프로바이오틱스와 비타민 D 보충이 MMA 선수의 경기력에 미치는 영향.

이 연구는 4주간의 프로바이오틱스 및 비타민 D 개입 기간을 갖는 무작위 이중 맹검 위약 대조 임상 시험으로 설계되었습니다. 이 연구는 2020년 12월부터 2021년 3월 사이에 그단스크 의과대학 생체에너지 및 운동생리학과(폴란드 그단스크)에서 수행되었습니다. 연구원들은 25명의 훈련된 남성 종합격투기 선수들을 등록할 것입니다. 등록된 운동선수는 임의 및 맹검의 규칙에 따라 Excel 난수 생성기를 사용하여 1:1 비율로 프로바이오틱스(PRO) 또는 일치하는 플라시보(PL)를 받도록 무작위로 배정됩니다.

연구 제품은 유산균 5종의 유산균 1캡슐당 2,5 x 109 CFU/g(1캡슐에 ≥500 million CFU) 함유된 비타민 D,,주빗 d3" 및 프로바이오틱 혼합물,,산프로비 액티브 앤 스포츠"입니다. (Bifidobacterium lactis W51, Lactobacillus brevis W63, Lactobacillus acidophilus W22, Bifidobacterium bifidum W23 및 Lactococcus lactis W5); 옥수수 전분, 말토덱스트린, 식물성 단백질 및 히드록시프로필 에틸셀룰로오스 정제 코팅. 40mg의 말토덱스트린과 식물 단백질을 함유한 동일하게 생긴 위약 캡슐이 카르텔에 사용됩니다. 각 프로바이오틱 또는 위약 팩에는 40개의 캡슐이 들어 있습니다. 모든 선수는 베이스라인 방문 시 Juvit d3 1병과 무작위 할당에 따라 똑같이 생긴 프로바이오틱스 또는 위약 3개를 받게 됩니다. 참가자는 식사와 함께 4 캡슐과 매일 3500 iu의 비타민 d를 섭취하도록 안내받을 것입니다.

기준선 방문 시, 모든 피험자는 연구 제품과 보충제 일지, 식이 섭취 및 훈련 일지를 받게 됩니다. PRE 및 POST 방문은 모든 절차의 안정적이고 적절한 수행을 위해 2일로 분할됩니다. 이러한 분할 방문 사이의 기간은 3-5일입니다. 참가자는 4주 개입 기간의 시작(PRE)과 종료(POST)에 그단스크 의과 대학에 보고합니다. 두 번의 방문 동안 운동선수는 체성분 평가, 음식 빈도 설문지(FFQ), 심폐 건강 평가를 완료하고 배설물 샘플을 제공합니다. 또한 스포츠 테스트 전후에 혈액 샘플을 채취하여 선택된 염증 마커, 근육 손상 상태 및 젖산 이용 수준을 평가합니다. 마지막 1회 채혈은 혐기성 스포츠 검사 24시간 후 실시합니다. 참가자는 교육 프로그램을 계속하도록 지시를 받습니다. 운동선수는 연구의 경쟁력 있는 특성을 유지하기 위해 매주 최소 5회의 지구력 운동을 수행해야 합니다.

체성분 분석은 체지방량 및 제지방량 내의 잠재적인 변화를 감지하기 위해 평가됩니다. 각 조직의 수준은 장내 세균 함량과 비교됩니다. 연구자들은 장내 마이크로바이옴 구성이 신체 구성에 영향을 미칠 수 있는지, 그리고 어떤 세균 문이 이러한 잠재적인 변화에 책임이 있는지 설명하려고 노력할 것입니다. 이 목표는 다중 주파수 생체 전기 임피던스 분석(BIA)을 통해 얻을 것입니다.

유산소 운동 능력은 wasserman 프로토콜을 사용하여 자전거 에르고미터 ER900 Jaeger를 통해 평가됩니다. 테스트는 100W 부하로 5분간 워밍업한 후 5분간 휴식합니다. 테스트는 125W의 부하와 60±5RPM/분의 빈도에서 시작되며, 부하가 1분마다 25W씩 증가합니다. 테스트는 최대 개별 운동 부하에 도달할 때까지, 즉 무능력 지정된 빈도를 유지하면서 운동을 계속하거나 증가 산소 섭취량 부족. 검사 중에 조사관은 산소 섭취량과 내쉬는 이산화탄소의 양, 분당 폐 환기 및 심박수를 모니터링합니다. 유산소 테스트는 PRE 및 POST 방문의 일부로 혐기성 평가 3-5일 전에 수행됩니다.

무산소 체력 평가는 사이클로에르고미터 MCE_v_5.1을 사용하는 WAnT(Wingate Anaerobic Test)에 의해 획득됩니다. 검사 전에 안장을 개별적으로 조정한 다음 선수는 50W 부하 및 60RPM/분의 빈도로 5분 워밍업을 수행하고 3분 및 4분에 10초 가속을 두 번 수행합니다. 워밍업 후 3분간 휴식을 취합니다. 하중은 개별적으로 조정되며 선수 체중의 7.5%에 달합니다. "시작" 명령에 따라 선수는 앉은 자세에서 30초 동안 스프린트를 수행하여 가능한 한 빨리 최대 파워에 도달하고 노력하는 동안 이를 유지하려고 노력합니다. 시험이 끝나면 2분간의 휴식 시간이 있습니다. 시험은 3회 실시한다. WAnT는 최대, 최소 및 평균 전력, 최대 전력에 도달하는 시간 및 상대적 전력 강하를 평가합니다.

혈액 샘플은 동일한 조건에서 PRE 및 POST 개입의 두 시점에서 Wingate 테스트 중에 수집됩니다. 팔 정맥의 혈액 샘플은 전문 간호사가 각각 K2EDTA와 응고 촉진제를 포함하는 두 개의 적절한 표준화된 튜브로 채취합니다. 매번 최대 4ml의 혈액이 수집됩니다. 혈액 샘플은 운동 테스트 시작 전, 테스트 종료 후 30분 및 테스트 종료 후 24시간 동안 간접적으로 채취됩니다. 그런 다음 혈액을 3000 x g에서 원심분리하여 혈청과 혈장을 분리합니다. 물질은 별도로 라벨링된 마이크로원심분리기 튜브에 넣고 추후 결정을 위해 -80°C에 보관합니다. 모든 분석은 연구 종료 시 그단스크 의과대학에서 수행됩니다.

수집된 정맥혈 샘플은 그단스크 의과대학에서 분석될 것입니다. 연구원들은 상업적으로 이용 가능한 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 키트를 사용하여 항염증성 사이토카인(L-2 및 IL-15)뿐만 아니라 혈청 전 염증성 사이토카인(IL-6 및 TNF-α)의 수준을 평가할 것입니다. 근육 손상의 혈장 수준을 평가하기 위해 연구원은 시중에서 판매되는 키트를 사용하여 동역학 방법을 통해 크레아틴 키나아제(CK)의 활성을 결정합니다.

매번 모세혈관 혈액 샘플을 채취하고 전문 간호사가 100µL의 양으로 멸균 눈금 미세모세관에 Wingate 테스트를 수행합니다. 측정은 손가락 끝 모세혈관에서 수행됩니다. 그런 다음 혈액을 500µl 0.6mol 과염소산이 들어 있는 마이크로 원심분리기 튜브로 옮기고 원심분리한 다음 측정이 수행될 때까지 -20°C에서 보관합니다. 운동 검사 전과 검사 후 2-3분, 15분, 30분, 60분 후에 모세혈관 혈액을 채취합니다. 수집된 모세혈관 혈액 샘플은 그단스크 의과대학에서 분석됩니다. 분석의 목적은 채취한 샘플의 젖산 수준을 결정하는 것입니다. 젖산 수준의 결정은 반응 속도를 기반으로 비색 동역학 방법을 사용하여 수행됩니다.

피험자는 개입 기간 전후에 대변 샘플을 간접적으로 제공합니다. 자료는 참가자가 특수 표준화된 용기에 수집합니다. 대변 ​​샘플은 검사 전과 개입 종료 시 두 번 채취합니다. 대변 ​​샘플은 즉시 냉동되어 섭씨 -80도에 보관된 다음 동일한 조건에서 독립적인 실험실의 평가로 이송됩니다. 수집된 대변 샘플은 차세대 시퀀싱 방법을 사용하여 장내 미생물의 양적 및 질적 내용물에 적용됩니다. 16SrRNA 유전자의 선택된 초가변 영역이 분석됩니다. 마이크로바이옴의 구성은 주로 알파 및 베타 다양성으로 특징지어질 것입니다. 하나의 샘플(알파)에서 미생물 군집의 다양성은 Chao1, ACE, Shannon 및 inverted Simpson과 같은 여러 지표를 사용하여 측정됩니다. 모든 지표는 원시 NGS 데이터를 기반으로 계산됩니다(예: 희귀종 제거) 변수의 분포에 따라 표준통계검정을 이용하여 검정군과 대조군을 비교하였다. 샘플(베타) 간의 미생물 군집의 다양성은 차이 지표(Bray-Curtis) 및 거리 메트릭(UniFrac 가중 - 계통 발생 기반 메트릭)을 사용하여 측정됩니다. 유사성 지표는 모든 샘플 쌍에 대해 계산되고 비유사성 매트릭스에 저장됩니다. Bray-Curtis는 순열 다변량 분산 분석(PERMANOVA) 및 가중 UniFrac 차이 행렬을 수행하여 그룹 수준에서 차이를 평가합니다. 베타 다양성 분석은 희귀종 제거 및 배율 인수로 중간 시퀀싱 깊이를 사용하여 숫자 변환과 같은 데이터의 감독 및 무인 전처리가 선행됩니다. 수집된 대변 샘플은 칼프로텍틴, 조눌린 및 IFABP와 같은 장 투과성 매개변수와 단쇄 지방산(SCFA)과 같은 박테리아 대사 산물의 존재 맥락에서 분석됩니다.

얻은 모든 데이터는 통계 프로그램 Statistica 13을 사용하여 분석됩니다. 통계 분석에는 모든 개입 기간과 모든 연구 절차를 완료한 피험자의 전체 데이터만 포함됩니다. 데이터는 이전에 Shapiro-Wilk W-test를 사용하여 정규성을 확인합니다. 데이터가 비정상적으로 분포된 경우에는 자연로그를 사용한다. 연구원은 일반적으로 배경 정보에 대한 기술 통계를 제공하고 95% 신뢰 구간의 평균값으로 분석된 매개변수의 추세를 조사합니다. 기본 데이터의 정규성에 따라 파라메트릭 또는 비모수 테스트가 수행됩니다. 통계적 유의성은 p < 0.05로 설정됩니다.