만성 염증성 장 질환 평가를 위한 I-Scan 및 공초점 레이저 내시경 검사의 가치 (I-Scan-CLE-IBD)

만성 염증성 장 질환 평가를 위한 I-Scan 및 공초점 레이저 내시경 검사의 가치

배경 대장내시경 검사는 만성 염증성 장 질환(IBD)의 진단, 활동 평가, 확장 및 치료에 대한 반응에 중요한 역할을 합니다. 기존의 검사는 조직학에 비해 질병의 범위와 활동성을 과소 평가하므로 점막 생검은 이러한 환자의 내시경 검사의 중요한 구성 요소입니다. 여러 번 생검을 하는 것은 시간이 많이 걸리고, 2차 출혈의 위험이 낮지만 무시할 수 없는 수준이며, 조직학적 분석을 기다리는 동안 진단이 지연됩니다.

공초점 레이저 내시경 검사는 진행 중인 내시경 검사 중에 실제로 생체 내 현미경 분석을 가능하게 하는 새로운 기술로 최근 몇 년 동안 등장했습니다. 내시경 검사는 전용 내시경(eCLE) 또는 미니프로브 기반 시스템(pCLE)을 사용하여 수행할 수 있습니다[1]. 조영제를 기반으로 한 기법으로 가장 널리 사용되는 제제는 정맥 투여되는 플루오레세인입니다[2]. 탐침 기반 endomicroscopy 시스템은 미세 물체에 연결된 광섬유 다발을 나타내는 유연한 카테터 탐침, 레이저 스캐닝 장치 및 제어 및 획득 소프트웨어(Cellvizio; Mauna Kea Technology, Paris, France)로 구성됩니다. 유연한 공초점 미니프로브는 표준 내시경, 담관 카테터 또는 담관경의 작업 채널을 통과하도록 특별히 설계되었으므로 pCLE 시스템은 모든 내시경 장치에 쉽게 통합될 수 있습니다. 이 기술의 원리는 표적 조직을 향해 초점을 맞추는 정의된 파장의 레이저 빔을 기반으로 하며 다시 포착된 신호는 단일 수평면에서 '광학 생검'으로 표시됩니다.

CLE의 잠재적인 역할은 상부 및 하부 위장관의 병리학에서 탐구되었으며, 조직 및 혈관 패턴의 즉각적인 평가를 기반으로 최종 조직병리학적 진단을 예측하는 데 좋은 정확도를 보여줍니다[3]. 스캐닝 영역이 작기 때문에 이 기술은 관심 영역에 대한 점막을 스크리닝하기 위해 다른 "위험 신호" 기술과 함께 가장 잘 사용되며 조직학적 진단을 위해 CLE에서 검사할 수 있습니다[4].

I-scan 기술(Pentax, Tokyo, Japan)은 표면강화(SE; 가장자리 인식을 통한 구조강화), 콘트라스트강화(CE; 저밀도 영역의 색상 표시를 통해 우울한 영역과 구조의 차이) 및 톤 향상(TE; 각 픽셀에 대한 RGB 구성 요소 조합의 수정을 통해 개별 기관에 맞는 향상) [5,6]. 협대역 이미징과 마찬가지로 i-scan은 가상 색소내시경 검사를 수행할 수 있지만 지금까지 염증성 장 질환의 활성 평가에서 이 기술의 역할을 결정하는 연구는 없었습니다[7].

연구의 목적 연구의 목적은 활성 점수 및 조직학적 진단과 함께 I-스캔 내시경과 함께 p-CLE의 영상 소견을 비교하는 것입니다.

환자 및 방법 이 연구는 포함 및 제외 기준을 충족하는 활동성 궤양성 대장염 또는 크론병 환자를 전향적으로 포함할 것입니다. 모든 환자는 기존 대장 내시경 검사에 이어 I-scan 검사 및 p-CLE로 검사하고 결장의 각 부분에 대해 생검 샘플을 채취합니다. 그런 다음, "골드 스탠다드"로서의 조직학, 활동 점수(궤양성 대장염에 대한 메이요 점수, 각각 크론병에 대한 크론병 활성 지수) 및 영상 소견 사이의 상관관계가 병리학적 및 정상 영역 모두에 대해 계산될 것입니다.

포함 기준

• 연령 > 18세, 남성 또는 여성
• 활동성 궤양성 대장염(MAYO 점수 >3) 또는 크론병(CDAI 점수 >150) 진단을 받고 치료 및 대장내시경 검사 적응증이 있는 환자. 신규 진단 및 이미 경구 5-ASA 요법을 받고 있는 환자가 포함될 수 있습니다.
• 대장 내시경 및 p-CLE 검사에 대한 사전 동의서 서명 제외 기준
• 정보에 입각한 동의 제공 실패
• 대장내시경 검사가 금기인 환자
• 플루오레세인에 대한 알려진 알레르기
• 임신 또는 수유 중인 환자
• 프레드니솔론, 아자티오프린 또는 생물학적 제제를 사용한 지속적인 전신 면역억제 요법.

각 참가자에 대해 수집된 데이터에는 다음이 포함됩니다.

• 개인정보(이름, 성, 나이, 성별)
• 이전 조사 결과
• 임상 평가(대변 빈도, 직장 출혈, 발열, 복통, 장 외 징후, 복부 종괴) 및 활동 지수 계산기의 혈구 수(궤양성 대장염의 경우 메이요 점수, 크론병의 경우 각각 CDAI 점수)
• 내시경 소견
• 조직학적 및 면역조직화학적 소견
• 분자 분석 결과

이미징 테스트

• 모든 환자는 I-scan 대장내시경으로 검사하고 급성 염증의 정도와 분포를 평가합니다.
• p-CLE 검사는 조영제(2.5 ml 플루오레세인 10%)를 정상 및 병리학적 영역 모두의 결장의 모든 부분에 정맥 투여한 후 수행됩니다.
• 이미지 데이터는 오프라인 분석을 위해 디지털 방식으로 저장됩니다(조사된 각 영역에 대한 10-20초 동영상).
• 조직학적, 면역조직화학적 및 분자적 분석을 위해 p-CLE에 의해 검사된 각 영역에서 생검 샘플을 채취할 것입니다.

연구 중에 수집된 생물학적 물질(여기에는 정상 조직 및 각각 2~3mm의 수정된 영역에서 얻은 전혈 및 조직 생검 1ml가 포함됨)이 동결되어 보관됩니다. 예상 참가자 수에 도달하면 샘플은 프로토콜에 자세히 설명된 대로 혈관신생 마커를 평가하기 위한 분자 연구를 받게 됩니다. 생물학적 물질은 시험 시작부터 18개월의 예상 기간 동안 저장 및 분석됩니다. 연구 완료 후 생체 재료는 폐기됩니다.

분자 테스트용 생물학적 샘플:

• 혈액 샘플은 이미징 절차 전에 수집됩니다.

  1. DNA 추출을 위해 2-5ml의 혈액을 EDTA가 들어 있는 통에 수집하고 하루 동안 4°C에서 보관하거나 장기간 보관을 위해 -80°C 냉동고로 옮길 수 있습니다.
  2. RNA 추출을 위해 2-5ml의 혈액을 PAX 통에 수집하고 실온에서 최대 2시간 보관한 다음 장기 보관을 위해 -80°C 냉동고로 옮겨야 합니다.
• 조직 샘플:

추가 분자 분석(RNA/DNA/단백질)을 위해 조직 샘플을 안정화하는 가능한 방법:

1. 0,3-0,5cm의 조직을 RNAlater 용액이 들어 있는 튜브에 즉시 4°C에서 약 24시간 동안 보관합니다. 그 후 RNAlater 용액을 튜브에서 꺼내고(무균 상태에서) 샘플을 RNA/DNA 추출할 때까지 -80°C에서 동결합니다.
2. 0,3-0,5cm의 조직을 빈 극저온 튜브에 즉시 저장하고 액체 질소 또는 메탄올이 든 드라이아이스가 들어 있는 용기에 넣습니다.

주요 결과 측정:

• p-CLE 소견을 기록하여 기존 대장내시경 및 I-scan 대장내시경 소견과 비교합니다.
• p-CLE 및 I-scan 대장내시경 소견을 조직 샘플의 병리학적 평가와 비교합니다.

2차 결과 측정:

• 기존 대장내시경, I-scan, p-CLE 결과에 따른 치료 효과
• 절차의 등록 시간.
• 가능한 합병증 등록

위험 및 부작용 대장 내시경 검사 중에 합병증이 발생할 수 있지만 드문 경우입니다. 이들은 생검 부위의 출혈로 구성되며 일반적으로 최소이고 자가 제한적이며 추적 관찰이 거의 필요하지 않습니다. 장 천공은 극히 드뭅니다. 조영제(플루오레세인)의 안전성 프로파일은 부작용 발생률이 매우 낮은 것으로 나타났습니다. 신독성이 없으며 과민증 또는 심각한 알레르기 반응의 발생률이 낮습니다. Fluorescein은 EU 국가에서 임상용으로 승인되었습니다.