母体の EED 研究

具体的な目的:

目的 1 - ヒト研究の構成要素 低 BMI および正常 BMI の小腸 (SI) および糞便マイクロバイオームと、介入前の SI 粘膜、血漿および糞便プロテオームの特徴の比較評価。

低BMI女性のEEDマイクロバイオームおよび生理学的状態への影響にアクセスするためのMDCF-2の介入。

将来の臨床研究に展開できる EED (糞便/血漿) の候補メディエーター/代替バイオマーカーを特定します。

AIM 1Aでは、バングラデシュの非妊娠の若い栄養失調女性（BMI<18.5kg/m2）のSIと糞便微生物叢、血漿、十二指腸、糞便のプロテオーム/メタボロームを比較します。 仙腸関節症の病理組織学的証拠がある患者と、BMI が正常 (20 ～ 24.9kg/m2) の患者 消化不良に対する定期的な内視鏡検査を受けている患者で、腸疾患の病理組織学的証拠がない患者。

AIM 1B 研究者らは、第 1 学期の終わりから開始する介入研究を実施します。この研究では、低 BMI (<18.5 kg/m2) の妊婦 (18 ～ 30 歳) が、いずれかの MDCF-2 を受ける群にランダムに割り当てられます。標準的な産前ケアに加えて、妊娠期間中および産後最初の 3 か月間は RUSF を受けることになります (n=30/腕)。 栄養介入を受けない、年齢が一致した正常BMIの妊婦の並行コホートは、参照対照群として機能します。

AIM 2 - 前臨床コンポーネント この目標には、治療標的同定コンポーネント (AIM 2A) とグリカン治療開発コンポーネント (AIM 2B) の 2 つの部分があります。

MDCF-2 と新しい母親のマイクロバイオームのテストにより、グリカンが腸疾患/EED のバイオマーカーを改善するように指示されました。

予備的観測を含むプロジェクトの背景:

南アジアでは、生殖年齢の女性の栄養不足が他の地域よりも一般的です。 南アジアでは、母親の栄養不足の有病率は 10 ～ 40% の間で変化します。 特にバングラデシュでは、女性の栄養不足の有病率が他の発展途上国よりもはるかに高く、生殖年齢の女性の30％以上が栄養不良であると報告されている。 母親の栄養不足は、低出生体重（LBW）、新生児死亡率、その後の小児栄養不良など、子どもの罹患率、死亡率、不良出産の主な原因であると根強く言われてきました。 母親の栄養不足だけでも、子宮内の成長制限の約 25 ～ 50% を占めます。 このようにして、栄養不足はある世代から別の世代に受け継がれる可能性があります。 バングラデシュのスラム街の5歳未満の子どもの半数は、非スラム街の3分の1に比べて線形成長が遅れており、発育不全に陥っている。

世代間の栄養失調の予防または治療は、まだ対処されていない重要な医療ニーズであり、依然として世界的な健康上の差し迫った課題です。 栄養失調の人、特に子供から腸生検標本を入手することが難しいため、栄養失調による環境腸機能不全（EED）の病因に対する小腸（SI）微生物叢の寄与に関するデータは不足しています。 ダッカの都市部スラム街（ミルプール）に住む参加者を対象としたバングラデシュ環境腸機能不全（BEED）研究は、小児のEEDの病因における十二指腸微生物叢の役割を調べる機会を提供し、また食道胃十二指腸内視鏡検査（EGD）も実施した。ダッカ州ミルプールの同じ資源の乏しい環境に住む18～45歳の栄養失調（BMI<18.5kg/m2）女性38名が、卵、牛乳、微量栄養素をベースとした栄養介入に匹敵する効果を示さなかった。子供たちに与えられました。 ミルプールに住む出産適齢期の栄養失調の女性は、EED のミルプールの子供たちに見られるものと似た小腸腸症を示していることが観察されました。 この提案では、私たちの主な目的は、SI 微生物叢が出産適齢期のバングラデシュの若い女性の SI 腸症と栄養失調 (低 BMI) に寄与しているという仮説を検証することです。 さらに、妊娠の結果は妊婦の腸内微生物叢の特徴によって予測できるという初期の証拠がいくつかあります。 母親の腸内微生物叢自体は、出生前および出生後の両方において、子の発育に影響を与える可能性があります。 母親の腸内細菌叢は、胎児と乳児の代謝に直接的および間接的に影響を与えるため、妊娠中の女性の腸内細菌叢を調節することで、在胎体重増加（GWG）、妊娠結果、その後の子供の成長と発育を最適化できる可能性があります。そして授乳。 したがって、私たちの主な目的の結果は、EED を持つ母親の腸内細菌叢がその子供たちに直接的または間接的に伝わり、世代間の栄養不足が永続化するということです。

従来の栄養介入や低コストの水と衛生への介入は、EEDに関連した小児の成長の停滞を逆転させるには効果がない可能性があり、微生物叢/マイクロバイオームを対象とした食品やその他の介入が正当化される。 バングラデシュで一般的に消費されている、地元で入手可能で手頃な価格で文化的に許容される補完食品で構成される栄養介入のプロトタイプが最近開発されました。 その後、同じスラム街（ミルプール）に住む中等度の急性栄養失調（MAM）を持つバングラデシュの生後12～18か月の子供を対象とした概念実証（POC）研究で、微生物叢指向性補完食品（MDCF）製剤がテストされました。 。 MDCF の 1 つである MDCF-2 は、増殖などの特定のパラメーターに基づく優れた性能に基づいて、他の配合物と区別されました。 これを念頭に置いて、我々は、妊娠中および非妊娠の低BMI女性に対するMDCF-2の投与を含む介入要素を含めることを提案する。 この介入コンポーネントでは、妊娠第 1 学期の終わりから開始し、低 BMI (18.5 kg/m2 未満) の妊婦 (18 ～ 30 歳) が、MDCF-2 または即使用サプリメントのいずれかを受けるようにランダムに割り当てられます。標準的な産前ケアに加えて、妊娠期間中および産後最初の 3 か月間は食事 (RUSF) を提供します。 栄養介入を受けない、年齢が一致した正常BMIの妊婦の並行コホートは、参照対照群として機能します。

私たちは、小腸微生物叢が、出産適齢期の若いバングラデシュ女性の小腸腸症や栄養失調の一因となっているという仮説を検証します。 妊娠中および非妊娠の低BMI女性に対するMDCF-2の投与を含む介入要素が含まれる予定である。 これは、EEDを患う母親の微生物叢がその子供たちに伝わることで、世代間の栄養不足が永続化するという仮説に基づくものである。

現在の研究の包括的な目標は次のとおりです。

1. ミルプールの低BMI女性から得られたSI微生物群集が母体の栄養失調に寄与するメカニズムを解明し、栄養失調の妊婦に適用できる代替バイオマーカーを同定する
2. 低BMI女性（妊娠中または非妊娠）を対象に、これらの代替エンドポイントによって判断されるように、MDCF-2がEEDを改善できるかどうかをテストします。
3. 栄養失調の低BMI女性および正常BMI女性からの培養コレクションを使用して、母親のEEDのノトバイオティックマウスモデルを開発し、SI微生物叢内の微生物の治療標的を特定する。
4. 将来の臨床研究のための候補グリカン/シンバイオティック治療薬を特定/開発するために、ノトバイティックマウスでMDCF-2および候補治療用グリカンの前臨床試験を実施します。 これらの前臨床モデルは、理論的根拠に十分な自信がある場合、BMGF が後援する他の取り組みから生まれた候補治療薬をテストするためのプラットフォームとしても機能します。

目標を達成するために、この提案された研究では、人間の被験者を対象とした 2 つの特定の目標、AIM 1A と AIM 1B を使用します。 AIM 1Aでは、バングラデシュの非妊娠の若い栄養失調女性（BMI<18.5kg/m2）のSIと糞便微生物叢、血漿、十二指腸、糞便のプロテオーム/メタボロームを比較します。 仙腸関節症の病理組織学的証拠がある患者と、BMI が正常 (20 ～ 24.9kg/m2) の患者 消化不良に対する定期的な内視鏡検査を受けている患者で、腸疾患の病理組織学的証拠がない患者。 AIM 1B では、第 1 学期の終わりから開始する介入研究を実施します。この研究では、低 BMI (18.5 kg/m2 未満) の妊婦 (18 ～ 30 歳) が、MDCF のいずれかを受けるようにランダムに割り当てられます。標準的な産前ケアに加えて、妊娠期間中および産後最初の 3 か月間に 2 または RUSF を受ける (n=30/腕)。 栄養介入を受けない、年齢が一致した正常BMIの妊婦の並行コホートは、参照対照群として機能します。

方法:

AIM 1Aでは、健康なグループを対象として、機能性ディスペプシアの評価のために食道胃十二指腸鏡検査（EGD）を受ける予定の正常BMIバングラデシュ人女性のコホートを募集する予定であり、私たちの目標は、正常な十二指腸粘膜組織学を有し、正常なBMI参加者30人を特定することです。内視鏡検査の際に、これらの参加者から十二指腸生検、十二指腸吸引物、さらに血漿および糞便の検体を収集します。 正常な十二指腸粘膜組織学を持つこれら 30 人の参加者を登録するために、100 人の健康な女性 (BMI 20 ～ 24.9) に対して EGD を実施する予定です。 kg/m2) 機能性ディスペプシアの評価のために紹介された出産可能年齢。 参加者は、シェイク・ラッセル国立胃肝臓研究所・病院の消化器科OPDに通う女性と、バングラデシュのダッカにあるバングラデシュ専門病院の参加基準を満たす女性からスクリーニングされる。 栄養不足の低BMI（<18.5kg/m2; 18～30歳）出産適齢期の女性がバウニアバードおよびダッカ市ミルプールの隣接するスラム街から登録され、ダッカのicddr,bダッカ病院、シェイク・ラッセル国立胃肝臓研究所および病院、またはバングラデシュの専門病院で60人の女性を対象にEGDが実施される。ダッカの病院。 参加者は、ダッカ州ミルプールのバウニアバードおよび隣接するスラム街からの世帯調査によって選別されます。 この内視鏡医は、BEED 研究で子供たちと栄養失調の女性に EGD を実施したのと同じ人物です。 EGD後、低BMIの女性は無作為に2つのグループに分けられ、90日間MDCF-2またはRUSFのいずれかを毎日栄養補助食品として摂取し、介入と生体サンプルの中止後さらに90日間の追跡調査が行われる。スケジュールに従って参加者から徴収されます。 EGDを受けた正常BMIの健康な女性も、栄養介入なしで同様に180日間追跡調査される。 AIM 1B では、第 1 学期の終わりに開始し、低 BMI (<18.5 kg/m2) の妊婦 (18 ～ 30 歳) が、次の期間、MDCF-2 または RUSF のいずれかを受けるようにランダムに割り当てられます。標準的な産前ケアに加えて、妊娠中および生後最初の 3 か月間を対象とします (n=30/腕)。 栄養介入を受けない、年齢が一致した正常BMIの妊婦の並行コホートは、参照対照群として機能します。 私たちは、小腸から組織サンプルを収集するためのリスクを最小限に抑えた装置をテストする予定です。 私たちの提案の目的 1b に基づいて、妊婦のサブサンプルに経鼻導入チューブ (TNIT) を使用します。 したがって、ネストされたサブ研究は、目的 1B の下で行われ、テザーカプセル内視鏡 (TNIT) をテストして、研究に登録された 15 人の妊婦のグループで EED の小腸の形態を研究する予定です。これは、この技術が確立されるまでに、という仮定に基づいています。実験医学プラットフォーム（プロトコル番号 PR-22082）に基づいて、生殖年齢の女性を対象とした従来の内視鏡検査で検証される予定であり、また、他の場所で実施された研究から妊婦に関する安全性データも入手可能である。 このサブ研究の参加者は、サブ研究への参加に同意した人の中から無作為に選択されます。 さらに、セントルイスのワシントン大学で、治療標的同定コンポーネント (AIM 2A) とグリカン治療開発目標 (AIM 2B) を目的とした前臨床コンポーネントが実施されます。

研究者らは、機能性ディスペプシアの評価のために食道胃十二指腸鏡検査（EGD）を受ける予定のBMI正常バングラデシュ人女性のコホートを募集する予定であり、我々の目標は、正常な十二指腸粘膜組織学を有し、十二指腸生検、十二指腸吸引物、および十二指腸吸引物を収集する正常なBMI参加者30人を特定することである。内視鏡検査時にこれらの参加者から得られた血漿および糞便の検体。 さらに、血漿および糞便サンプルは追跡調査スケジュールに従って収集されます。

サイト:

参加者は、シェイク・ラッセル国立胃肝臓研究所・病院の消化器病科外来患者部門（OPD）に通う女性と、バングラデシュのダッカにあるバングラデシュ専門病院の参加基準を満たす女性からスクリーニングされる。

フィールドサイト:

参加者は、ダッカ州ミルプールのバウニアバードおよび隣接するスラム街からの世帯調査を通じてスクリーニングされます（図4）。 この地域は人口が密集しており、モハーカリにあるダッカ病院 ICDDR から 7 ～ 8 km の距離にあります。 ミルプールが調査地として選ばれたのは、そこが貧困層と中産階級の家族が住んでいること、住宅と衛生状態が混雑した都市居住地に典型的であること、そして調査研究者がこの地域で継続的な調査活動を行っているためです。 この場所には典型的な不法占拠者の居住地がある。世帯の平均家族人数は 4.5 人で、48% が女性です。 世帯の約 20% は月収がわずか 62 ドルで、母親の 30% は学校に通ったことがなく、中等教育を受けられたのはわずか 3% でした。 国民の大多数は日雇い労働者、縫製労働者、運輸労働者です。 ミルプールの人口は 14.22 km2 で約 50 万人です。 この地域の 1 平方キロメートルあたりには 38,000 人以上が住んでいますが、ダッカ地区の平均は 8,229 人/km2、バングラデシュでは 976 人/km2 です17。

スクリーニング、募集および同意 対象者（低BMI女性）の国勢調査、スクリーニング、登録は、ダッカ市ミルプールのバウニアバド地区で行われます。 包含/除外基準を満たす女性には、この研究への登録について打診されます。 訓練を受けたフィールドリサーチアシスタント（FRA）が研究について詳しく説明し、参加者やその親族からの質問に答え、研究への登録を招待します。 彼女が研究へのボランティアに興味がある場合、指定されたスタッフが審査と同意に進みます。

スクリーニングは、上記の包含基準と除外基準のレビューで構成されます。 臨床検査後、参加者から詳細な病歴が取得されます。 包含基準を満たし、病歴および臨床検査によって除外されない成人参加者は、臨床判断に基づいて次のスクリーニング検査を受けます：胸部X線、R/E用の尿、腹部全体の超音波検査、空腹時血糖/HbA1c、便潜血検査（OBT）、がんマーカー（すなわち、 CEA、CA 15.3、CA 19.9）。 臨床検査結果に異常があると診断された患者は、標準ガイドラインに従って治験医師によって治療されます。 複雑な臨床症状に関して専門家の意見を必要とする患者には、それに応じてその分野の専門家が紹介されます。

対象者に参加資格がある場合、プロセスは同意に進み、その識字レベルに適した方法で書面による同意フォームを徹底的に検討します。 同意書に署名する前に、研究について質問する機会が与えられます。 参加者が研究を十分に理解していると FRA が判断した場合、同意書には FRA と参加者が署名します。 参加者が同意書を読んだり署名したりするのに十分な読み書き能力がない場合は、研究に関係のない証人の立会いの下で同意と拇印による署名が得られます。 参加者には署名済みの同意書のコピーが提供されます。

EGD および生検サンプルの収集 内視鏡検査は、シェイク ラセル胃肝臓研究所および病院およびバングラデシュ専門病院で実施されます。 この内視鏡医は、BEED 研究で子供たちと栄養失調の女性に EGD を実施したのと同じ人物です。 EGD 前の 12 か月間における社会人口統計データ、食事履歴、抗生物質とプロトンポンプ阻害剤 (PPI) の使用を含む臨床メタデータが収集されます [バングラデシュでは PPI の摂取が一般的であることに注意してください。外来患者を対象としたある代表的な研究では、発生率は 72% で、30% を超える人が処方箋なしで PPI を取得していました]。 組織トランスグルタミナーゼ (tTG) 検査は、セリアック病を除外するために使用されます。