルの病理学的評価と比較されます。

二次結果の測定:

• 従来の大腸内視鏡検査、I-scan、p-CLEの結果に基づく治療効果
• 手続きの登録時間。
• 考えられる合併症の登録

リスクと副作用 大腸内視鏡検査中に合併症が発生することがありますが、まれです。 これらは生検部位での出血で構成されており、通常は最小限で自己制限的であり、フォローアップを必要とすることはめったにありません。 腸の穿孔は非常にまれです。 造影剤（フルオレセイン）の安全性プロファイルは、副作用の発生率が非常に低いことを示しました。 腎毒性はなく、過敏症や重度のアレルギーの発生率は低いです。 フルオレセインは、EU 諸国で臨床使用が承認されています。