Validación de un método para buscar enfermedad residual en tejidos ováricos autocriopreservados (VMRDO)

La criopreservación de tejido ovárico se ofrece a niñas y mujeres menores de 35 años que deben someterse a un tratamiento esterilizante gonadotóxico, con el objetivo de preservar su fertilidad. La parte principal del ovario se conserva, ya que los folículos primordiales y primarios son resistentes a los protocolos de congelación/descongelación. A falta de otras técnicas (maduración in vivo, inyección de folículos ováricos aislados, etc.), el autoinjerto de este tejido criopreservado es actualmente la única técnica que permite recuperar la fertilidad. El autoinjerto solo es posible si la indicación de criopreservación de ovario es una patología no neoplásica o una patología maligna con bajo riesgo de metástasis ovárica. En otros casos de patologías neoplásicas, particularmente en casos de leucemia aguda, el tejido aún no puede ser reutilizado debido a la falta de una técnica codificada para evaluar la enfermedad residual (ERM). El equipo lleva dos años desarrollando y validando una técnica para buscar enfermedad residual en fragmentos de corteza ovárica en casos de leucemia aguda. Esta técnica se basa en un protocolo original para disociar tejido ovárico para obtener una población de células ováricas aisladas que pueden analizarse mediante citometría de flujo multicolor. La especificidad y sensibilidad de la técnica han sido demostradas en un modelo experimental. Este modelo consiste en utilizar citometría de flujo de 8 colores para buscar células de leucemia caracterizables añadidas en diferentes diluciones a una población de células ováricas aisladas tomadas de la corteza ovárica modelo y hasta una dilución de 10-5. Cuando los marcadores moleculares estaban presentes en el diagnóstico, se encontraron mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa Cuantitativa en Tiempo Real (RQ-PCR) con las mismas diluciones. El modelo de tejido provino de la perforación ovárica laparoscópica en pacientes con síndrome de ovario poliquístico. El principal objetivo de este proyecto es validar técnicas previamente codificadas con diferentes poblaciones de células leucémicas que puedan ser caracterizadas. Luego, los investigadores tienen como objetivo adaptar y validar esta técnica para buscar MRD utilizando citometría de flujo de 8 colores en fragmentos crioconservados de corteza ovárica de pacientes con leucemia que están en riesgo de metástasis. Los objetivos secundarios serán implementar procedimientos para la calificación oncológica de los injertos en casos de patología maligna y considerar las recomendaciones para el uso de este tejido ovárico criopreservado mediante la técnica del autoinjerto para estas indicaciones.