Validering af en metode til at søge efter resterende sygdom i auto-kryokonserverede ovarievæv (VMRDO)

Kryokonservering af ovarievæv tilbydes til unge piger og kvinder under 35 år, som skal gennemgå steriliserende gonadotoksisk behandling, med det formål at bevare deres fertilitet. Den største del af æggestokken er bevaret, da primordiale og primære follikler er modstandsdygtige over for fryse-/optøningsprotokoller. I mangel af andre teknikker (in vivo-modning, injicering af isolerede ovariefollikler osv.) er autotransplantation af dette kryokonserverede væv i øjeblikket den eneste teknik, der gør det muligt at genoprette fertiliteten. Autograft er kun muligt, hvis indikationen for ovariekryopreservation er en ikke-neoplastisk patologi eller en malign patologi med lav risiko for ovariemetastaser. I andre tilfælde af neoplastiske patologier, især i tilfælde af akut leukæmi, kan væv endnu ikke genbruges på grund af manglen på nogen kodificeret teknik til evaluering af restsygdom (MRD). Holdet har i to år udviklet og valideret en teknik til at lede efter resterende sygdom i fragmenter af ovariebarken i tilfælde af akut leukæmi. Denne teknik er baseret på en original protokol til at dissociere ovarievæv for at opnå en population af isolerede ovarieceller, der kan analyseres ved flerfarvet flowcytometri. Teknikkens specificitet og følsomhed er blevet demonstreret i en eksperimentel model. Denne model består i at bruge 8 farve flowcytometri til at lede efter karakteriserbare leukæmiceller tilføjet i forskellige fortyndinger til en population af isolerede ovarieceller taget fra model ovarie cortex og op til en fortynding på 10-5. Når de molekylære markører var til stede ved diagnosen, blev de fundet ved realtids kvantitativ polymerasekædereaktion (RQ-PCR) med de samme fortyndinger. Modelvævet kom fra laparoskopisk ovarieboring hos patienter med polycystisk ovariesyndrom. Hovedformålet med dette projekt er at validere teknikker, der tidligere er blevet kodificeret med forskellige populationer af leukæmiceller, der kan karakteriseres. Efterforskerne sigter derefter på at tilpasse og validere denne teknik for at lede efter MRD ved hjælp af 8-farve flowcytometri på kryokonserverede fragmenter af ovariecortex fra leukæmipatienter, der er i risiko for metastase. Sekundære mål vil være at implementere procedurer for onkologisk kvalificering af transplantater i tilfælde af malign patologi og at overveje anbefalingerne for brug af dette kryokonserverede ovarievæv gennem autograftteknikken til disse indikationer.