MMAアスリートのスポーツパフォーマンスに対するプロバイオティクスとビタミンD補給の効果。

この研究は、4 週間のプロバイオティクスとビタミン D 介入期間を伴うランダム化二重盲検プラセボ対照臨床試験として設計されています。 この研究は、2020 年 12 月から 2021 年 3 月の間に、グダニスク医科大学の生体エネルギー学および運動生理学部門 (グダニスク、ポーランド) で実施されます。 研究者は、25 人のトレーニングを受けた総合格闘技の男性アスリートを登録します。 登録されたアスリートは、無作為および失明の規則に従って、Excel 乱数ジェネレーターを使用して、プロバイオティクス (PRO) または一致するプラセボ (PL) を 1:1 の比率で受け取るように無作為に割り当てられます。

試験製品は、5 種類の乳酸菌株のビタミン D、Juvit d3" およびプロバイオティクス混合物、Sanprobi Active & Sport" で、1 カプセルあたり 2.5 x 109 CFU/g (1 カプセルで 5 億 CFU 以上) を含みます。 （ビフィドバクテリウム・ラクティスＷ５１、ラクトバチルス・ブレビスＷ６３、ラクトバチルス・アシドフィルスＷ２２、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＷ２３およびラクトコッカス・ラクティスＷ５）；トウモロコシデンプ​​ン、マルトデキストリン、植物タンパク質、ヒドロキシプロピルエチルセルロース錠剤のコーティング。 カルテルには、40 mg のマルトデキストリンと植物性タンパク質を含む、見た目が同じプラセボ カプセルが使用されます。 プロバイオティクスまたはプラセボの各パックには、40 カプセルが含まれています。 すべてのアスリートは、ベースラインの訪問時に、ランダムな割り当てに応じて、Juvit d3 のボトルと、同じように見えるプロバイオティクスまたはプラセボの 3 つのパックを受け取ります。 参加者は、食事と一緒に 4 カプセルと 3500 iu のビタミン d を毎日摂取するように通知されます。

ベースラインの訪問時に、すべての被験者は、研究製品、サプリメントの日記、食事摂取量、およびトレーニング日記を受け取ります。 すべての手順を確実かつ適切に実施するために、PRE と POST の両方の訪問が 2 日に分割されます。 これらの分割された訪問の間の時間枠は 3 ～ 5 日です。 参加者は、4 週間の介入期間の開始時 (PRE) と終了時 (POST) にグダニスク医科大学に報告します。 両方の訪問中に、アスリートは体組成の評価、食物摂取頻度アンケート（FFQ）、心肺フィットネス評価を完了し、糞便サンプルを提供します. さらに、血液サンプルはスポーツテストの前後に採取され、選択された炎症マーカー、筋肉損傷状態、乳酸利用レベルを評価します。 最後の 1 回の採血は、24 時間の無酸素運動テストの後に行われます。 参加者は、トレーニング プログラムを継続するように指示されます。 アスリートは、研究の競争力を維持するために、週に少なくとも 5 回の持久力トレーニングを行う義務があります。

体組成分析は、体脂肪量と無脂肪量の潜在的な変化を検出するために評価されます。 各組織のレベルは、腸内細菌の含有量と比較されます。 研究者は、腸内微生物叢の組成が体組成に影響を与える可能性があるかどうか、およびどの細菌門がこの潜在的な変化の原因であるかを説明しようとします. このターゲットは、多周波生体電気インピーダンス分析 (BIA) によって取得されます。

有酸素運動能力は、ワッサーマン プロトコルを使用して、自転車エルゴメーター ER900 Jaeger で評価されます。 テストの前に、100 W の負荷で 5 分間のウォームアップを行い、その後 5 分間の休憩をとります。 テストは 125 W の負荷と 60 ± 5 RPM / 分の頻度で開始され、負荷は 1 分ごとに 25 W ずつ増加します。指定された頻度を維持しながら、または酸素摂取量を増加させずに運動を続けること。 検査中、研究者は酸素摂取量と吐き出された二酸化炭素の量、分時肺換気量、心拍数を監視します。 好気性試験は、PRE および POST 訪問の一環として、嫌気性評価の 3 ～ 5 日前に実施されます。

無酸素フィットネス評価は、サイクロエルゴメーター MCE_v_5.1 を使用した Wingate 無酸素テスト (WANT) によって取得されます。 検査の前に、サドルを個別に調整してから、アスリートは 50 W の負荷と 60 RPM/分の頻度で 5 分間のウォームアップを行い、3 分と 4 分間に 10 秒間の加速を 2 回行います。 ウォーミングアップ後、3分間の休憩をとります。 負荷は個別に調整され、アスリートの体重の 7.5% になります。 「開始」コマンドで、アスリートは座った姿勢で 30 秒間スプリントを実行し、できるだけ早くピーク パワーに到達し、努力の間ずっとそれを維持しようとします。 テスト終了後、2 分間の積極的な休憩があります。 試験は3回実施されます。 WANT は、最大、最小、平均電力、最大電力に到達するまでの時間、および相対的な電力低下を評価します。

血液サンプルは、2 つの時点での Wingate テスト中に収集されます: PRE および POST 介入、同じ条件で。 腕の静脈からの血液サンプルは、専門の看護師によって、それぞれ K2EDTA と凝固活性化剤を含む 2 つの適切な標準化されたチューブに採取されます。 毎回最大4mlの血液が採取されます。 血液サンプルは、運動テストの開始前、テスト終了の 30 分後、およびテスト終了の 24 時間後に間接的に採取されます。 その後、血液を 3000 x g で遠心分離して、血清と血漿を分離します。 材料は、個別にラベルを付けたマイクロ遠心チューブに入れ、後で測定するために-80°Cで保存します。 すべての分析は、グダニスクの医科大学での研究の最後に行われます。

採取された静​​脈血サンプルは、グダニスク医科大学で分析されます。 研究者は、市販の酵素結合免疫吸着アッセイ (ELISA) キットを使用して、血清炎症誘発性サイトカイン (IL-6 および TNF-α) と抗炎症性サイトカイン (L-2 および IL-15) のレベルを評価します。 筋肉損傷研究者の血漿レベルを評価するために、市販のキットを使用して、速度論的方法を通じてクレアチンキナーゼ (CK) の活性を決定します。

毛細血管の血液サンプルは毎回採取され、ウィンゲート試験は専門の看護師によって、100 μL の量で無菌の目盛り付きマイクロキャピラリーに行われます。 測定は指先の毛細血管血で行われます。 次に、血液を 500 μl の 0.6 mol 過塩素酸を含む微量遠心管に移し、遠心分離し、測定が行われるまで -20 ℃ で保存します。 毛細血管血は、運動テストの前と、テストの 2 ～ 3 分後、15 分後、30 分後、および 60 分後に採取されます。 採取された毛細血管の血液サンプルは、グダニスク医科大学で分析されます。 分析の目的は、採取したサンプル中の乳酸のレベルを決定することです。 乳酸レベルの決定は、反応速度に基づいて、比色速度論法を使用して実行されます。

被験者は、介入期間の前後に糞便サンプルを間接的に提供します。 材料は、参加者によって特別な標準化されたコンテナに収集されます。 便のサンプルは 2 回採取されます: テスト前と介入の最後です。 便サンプルは直ちに凍結され、摂氏-80度で保存され、同じ条件で独立した検査機関によって評価に運ばれます. 収集された糞便サンプルは、新世代のシーケンス法を使用して、腸内微生物叢の定量的および定性的な内容にさらされます。 16SrRNA 遺伝子の選択された超可変領域が分析されます。 マイクロバイオームの構成は、主にアルファとベータの多様性によって特徴付けられます。 1 つのサンプル (アルファ) 内の微生物群集の多様性は、Chao1、ACE、シャノン、逆シンプソンなどのいくつかの指標を使用して測定されます。 すべての指標は生のNGSデータに基づいて計算されます（前処理なし、例えば 変数の分布に応じた標準的な統計検定を使用して、試験群と対照群を比較しました。 サンプル間の微生物群集の多様性 (ベータ版) は、差異指標 (Bray-Curtis) と距離メトリック (UniFrac 加重 - 系統発生ベースのメトリック) を使用して測定されます。 類似性指標は、すべてのサンプル ペアに対して計算され、非類似性マトリックスに格納されます。 Bray-Curtis は、順列多変量分散分析 (PERMANOVA) と加重 UniFrac 差行列を実行して、グループ レベルでの差を評価します。 ベータ多様性分析の前に、希少種の除去や、配列決定の深さの中央値をスケーリング係数として使用した数値の変換など、監視された無人のデータの前処理が行われます。 収集された糞便サンプルは、カルプロテクチン、ゾヌリン、IFABP などの腸透過性パラメーター、および短鎖脂肪酸 (SCFA) などの細菌代謝産物の存在との関連で分析されます。

得られたすべてのデータは、統計プログラム Statistica 13 を使用して分析されます。 統計分析には、すべての介入期間およびすべての研究手順を完了した被験者からの完全なデータのみが含まれます。 Shapiro-Wilk W 検定を使用して、データの正規性を事前にチェックします。 データが異常に分布している場合は、自然対数が使用されます。 研究者は通常、背景情報の説明統計を使用し、分析されたパラメーターの傾向を 95% 信頼区間の平均値で調べます。 基礎となるデータの正規性に応じて、パラメトリックまたはノンパラメトリック検定が実行されます。 統計的有意性は p < 0.05 に設定されています。