Menetelmän validointi jäännössairauden etsimiseksi itse kylmäsäilytetyistä munasarjakudoksista (VMRDO)

Munasarjakudoksen kylmäsäilytystä tarjotaan nuorille tytöille ja alle 35-vuotiaille naisille, joille on tehtävä steriloiva gonadotoksinen hoito hedelmällisyyden säilyttämiseksi. Suurin osa munasarjasta säilyy, koska alku- ja primaariset follikkelit kestävät jäätymis-/sulatusprotokollia. Muiden tekniikoiden puuttuessa (in vivo kypsyminen, eristettyjen munasarjojen follikkelien ruiskuttaminen jne.) tämän kylmäsäilytetyn kudoksen omasiirto on tällä hetkellä ainoa tekniikka, joka mahdollistaa hedelmällisyyden palauttamisen. Autografti on mahdollista vain, jos munasarjojen kylmäsäilytyksen indikaatio on ei-neoplastinen patologia tai pahanlaatuinen patologia, jossa munasarjojen etäpesäkkeiden riski on pieni. Muissa neoplastisten patologioiden tapauksissa, erityisesti akuutin leukemian tapauksissa, kudosta ei voida vielä käyttää uudelleen, koska jäännössairauden (MRD) arvioimiseksi ei ole olemassa kodifioitua tekniikkaa. Ryhmä on kahden vuoden ajan kehittänyt ja validoinut tekniikkaa, jolla etsitään jäännössairautta munasarjakuoren fragmenteista akuutin leukemian tapauksissa. Tämä tekniikka perustuu alkuperäiseen protokollaan munasarjakudoksen hajottamiseksi, jotta saadaan eristettyjen munasarjasolujen populaatio, joka voidaan analysoida monivärivirtaussytometrialla. Tekniikan spesifisyys ja herkkyys on osoitettu kokeellisella mallilla. Tässä mallissa käytetään 8 värin virtaussytometriaa karakterisoitavien leukemiasolujen etsimiseksi, jotka on lisätty eri laimennoksissa eristettyjen munasarjasolujen populaatioon, joka on otettu mallimunasarjakuoresta ja laimennokseen 10-5. Kun molekyylimarkkerit olivat läsnä diagnoosin yhteydessä, ne löydettiin reaaliaikaisella kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiolla (RQ-PCR) samoilla laimennoksilla. Mallikudos saatiin laparoskooppisesta munasarjojen porauksesta potilailla, joilla oli munasarjojen monirakkulatauti. Tämän projektin päätavoitteena on validoida tekniikat, jotka on aiemmin koodattu erilaisilla leukemiasolupopulaatioilla, jotka voidaan karakterisoida. Tämän jälkeen tutkijat pyrkivät mukauttamaan ja validoimaan tätä tekniikkaa etsiäkseen MRD:tä käyttämällä 8 värin virtaussytometriaa leukemiapotilaiden munasarjakuoren kylmäsäilytetyistä fragmenteista, joilla on metastaasiriski. Toissijaisina tavoitteina on ottaa käyttöön menetelmiä siirteiden onkologiseen pätevöintiin pahanlaatuisten patologioiden yhteydessä ja harkita suosituksia tämän kylmäsäilytetyn munasarjakudoksen käyttämiseksi autograft-tekniikan avulla näihin indikaatioihin.