I-Scan 和共聚焦激光内镜在评估慢性炎症性肠病中的价值 (I-Scan-CLE-IBD)

I-Scan 和共聚焦激光内镜在慢性炎症性肠病评估中的价值

背景 结肠镜检查在慢性炎症性肠病 (IBD) 的诊断、活动评估、扩展和治疗反应中起着重要作用。 与组织学相比，常规检查低估了疾病的范围和活动性，因此，粘膜活检是这些患者内窥镜检查的重要组成部分。 进行多次活检非常耗时，继发性出血的风险较低但不可忽略，并导致诊断延迟，同时等待组织学分析。

共聚焦激光显微内窥镜检查是近年来出现的一种新技术，它实际上能够在正在进行的内窥镜检查过程中进行体内显微分析。 可以使用专用内窥镜 (eCLE) 或基于微型探针的系统 (pCLE) 进行内镜检查 [1]。 它是一种基于造影剂的技术，使用最广泛的药物是静脉注射荧光素 [2]。 基于探针的显微内窥镜系统由代表一束连接到微物镜的光纤的柔性导管探针、激光扫描单元以及控制和采集软件（Cellvizio；Mauna Kea Technology，法国巴黎）组成。 灵活的共聚焦微型探针专门设计用于通过标准内窥镜、胆道导管或胆管镜的工作通道，因此 pCLE 系统可以轻松集成到任何内窥镜检查单元中。 该技术的原理是基于将定义波长的激光束聚焦到目标组织，并将重新捕获的信号显示为单个水平面上的“光学活检”。

CLE 的潜在作用已经在上消化道和下消化道的病理学中得到探索，显示出基于对组织和血管模式的即时评估预测最终组织病理学诊断的良好准确性 [3]。 由于其扫描区域很小，该技术最好与其他“红旗”技术结合使用，以筛选感兴趣区域的粘膜，然后可以通过 CLE 检查以进行组织学诊断 [4]。

I-scan技术（Pentax，Tokyo，Japan）是一种新的图像增强内窥镜技术，由三种算法组成：表面增强（SE；通过识别边缘来增强结构）、对比度增强（CE；增强凹陷区域和结构差异（通过低密度区域的彩色呈现）和色调增强（TE；通过修改每个像素的 RGB 分量组合来针对个体器官进行增强）[5,6]。 像窄带成像 i-scan 可以实现虚拟的色素内镜检查，但直到现在还没有研究确定该技术在评估炎症性肠病活动度方面的作用 [7]。

研究目的 本研究的目的是将 p-CLE 的影像学发现与 I-扫描内窥镜检查相结合，与活动评分和组织学诊断进行比较。

患者和方法 该研究将前瞻性地纳入符合纳入和排除标准的活动性溃疡性结肠炎或克罗恩病患者。 所有患者都将通过常规结肠镜检查进行检查，然后进行 I 扫描检查和 p-CLE，并对结肠的每个部分采集活检样本。 然后，作为“金标准”的组织学、活动评分（溃疡性结肠炎的梅奥评分，分别为克罗恩病的克罗恩病活动指数）和影像学结果之间的相关性将被计算用于病理和正常区域。

纳入标准

• 年龄 > 18 岁，男性或女性
• 诊断为活动性溃疡性结肠炎（MAYO 评分>3）或克罗恩病（CDAI 评分>150）且存在治疗和结肠镜检查指征的患者。 可能包括新诊断的以及已经接受口服 5-ASA 治疗的患者。
• 签署结肠镜检查和 p-CLE 检查知情同意书 排除标准
• 未能提供知情同意
• 有结肠镜检查禁忌症的患者
• 已知对荧光素过敏
• 怀孕或哺乳期患者
• 使用泼尼松龙、硫唑嘌呤或生物制剂进行持续的全身免疫抑制治疗。

为每个参与者收集的数据将包括：

• 个人资料（名字、姓氏、年龄、性别）
• 先前调查的结果
• 临床评估（大便次数、直肠出血、发烧、腹痛、肠外表现、腹部肿块）和活动指数计算器的血细胞计数（溃疡性结肠炎梅奥评分，克罗恩病 CDAI 评分）
• 内镜检查结果
• 组织学和免疫组化结果
• 分子分析结果

影像学检查

• 所有患者都将通过 I-scan 结肠镜检查进行检查，并将评估急性炎症的程度和分布。
• p-CLE 检查将在静脉注射造影剂（2.5 ml 荧光素 10%）后，在正常和病理区域的每个结肠段进行。
• 图像数据将以数字方式存储以供离线分析（每个检查区域有 10-20 秒的影片）。
• 将从 p-CLE 检查的每个区域采集活检样本，用于组织学、免疫组织化学和分子分析。

研究期间收集的生物材料（这将包括来自正常组织和每个 2 至 3 毫米的修改区域的 1 毫升全血和组织活检）将被冷冻和储存。 当达到预期的参与者数量时，样本将进行分子研究，以评估血管生成的标志物，如协议中进一步详述。 生物材料将在试验开始后的 18 个月内储存和分析。 研究完成后，生物材料将被处理掉。

用于分子测试的生物样本：

• 血液样本将在成像程序之前收集

  1. 对于 DNA 提取，可以将 2-5 毫升血液收集在含有 EDTA 的试管中，并在 4°C 下储存一天或转移到 -80°C 冰箱中以便更长时间储存
  2. 对于 RNA 提取，必须将 2-5 ml 血液收集在 PAX 管中，并在室温下最多保存 2 小时，然后转移到 -80°C 的冰箱中进行更长时间的储存
• 组织样本：

稳定组织样本以进行进一步分子分析（RNA/DNA/蛋白质）的可能方法：

1. 将 0.3-0.5 cm 的组织立即储存在含有 RNAlater 溶液的试管中，在 4°C 下储存约 24 小时；之后，从试管中取出 RNAlater 溶液（在无菌条件下），并将样品冷冻在 -80°C 直至提取 RNA/DNA。
2. 将 0.3-0.5 厘米的组织立即储存在一个空的低温管中，然后扔进一个装有液氮或干冰和甲醇的容器中。

主要结果指标：

• 记录 p-CLE 结果并与常规结肠镜检查和 I-scan 结肠镜检查的结果进行比较。
• 将 p-CLE 和 I-scan 结肠镜检查结果与组织样本的病理学评估进行比较。

次要结果测量：

• 基于常规结肠镜检查、I-scan 和 p-CLE 结果的治疗效果
• 程序的注册时间。
• 登记可能的并发症

风险和副作用 结肠镜检查过程中可能会出现并发症，但这种情况很少见。 这些包括活检部位的出血，这种出血通常很少，是自限性的，很少需要随访。 肠穿孔极为罕见。 造影剂（荧光素）的安全性表明副作用的发生率非常低。 它没有肾毒性，超敏反应或严重过敏事件的发生率很低。 荧光素在欧盟国家被批准用于临床。