自動凍結保存された卵巣組織の残存疾患を検索する方法の検証 (VMRDO)

卵巣組織の凍結保存は、妊孕性を維持する目的で、性腺毒性の殺菌治療を受けなければならない 35 歳未満の少女と女性に提供されます。 原始および一次卵胞は凍結/解凍プロトコルに耐性があるため、卵巣の主要部分は保存されます。 他の技術 (in vivo 成熟、分離した卵胞の注入など) がない場合、この凍結保存された組織を自家移植することは、現在、生殖能力を回復できる唯一の技術です。 自家移植は、卵巣凍結保存の適応症が非腫瘍性病変または卵巣転移のリスクが低い悪性病変である場合にのみ可能です。 腫瘍性病変の他のケース、特に急性白血病のケースでは、残存病変 (MRD) を評価する体系化された手法がないため、組織はまだ再利用できません。 チームは 2 年間、急性白血病の場合に卵巣皮質の断片に残存する疾患を探す技術を開発し、検証してきました。 この手法は、卵巣組織を解離して、多色フローサイトメトリーで分析できる単離された卵巣細胞の集団を取得するための独自のプロトコルに基づいています。 この手法の特異性と感度は、実験モデルで実証されています。 このモデルは、8 色のフローサイトメトリーを使用して、モデルの卵巣皮質から採取した単離卵巣細胞の集団に異なる希釈で追加され、最大 10-5 の希釈で特徴付けられる白血病細胞を探すことで構成されます。 診断時に分子マーカーが存在する場合は、同じ希釈液を用いたリアルタイム定量的ポリメラーゼ連鎖反応 (RQ-PCR) によって検出されました。 モデル組織は、多嚢胞性卵巣症候群患者の腹腔鏡下卵巣掘削から得られました。 このプロジェクトの主な目的は、特徴付けられる可能性のある白血病細胞のさまざまな集団で以前に成文化された技術を検証することです。 次に、研究者は、転移のリスクがある白血病患者の卵巣皮質の凍結保存断片で 8 色フローサイトメトリーを使用して MRD を探すために、この手法を適応させて検証することを目指しています。 二次的な目的は、悪性病理の場合に移植片の腫瘍学的認定のための手順を実施し、これらの適応症のために自家移植技術を通じてこの凍結保存された卵巣組織を使用するための推奨事項を検討することです.