Walidacja metody wyszukiwania choroby resztkowej w autokriokonserwowanych tkankach jajnika (VMRDO)

Kriokonserwacja tkanki jajnika jest oferowana młodym dziewczętom i kobietom do 35 roku życia, które muszą przejść zabieg sterylizacji gonadotoksycznej w celu zachowania płodności. Główna część jajnika jest zachowana, ponieważ pęcherzyki pierwotne i pierwotne są odporne na protokoły zamrażania/rozmrażania. Wobec braku innych technik (dojrzewanie in vivo, wstrzykiwanie wyizolowanych pęcherzyków jajnikowych itp.) autoprzeszczep tej zamrożonej tkanki jest obecnie jedyną techniką pozwalającą na przywrócenie płodności. Autoprzeszczep jest możliwy tylko wtedy, gdy wskazaniem do kriokonserwacji jajników jest patologia nienowotworowa lub patologia złośliwa z niskim ryzykiem przerzutów do jajnika. W innych przypadkach patologii nowotworowych, szczególnie w przypadkach ostrej białaczki, tkanka nie może być jeszcze ponownie wykorzystana ze względu na brak skodyfikowanej techniki oceny choroby resztkowej (MRD). Zespół od dwóch lat opracowuje i weryfikuje technikę poszukiwania pozostałości choroby we fragmentach kory jajnika w przypadkach ostrej białaczki. Technika ta opiera się na oryginalnym protokole dysocjacji tkanki jajnika w celu uzyskania populacji izolowanych komórek jajnika, które można analizować za pomocą wielobarwnej cytometrii przepływowej. Specyficzność i czułość tej techniki została wykazana w modelu eksperymentalnym. Model ten polega na wykorzystaniu 8-kolorowej cytometrii przepływowej do poszukiwania charakterystycznych komórek białaczkowych dodanych w różnych rozcieńczeniach do populacji izolowanych komórek jajnika pobranych z modelowej kory jajnika i do rozcieńczenia 10-5. Gdy markery molekularne były obecne w momencie diagnozy, zostały one znalezione za pomocą ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym (RQ-PCR) z tymi samymi rozcieńczeniami. Tkanka modelowa pochodziła z laparoskopowego borowania jajników u pacjentek z zespołem policystycznych jajników. Głównym celem tego projektu jest walidacja technik, które zostały wcześniej skodyfikowane z różnymi populacjami komórek białaczkowych, które można scharakteryzować. Następnie badacze zamierzają dostosować i zweryfikować tę technikę, aby szukać MRD za pomocą 8-kolorowej cytometrii przepływowej na kriokonserwowanych fragmentach kory jajnika od pacjentów z białaczką, u których istnieje ryzyko przerzutów. Celami drugorzędnymi będzie wdrożenie procedur kwalifikacji onkologicznej przeszczepów w przypadkach patologii złośliwej oraz rozważenie rekomendacji wykorzystania tej kriokonserwowanej tkanki jajnika techniką autoprzeszczepu dla tych wskazań.