La valeur de l'endomicroscopie laser I-Scan et confocale pour l'évaluation des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (I-Scan-CLE-IBD)

La valeur de l'I-Scan et de l'endomicroscopie laser confocale pour l'évaluation des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin

Contexte La coloscopie joue un rôle important dans le diagnostic, l'évaluation de l'activité, l'extension et la réponse au traitement des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI). L'examen conventionnel sous-estime l'étendue et l'activité de la maladie par rapport à l'histologie, par conséquent, la biopsie muqueuse est un élément essentiel de l'examen endoscopique de ces patients. La réalisation de multiples biopsies est chronophage, comporte un risque faible mais non négligeable d'hémorragie secondaire et entraîne un retard de diagnostic, dans l'attente de l'analyse histologique.

L'endomicroscopie laser confocale est apparue ces dernières années comme une nouvelle technique qui permet en fait une analyse microscopique in vivo pendant l'endoscopie en cours. L'endomicroscopie peut être réalisée soit avec un endoscope dédié (eCLE), soit avec des systèmes à base de minisondes (pCLE) [1]. Il s'agit d'une technique à base de contraste, l'agent le plus utilisé étant la fluorescéine administrée par voie intraveineuse [2]. Le système d'endomicroscopie à sonde est composé d'une sonde cathéter souple représentant un faisceau de fibres optiques reliée à un micro-objectif, d'une unité de balayage laser et du logiciel de contrôle et d'acquisition (Cellvizio ; Mauna Kea Technology, Paris, France). Les minisondes confocales flexibles ont été spécifiquement conçues pour être passées à travers les canaux de travail des endoscopes standard, des cathéters biliaires ou des cholangioscopes et ainsi le système pCLE peut être facilement intégré dans n'importe quelle unité d'endoscopie. Le principe de la technique est basé sur un faisceau laser de longueur d'onde définie focalisé vers le tissu ciblé et le signal recapturé est affiché sous forme de «biopsies optiques» dans un seul plan horizontal.

Le rôle potentiel du CLE a été exploré dans la pathologie du tractus gastro-intestinal supérieur et inférieur, montrant une bonne précision pour prédire le diagnostic histopathologique final basé sur une évaluation immédiate des modèles tissulaires et vasculaires [3]. En raison de sa zone de balayage minuscule, cette technologie est mieux utilisée en conjonction avec d'autres techniques "drapeau rouge" pour dépister la muqueuse pour les zones d'intérêt, qui peuvent ensuite être examinées par CLE pour un diagnostic histologique [4].

La technologie I-scan (Pentax, Tokyo, Japon) est une nouvelle technique endoscopique d'amélioration de l'image, composée de trois types d'algorithmes : amélioration de la surface (SE ; amélioration de la structure par reconnaissance des bords), amélioration du contraste (CE ; amélioration de zones déprimées et différences de structure grâce à la présentation colorée des zones de faible densité) et l'amélioration de la tonalité (TE ; amélioration adaptée aux organes individuels grâce à la modification de la combinaison des composants RVB pour chaque pixel) [5,6]. Comme l'imagerie à bande étroite, l'i-scan peut réaliser une chromoendoscopie virtuelle, mais jusqu'à présent, aucune étude n'a été menée pour déterminer le rôle de cette technologie dans l'évaluation de l'activité dans les maladies inflammatoires de l'intestin [7].

But de l'étude Le but de l'étude est de comparer les résultats d'imagerie du p-CLE en conjonction avec l'endoscopie I-scan avec le score d'activité et le diagnostic histologique.

Patients et méthodes L'étude inclura prospectivement des patients atteints de colite ulcéreuse active ou de la maladie de Crohn qui répondent aux critères d'inclusion et d'exclusion. Tous les patients seront examinés par coloscopie conventionnelle, suivie d'un examen I-scan et p-CLE, et des échantillons de biopsie seront prélevés pour chaque segment du côlon. Ensuite, la corrélation entre l'histologie en tant que "gold standard", le score d'activité (score Mayo pour la colite ulcéreuse, respectivement Crohn's Disease Activity Index pour la maladie de Crohn) et les résultats d'imagerie seront calculés pour les zones pathologiques et normales.

Critère d'intégration

• Âge > 18 ans, homme ou femme
• Patients diagnostiqués avec une colite ulcéreuse active (score MAYO> 3) ou une maladie de Crohn (score CDAI> 150), lorsqu'il existe une indication de traitement et de coloscopie. Les patients nouvellement diagnostiqués ainsi que les patients déjà sous traitement oral au 5-ASA peuvent être inclus.
• Consentement éclairé signé pour la coloscopie et l'examen p-CLE Critères d'exclusion
• Défaut de fournir un consentement éclairé
• Patients avec une contre-indication à la coloscopie
• Allergie connue à la fluorescéine
• Patientes enceintes ou allaitantes
• Traitement immunosuppresseur systémique en cours avec de la prednisolone, de l'azathioprine ou des agents biologiques.

Les données collectées pour chaque participant comprendront :

• Données personnelles (nom, prénom, âge, sexe)
• Résultats des enquêtes précédentes
• Évaluation clinique (fréquence des selles, saignements rectaux, fièvre, douleurs abdominales, manifestation extra-intestinale, masse abdominale) et formule sanguine pour le calculateur d'indice d'activité (score Mayo pour la colite ulcéreuse, respectivement score CDAI pour la maladie de Crohn)
• Résultats endoscopiques
• Résultats histologiques et immunohistochimiques
• Résultats d'analyse moléculaire

Examens d'imagerie

• Tous les patients seront examinés par coloscopie I-scan et le degré et la distribution de l'inflammation aiguë seront évalués.
• L'examen p-CLE suivra, après l'administration intraveineuse du produit de contraste (2,5 ml de fluorescéine 10%), dans chaque segment du côlon dans les zones normales et pathologiques.
• Les données d'image seront stockées numériquement pour une analyse hors ligne (film de 10 à 20 secondes pour chaque zone examinée).
• Des échantillons de biopsie seront prélevés dans chaque zone examinée par p-CLE pour une analyse histologique, immunohistochimique et moléculaire.

Le matériel biologique collecté au cours de l'étude (cela comprendra un ml de sang total et de biopsies tissulaires de tissus normaux et de zones modifiées de 2 à 3 mm chacune) sera congelé et stocké. Lorsque le nombre prévu de participants est atteint, les échantillons feront l'objet d'études moléculaires pour évaluer les marqueurs de l'angiogenèse, comme détaillé plus loin dans le protocole. Les matériels biologiques seront stockés et analysés pendant une durée estimée à 18 mois à compter du début de l'essai. Une fois l'étude terminée, les biomatériaux seront éliminés.

Échantillons biologiques pour tests moléculaires :

• Des échantillons de sang seront prélevés avant les procédures d'imagerie

  1. Pour l'extraction d'ADN, 2 à 5 ml de sang peuvent être prélevés dans des cuves contenant de l'EDTA et conservés à 4 °C pendant une journée ou transférés dans un congélateur à -80 °C pour une conservation plus longue
  2. Pour l'extraction d'ARN, 2 à 5 ml de sang doivent être collectés dans des tubes PAX et conservés au maximum 2 heures à température ambiante, puis transférés dans un congélateur à -80 ° C pour une conservation plus longue.
• Échantillons de tissus :

Méthodes possibles pour stabiliser les échantillons de tissus pour une analyse moléculaire plus poussée (ARN/ADN/protéine) :

1. 0,3-0,5 cm de tissu sont stockés immédiatement dans un tube contenant la solution RNAlater pendant environ 24 heures à 4°C ; après cela, la solution RNAlater est retirée du tube (dans des conditions stériles) et l'échantillon est congelé à -80°C jusqu'à l'extraction de l'ARN/ADN.
2. 0,3-0,5 cm de tissu sont stockés immédiatement dans un tube cryogénique vide et jetés dans un récipient contenant de l'azote liquide ou de la neige carbonique avec du méthanol.

Principales mesures des résultats :

• Les résultats de p-CLE sont enregistrés et comparés aux résultats de la coloscopie conventionnelle et de la coloscopie I-scan.
• Les résultats de la coloscopie p-CLE et I-scan sont comparés à l'évaluation pathologique d'échantillons de tissus.

Mesures de résultats secondaires :

• Effet du traitement, basé sur les résultats de la coloscopie conventionnelle, I-scan et p-CLE
• Temps d'enregistrement de la procédure.
• Enregistrement des complications possibles

Risques et effets secondaires Des complications peuvent survenir lors d'une coloscopie, mais elles sont rares. Celles-ci consistent en un saignement au site de la biopsie qui est généralement minime, spontanément résolutif et nécessite rarement un suivi. La perforation de l'intestin est extrêmement rare. Le profil de sécurité de l'agent de contraste (fluorescéine) a montré une très faible incidence d'effets secondaires. Il n'est pas néphrotoxique et l'incidence d'hypersensibilité ou d'événements allergiques graves est faible. La fluorescéine est approuvée pour une utilisation clinique dans les pays de l'UE.