L'effet des probiotiques et de la supplémentation en vitamine D sur les performances sportives des athlètes MMA.

L'étude est conçue comme un essai clinique randomisé en double aveugle contrôlé par placebo avec des probiotiques de 4 semaines et une période d'intervention en vitamine D. L'étude est menée entre décembre 2020 et mars 2021, à l'Université de médecine de Gdańsk, Département de bioénergétique et de physiologie de l'exercice (Gdańsk, Pologne). Les chercheurs recruteront 25 athlètes masculins formés aux arts martiaux mixtes. Les athlètes inscrits seront assignés au hasard pour recevoir un probiotique (PRO) ou un placebo correspondant (PL) dans un rapport de 1: 1, en utilisant le générateur de nombres aléatoires Excel, en suivant la règle du hasard et de la cécité.

Le produit à l'étude est un mélange de vitamine D ,,Juvit d3" et de probiotiques,,Sanprobi Active & Sport", contenant 2,5 x 109 UFC/g par capsule (≥500 millions d'UFC dans une capsule) de cinq souches de bactéries lactiques (Bifidobacterium lactis W51, Lactobacillus brevis W63, Lactobacillus acidophilus W22, Bifidobacterium bifidum W23 et Lactococcus lactis W5); l'amidon de maïs, la maltodextrine, les protéines végétales et l'enrobage des comprimés d'hydroxypropyléthylcellulose. Des capsules placebo d'apparence identique contenant 40 mg de maltodextrine et de protéines végétales seront utilisées pour cartel. Chaque paquet de probiotique ou de placebo contient 40 gélules. Tous les athlètes recevront une bouteille de Juvit d3 ainsi que trois emballages identiques de probiotiques ou de placebo, selon l'attribution aléatoire, lors de la visite de référence. Les participants seront informés de prendre 4 gélules avec les repas et 3500 ui de vitamine d par jour.

Lors de la visite de référence, tous les sujets recevront le produit de l'étude ainsi qu'un journal des suppléments et un journal des apports alimentaires et de l'entraînement. Les visites PRE et POST seront divisées en deux jours afin d'effectuer de manière fiable et appropriée toutes les procédures. La fenêtre de temps entre ces visites fractionnées est de 3 à 5 jours. Les participants se présenteront à l'Université de médecine de Gdańsk au début (PRE) et à la fin (POST) de la période d'intervention de 4 semaines. Au cours des deux visites, les athlètes rempliront une évaluation de la composition corporelle, un questionnaire de fréquence alimentaire (FFQ), une évaluation de la condition physique cardio-respiratoire et fourniront des échantillons fécaux. De plus, les échantillons de sang seront prélevés avant et après les tests sportifs, afin d'évaluer des marqueurs sélectionnés de l'état inflammatoire ainsi que des dommages musculaires et du niveau d'utilisation du lactate. Le dernier prélèvement sanguin sera effectué après 24 heures de test sportif anaérobie. Le participant sera invité à poursuivre son programme de formation. Les athlètes seront obligés d'effectuer au moins 5 entraînements d'endurance par semaine pour conserver le caractère compétitif de l'étude.

L'analyse de la composition corporelle sera évaluée pour détecter les changements potentiels dans la masse grasse corporelle et la masse sans graisse. Le niveau de chaque tissu sera comparé au contenu en bactéries intestinales. Les enquêteurs tenteront d'expliquer si la composition du microbiome intestinal peut affecter la composition corporelle et quels phylums bactériens sont responsables de ces changements potentiels. Cette cible sera obtenue par analyse d'impédance bioélectrique multifréquence (BIA).

La capacité de forme aérobie sera évaluée à l'aide du vélo ergomètre ER900 Jaeger en utilisant le protocole Wasserman. Le test sera précédé d'un échauffement de 5 minutes avec une charge de 100 W, suivi d'un repos de 5 minutes. Le test commencera à une charge de 125 W et une fréquence de 60 ± 5 RPM / min, la charge sera augmentée toutes les 1 minutes de 25 W. Le test sera effectué jusqu'à ce que la charge d'exercice individuelle maximale soit atteinte, c'est-à-dire l'incapacité de continuer l'exercice tout en maintenant la fréquence spécifiée ou l'absence d'augmentation de la consommation d'oxygène. Au cours de l'examen, les enquêteurs surveilleront la quantité d'oxygène absorbée et de dioxyde de carbone expiré, la ventilation pulmonaire minute ainsi que la fréquence cardiaque. Le test aérobie sera effectué 3 à 5 jours avant l'évaluation anaérobie dans le cadre des visites PRE et POST.

L'évaluation de la condition anaérobie sera obtenue par le test anaérobie Wingate (WAnT) à l'aide du cycloergomètre MCE_v_5.1. Avant l'examen, la selle sera ajustée individuellement, puis les athlètes effectueront un échauffement de 5 minutes à une charge de 50 W et une fréquence de 60 RPM/min, avec deux accélérations de 10 secondes en 3 et 4 minutes. Après l'échauffement, il y aura 3 minutes de repos. La charge sera ajustée individuellement et s'élèvera à 7,5% du poids corporel de l'athlète. Au commandement "start", l'athlète effectuera un sprint de 30 secondes en position assise, en essayant d'atteindre le plus rapidement possible la puissance maximale et de la maintenir pendant toute la durée de l'effort. Après le test, il y aura une pause active de 2 minutes. Le test sera effectué 3 fois. Le WAnT évalue la puissance maximale, minimale et moyenne, le temps nécessaire pour atteindre la puissance maximale et la chute de puissance relative.

Les échantillons sanguins seront prélevés lors des tests Wingate aux deux moments : PRE et POST intervention, dans les mêmes conditions. Des échantillons de sang de la veine du bras seront prélevés par une infirmière spécialisée dans deux tubes standardisés appropriés contenant respectivement du K2EDTA et un activateur de coagulation. Chaque fois jusqu'à 4 ml de sang seront prélevés. Des échantillons de sang seront prélevés indirectement avant le début des tests d'effort, 30 minutes après la fin des tests et 24 heures après la fin des tests. Le sang sera ensuite centrifugé à 3000 x g pour séparer le sérum et le plasma. Le matériel sera placé dans des microtubes à centrifuger étiquetés séparément et conservé à -80 ° C pour des déterminations ultérieures. Toutes les analyses seront effectuées à la fin de l'étude à l'Université de médecine de Gdańsk.

Les échantillons de sang veineux collectés seront soumis à une analyse à l'Université de médecine de Gdańsk. Les chercheurs évalueront le niveau de cytokines pro-inflammatoires sériques (IL-6 et TNF-α) ainsi que de cytokines anti-inflammatoires (L-2 et IL-15) à l'aide de kits ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) disponibles dans le commerce. Pour évaluer le niveau plasmatique des lésions musculaires, les chercheurs détermineront l'activité de la créatine kinase (CK) par la méthode cinétique, en utilisant le kit disponible dans le commerce.

Des échantillons de sang capillaire seront prélevés à chaque fois, des tests de Wingate sont effectués, par une infirmière spécialisée, à raison de 100 µL, dans un microcapillaire gradué stérile. Les mesures seront effectuées sur le sang capillaire du bout des doigts. Le sang sera ensuite transféré dans un microtube à centrifuger contenant 500 µl d'acide perchlorique 0,6 mol, centrifugé et stocké à -20 degrés C jusqu'à ce que la détermination soit effectuée. Le sang capillaire sera prélevé avant le test d'effort et 2-3, 15, 30 et 60 minutes après le test. Les échantillons de sang capillaire collectés seront analysés à l'Université de médecine de Gdańsk. L'analyse aura pour but de déterminer le taux de lactate dans les échantillons prélevés. La détermination du niveau de lactate sera effectuée à l'aide de la méthode cinétique colorimétrique, basée sur la vitesse de réaction.

Les sujets fourniront un échantillon fécal indirectement avant et après la période d'intervention. Le matériel sera collecté par les participants dans un conteneur standardisé spécial. Un échantillon de selles sera prélevé deux fois : avant le test et à la fin de l'intervention. Les échantillons de selles seront immédiatement congelés et stockés à -80 degrés Celsius, puis dans les mêmes conditions transportés à l'évaluation par un laboratoire indépendant. Les échantillons fécaux collectés seront soumis au contenu quantitatif et qualitatif du microbiote intestinal à l'aide de la méthode de séquençage de nouvelle génération. Des régions hypervariables sélectionnées du gène 16SrRNA seront analysées. La composition du microbiome sera caractérisée principalement par la diversité alpha et bêta. La diversité des communautés microbiennes dans un échantillon (alpha) sera mesurée à l'aide de plusieurs indicateurs, tels que Chao1, ACE, Shannon et Simpson inversé. Tous les indicateurs seront calculés sur la base des données brutes de l'END (sans aucun prétraitement, par ex. suppression d'espèces rares) et comparé entre le groupe test et le groupe témoin à l'aide d'un test statistique standard en fonction de la distribution des variables. La diversité des communautés microbiennes entre les échantillons (bêta) sera mesurée à l'aide de l'indicateur de différence (Bray-Curtis) et des métriques de distance (pondérées UniFrac - une métrique basée sur la phylogenèse). Des indicateurs de similarité seront calculés pour toutes les paires d'échantillons et stockés dans des matrices de dissemblance. Bray-Curtis effectuera une analyse de variance multivariée par permutation (PERMANOVA) et des matrices de différence UniFrac pondérées pour évaluer les différences au niveau du groupe. L'analyse de la diversité bêta sera précédée d'un prétraitement supervisé et sans surveillance des données, comme la suppression des espèces rares et la transformation des nombres en utilisant la profondeur de séquençage médiane comme facteur d'échelle. Les échantillons fécaux collectés seront analysés dans le contexte de la présence de paramètres de perméabilité intestinale tels que la calprotectine, la zonuline et l'IFABP ainsi que des produits du métabolisme bactérien tels que les acides gras à chaîne courte (SCFA).

Toutes les données obtenues seront analysées à l'aide du programme statistique Statistica 13. Seules les données complètes, provenant de sujets ayant terminé toute la période d'intervention ainsi que toutes les procédures d'étude, seront incluses dans l'analyse statistique. La normalité des données sera préalablement vérifiée à l'aide du test W de Shapiro-Wilk. Dans le cas de données anormalement distribuées, leurs logarithmes naturels seront utilisés. Les chercheurs utiliseront les statistiques descriptives habituelles pour obtenir des informations de base ainsi que pour examiner les tendances des paramètres analysés avec des valeurs moyennes d'intervalle de confiance de 95 %. Selon la normalité des données sous-jacentes, des tests paramétriques ou non paramétriques seront effectués. La signification statistique est fixée à p < 0,05.