健康な、サルコペニア、肥満、およびサルコペニア肥満の高齢女性における DNA メチル化パターンの評価: 横断研究
2024年9月30日 更新者：Ellen Cristini de Freitas、University of Sao Paulo
はじめに: 機能的および臨床的状態であるサルコペニア肥満 (SO) は、過剰な脂肪量を特徴とする肥満と、筋力と筋肉量の低下を特徴とするサルコペニアの共存を特徴とします。
SOは、肥満とサルコペニアのみの高齢者よりも、健康関連の有害な臨床転帰のリスクが高いと関連している。
老化には多くのエピジェネティックな変化が伴います。
これらの老化に関連するエピジェネティックな変化には、DNA メチル化、ヒストン修飾、クロマチン再構築、ノンコーディング RNA (ncRNA) 制御、および RNA 修飾が含まれます。
DNA メチル化はゲノム内の CpG ジヌクレオチドのシトシンで起こり、さまざまなヒト組織で加齢とともに変化します。
さらに、老化プロセスに伴って、CpG アイランド上の多くの遺伝子が過剰メチル化または低メチル化される可能性があります。
近い将来、候補遺伝子の広範な探索により、サルコペニア性肥満の病因についての洞察が得られるかもしれません。
したがって、老化、特にサルコペニア、肥満、サルコペニア肥満がエピジェネティックな要因によってどのように制御されているかを理解することは、新しい治療法の開発に役立ちます。
したがって、目的は、高齢女性のサルコペニア性肥満に対するエピジェネティックな影響を評価することです。
方法：この横断研究には、SP州リベイラン・プレト市に住む、サルコペニア、肥満およびサルコペニア性肥満で健康であると分類される32人の高齢女性が含まれる。
高齢者は、iDXA を使用した全身および局所の身体スキャン、身体計測評価、機能的能力検査、生化学マーカーおよびエピジェネティクスの分析のための末梢血採取を実行します。
統計分析には、t 検定、ANOVA、線形回帰モデル、およびピアソン相関が使用されます。
完全なメチロームの分析は、特定のソフトウェアを含むバイオインフォマティクス ツールを使用して実行されます。
期待される結果: 分析された疾患では、メチル化と遺伝子発現のパターンに違いがあることが予想されます。
さらに、この過程でエピジェネティックな変化がどのように起こるのかを明らかにすることが期待されています。
調査の概要
詳細な説明
サンプルサイズは、DNAメチル化を主要結果として考慮し、探索的に事前に計算されました。
分析は、R ソフトウェア (https://www.r-project.org) を使用して実行されました。
計算には、エフェクト サイズ 0.65、アルファ 0.05、統計検出力 0.80 を使用しました。
したがって、合計 32 人の参加者が研究に含まれることになります (各グループ n = 8)。
メチル化の程度は、各プローブに組み込まれたマーカーの量を測定することによって決定されます。
画像強度は Illumina Genome Studio 2011.1 を使用して抽出されます。
メチル化モジュール 1.9.0 ソフトウェア。
メチル化スコアは蛍光強度比に応じたベータ値（β）で表されます。
ベータ値は、0 (非メチル化) と 1 (完全にメチル化) の間の任意の値を取ることができます。
続いて、R 用の Champ パッケージ (Statistical Computing、VIE、オーストリア) を使用して、生データ (IDATS) から画像強度が抽出されます。
すべてのゲノム全体のメチル化データは、t 検定 (グループ内) とその後のベンジャミニ ホッホベルク検定によって分析されます。
パスウェイエンリッチメント分析は、WEBGestalt と Reactome を使用して実行されます。
データ分布の正規性はシャピロ ウィルク テストによって検証され、記述統計は平均値と標準偏差値で構成されます。
ANOVA はグループを比較するために使用されます。
ピアソン相関は、DNA メチル化パターンと表現型変数の相関を評価するために使用されます。
線形回帰モデルは、メチル化パターンと選択された変数の予測を分析するために適用されます。
多項ロジスティック回帰モデルは、BMI、年齢、ALST に合わせて調整されたテロメア長との関連性についてグループで使用されます。
統計的有意性は 5% に設定され、すべての分析は社会科学用統計パッケージ ソフトウェア (SPSS バージョン 17.0 Inc.) を使用して実行されます。
イリノイ州シカゴ）。
研究の種類
観察的
入学 (推定)
32
連絡先と場所
このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。
研究場所
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Sao Paulo
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Ribeirao Preto、Sao Paulo、ブラジル
- University of São Paulo, School of Physical Education and Sports of Ribeirão Preto
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参加基準
研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
はい
サンプリング方法
非確率サンプル
調査対象母集団
参加者はソーシャルメディアおよびUSP体育スポーツ学校（EEFERP/USP）のウェブサイトを通じて募集される。
興味のある参加者はオンラインで登録する必要があります。その後、研究者が電話で連絡し、面接の日程を調整します。
説明
包含基準:
- 体重 < 120 kg;
- 座りっぱなし（少なくとも3か月間運動をしていない）。
- ビタミンやミネラルのサプリメント、抗不安薬、シトクロム P450 (CYP450) 酵素に作用する血糖降下薬を使用しないこと。
- サルコペニア肥満、サルコペニアおよび肥満の基準内に分類されます。
除外基準:
- アルコール中毒者。
- 喫煙者。
- 感染症;
- 冠状動脈疾患;
- 慢性腎臓病や
- Mini-Mental State Exam (MMSE) の認知検査のスコアが 13 以下であること。
研究計画
このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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健康な年配の女性
サルコペニア、肥満、またはサルコペニア肥満のない高齢の女性。
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なし (観察研究)
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サルコペニアの高齢女性
サルコペニア、つまり握力が低く、筋量指数が低い高齢の女性。
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なし (観察研究)
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肥満の高齢女性
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なし (観察研究)
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サルコペニア肥満の高齢女性
サルコペニア肥満、つまり握力が低く、筋量指数が低く、BMIが高い高齢の女性。
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なし (観察研究)
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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健康状態（健康、サルコペニア、肥満、またはサルコペニア肥満を伴う）がDNAメチル化の変化を促進するかどうかを調査する
時間枠：1日
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この目的のために、12時間の絶食後の朝、経験豊富な看護師によって血液サンプルがEDTAチューブに採取されます。
生化学マーカーおよび遺伝マーカー (DNA メチル化および遺伝子発現) の分析のために 5 ml の血液が収集されます。
末梢血からの DNA 抽出は、指示に従って、抽出された物質 200 μL を使用して、AllPrepDNA/RNA/miRNA Universal kit (Qiagen) を使用して実行されます。
抽出された DNA の品質は、Greends DNA Quantification Reagent (Invitrogen、米国カリフォルニア州カールズバッド) を使用して評価されます。
抽出後、サンプルは分析のために -80°C の冷凍庫に保管されます。
DNA は、EZ DNA メチル化ゴールド変換キット (Zymo Research、カリフォルニア州、米国) を使用して、指示に従って亜硫酸水素塩変換され、非メチル化シトシンがウラシルに変換されます。
アレイベースの特異的 DNA メチル化分析は、Infinium Human Mmethylation 850K (EPIC) Beadchip テクノロジーを使用して実行されます。
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1日
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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見つかったエピジェネティック変数を生化学マーカー、身体組成、身体パフォーマンスと相関させます。
時間枠：1日
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これを行うために、次の評価が実行されます。 6分間歩行テスト：6分間に移動した総距離（メートル）を測定します。 前腕屈曲テスト: スコアは、30 秒間で正しく実行された屈曲の合計数によって取得されます。 握力測定: ハンドダイナモメーターを使用して、kg 単位での握力テストが実行されます。スコアは、30 秒間の完全な実行の合計数によって取得されます。 体組成は、iDXA を使用した全身および局所の身体スキャンによって実行されます。 検査では、全身および局部（左右の下肢、胴体、左右の上肢、頭）の以下の測定値がグラム単位で提供されます。 脂肪量（g）。総脂肪および局所脂肪のパーセンテージ (% G);骨ミネラル含有量。付属肢の除脂肪組織は、左右の下肢と上肢の除脂肪組織を合計することによって決定されます。 |
1日
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協力者と研究者
ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。
研究記録日
これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。
主要日程の研究
研究開始 (実際)
2024年2月21日
一次修了 (実際)
2024年9月5日
研究の完了 (推定)
2024年10月5日
試験登録日
最初に提出
2024年9月23日
QC基準を満たした最初の提出物
2024年9月25日
最初の投稿 (実際)
2024年10月1日
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
2024年10月2日
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
2024年9月30日
最終確認日
2024年9月1日
詳しくは
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。