ひと子宮内膜によって分泌される細胞外小胞の分離と特徴付け

過去数十年で、より一般的には細胞外小胞と見なされる膜で囲まれたコンパートメントの放出は、複雑な生物の細胞間、単細胞生物間、または単細胞生物と宿主の間のいずれかの新しいコミュニケーションメカニズムとして確立されました。 これらの小胞はすべての体液で説明されており、現在、それらが形成されるメカニズムに従って 3 つのタイプに分類されます。 100 ～ 1000 nm の微小胞 (細胞膜から形成される) と、サイズが 1 μm を超えるアポトーシス体 (プログラム細胞死を受ける細胞によって生成される)。

子宮内膜液は、子宮と血清滲出液を形成するさまざまな細胞タイプに由来する、子宮腔に存在する粘性液体です。 胚が着床し、低侵襲技術で回収できる状況を正確に把握できます。

このパイロット研究の主な目的は、子宮内膜によって子宮内膜液に分泌される細胞外小胞を分離して特徴付けることであり、この事実が記述されているのはこれが初めてです。 子宮内膜液内に存在するさまざまな小胞集団の分離方法を標準化することを目的としています (すなわち: アポトーシス体、微小胞、およびエキソソーム)、シリアル分画遠心分離とろ過に基づいています。 分離された小胞の形態学的特徴付けは、透過型電子顕微鏡による外部形態の研究、ウェスタンブロットによるさまざまな小胞集団表面マーカーの特徴付け、およびナノ粒子追跡分析による小胞集団サイズ分布の分析の 3 つのレベルで行われます。

研究の 2 番目の部分は、月経周期全体の細胞外小胞の内容を評価することを目的としています。 この目的のために、標準的な月経周期は 28 ～ 30 日で、次の 5 つのフェーズに分類されています。日 19-24) とフェーズ V (25 から 30)。 小胞の内容を説明するための実験計画は、比較の 2 つのレベルで構成されています。サイクルの各段階で、小胞集団のそれぞれについて、同じ小胞集団。 小胞内容物のこの特徴付けは、質量分析技術を使用して行われ、タンパク質、脂質、およびその他の小代謝物の組成が分析されます。 それらの存在は、周期の瞬間と子宮内膜の正常な生理学的機能の両方に関連することを目的としています. 一方、大規模なシーケンスによるこれらの小胞集団の DNA および RNA の内容の分析が実行されます。 ここでの目的は、標的細胞への機能の伝達と、月経周期の瞬間を決定するためのこれらの分子の潜在的な予測有用性を分析することです。