Avaliação do padrão de metilação do DNA em mulheres idosas saudáveis, sarcopênicas, obesas e obesas sarcopênicas: um estudo transversal
30 de setembro de 2024 atualizado por: Ellen Cristini de Freitas, University of Sao Paulo
INTRODUÇÃO: A obesidade sarcopênica (OS), condição funcional e clínica, caracteriza-se pela coexistência de obesidade, marcada por excesso de massa gorda e sarcopenia, caracterizada por redução de força e massa muscular.
A SO está associada a um risco maior de resultados clínicos adversos relacionados à saúde do que adultos mais velhos com obesidade e sarcopenia isoladamente.
O envelhecimento é acompanhado por inúmeras alterações epigenéticas.
Essas alterações epigenéticas associadas ao envelhecimento incluem metilação do DNA, modificação de histonas, remodelação da cromatina, regulação de RNA não codificante (ncRNA) e modificação de RNA.
A metilação do DNA ocorre nas citosinas dos dinucleotídeos CpG no genoma e sofre alterações com a idade em vários tecidos humanos.
Além disso, muitos genes podem ser hipermetilados ou hipometilados nas ilhas CpG com o processo de envelhecimento.
Em breve, uma ampla exploração de genes candidatos poderá fornecer informações sobre a patogênese da obesidade sarcopênica.
Portanto, compreender como o envelhecimento, especificamente a sarcopenia, a obesidade e a obesidade sarcopênica, é regulado por fatores epigenéticos, favorece o desenvolvimento de novas terapias de tratamento.
Assim, o objetivo será avaliar a influência epigenética na obesidade sarcopênica em mulheres idosas.
MÉTODOS: Este estudo transversal incluirá 32 idosas que serão classificadas como saudáveis, com sarcopenia, obesidade e obesidade sarcopênica residentes na cidade de Ribeirão Preto - SP.
Os idosos realizarão exame corporal total e regional por meio de iDXA, avaliação antropométrica, testes de capacidade funcional, coleta de sangue periférico para análise de marcadores bioquímicos e epigenéticos.
Para análise estatística serão utilizados teste t, ANOVA, modelos de regressão linear e correlação de Pearson.
As análises do metiloma completo serão realizadas utilizando ferramentas de bioinformática, incluindo software específico.
RESULTADOS ESPERADOS: Espera-se que haja diferenças nos padrões de metilação e expressão gênica nas doenças analisadas.
Além disso, espera-se esclarecer como ocorrem as mudanças epigenéticas ao longo desse processo.
Visão geral do estudo
Status
Ativo, não recrutando
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
O tamanho da amostra foi calculado a priori, considerando a metilação do DNA como desfecho primário, de forma exploratória.
As análises foram realizadas utilizando o software R (//www.r-project.org).
Para o cálculo utilizou-se tamanho de efeito de 0,65, alfa 0,05 e poder estatístico de 0,80.
Assim, serão incluídos no estudo um total de 32 participantes (n = 8 em cada grupo).
O grau de metilação será determinado medindo a quantidade de marcador incorporado para cada sonda.
As intensidades das imagens serão extraídas utilizando o Illumina Genome Studio 2011.1,
Software do módulo de metilação 1.9.0.
A pontuação de metilação será representada como um valor beta (β) de acordo com a razão de intensidade de fluorescência.
Os valores beta podem assumir qualquer valor entre 0 (não metilado) e 1 (completamente metilado).
Posteriormente, as intensidades da imagem serão extraídas dos dados brutos (IDATS) utilizando o pacote Champ para R (Statistical Computing, VIE, Áustria).
Todos os dados de metilação do genoma serão analisados pelo teste t (dentro dos grupos), seguido pelo teste de Benjamini Hochberg.
A análise de enriquecimento da via será realizada utilizando WEBGestalt e Reactome.
A normalidade da distribuição dos dados será verificada pelo teste de Shapiro Wilk, e a estatística descritiva será composta por valores de média e desvio padrão.
ANOVA será usada para comparar os grupos.
Correlações de Pearson serão utilizadas para avaliar a correlação dos padrões de metilação do DNA com variáveis fenotípicas.
Modelos de regressão linear serão aplicados para analisar a predição do padrão de metilação e variáveis selecionadas.
O modelo de regressão logística multinomial será utilizado nos grupos para associação com comprimento dos telômeros ajustado para IMC, idade, ALST).
A significância estatística será fixada em 5%, e todas as análises serão realizadas utilizando o software Statistical Package for Social Sciences (SPSS versão 17.0 Inc.
Chicago, Illinois).
Tipo de estudo
Observacional
Inscrição (Estimado)
32
Contactos e Locais
Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.
Locais de estudo
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Sao Paulo
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Ribeirao Preto, Sao Paulo, Brasil
- University of São Paulo, School of Physical Education and Sports of Ribeirão Preto
-
-
Critérios de participação
Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Adulto
- Adulto mais velho
Aceita Voluntários Saudáveis
Sim
Método de amostragem
Amostra Não Probabilística
População do estudo
Os participantes serão recrutados através das redes sociais e no site da Escola de Educação Física e Desportos da USP (EEFERP/USP).
Os interessados deverão se inscrever on-line e o pesquisador entrará em contato por telefone para agendar uma entrevista.
Descrição
Critérios de inclusão:
- massa corporal < 120kg;
- sedentário (não praticar exercício físico há pelo menos 3 meses);
- não utilizar suplementos vitamínicos ou minerais, medicamentos ansiolíticos, hipoglicemiantes com atividade nas enzimas do citocromo P450 (CYP450);
- classificados dentro dos critérios de obesidade sarcopênica, sarcopenia e obesidade.
Critérios de exclusão:
- alcoólatras;
- fumantes;
- doenças infecciosas;
- doenças coronárias;
- doenças renais crônicas e
- apresentar pontuação ≤ 13 no exame cognitivo no Miniexame do Estado Mental (MEEM).
Plano de estudo
Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
|---|---|
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Mulheres idosas saudáveis
Mulheres idosas que não apresentam sarcopenia, obesidade ou obesidade sarcopênica.
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Nenhum (estudo observacional)
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Mulheres idosas com sarcopenia
Mulheres idosas com sarcopenia, ou seja, baixa força de preensão manual e baixo índice de massa muscular.
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Nenhum (estudo observacional)
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Mulheres mais velhas com obesidade
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Nenhum (estudo observacional)
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Mulheres idosas com obesidade sarcopênica
Mulheres idosas com obesidade sarcopênica, ou seja, baixa força de preensão manual, baixo índice de massa muscular e alto índice de massa corporal.
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Nenhum (estudo observacional)
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Investigar se a condição de saúde (saudável, sarcopênica, obesa ou com obesidade sarcopênica) promove alterações na metilação do DNA
Prazo: 1 dia
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Para tanto, amostras de sangue serão coletadas pela manhã após jejum de 12 horas em tubos de EDTA por enfermeiros experientes.
Serão coletados 5 ml de sangue para análise de marcadores bioquímicos e genéticos (metilação do DNA e expressão gênica).
A extração de DNA do sangue periférico será realizada com o kit AllPrepDNA/RNA/miRNA Universal (Qiagen), conforme instruções, utilizando 200 µL do material extraído.
A qualidade do DNA extraído será avaliada com o Reagente de Quantificação de DNA Greends (Invitrogen, Carlsbad, CA, EUA).
Após a extração, as amostras serão armazenadas em freezer a -80°C para análise.
O DNA será convertido em bissulfito usando o kit EZ DNA Methylation-Gold Conversion (Zymo Research, CA, EUA) de acordo com as instruções, com conversão de citosina não metilada em uracila.
A análise específica de metilação do DNA baseada em array será realizada usando a tecnologia Beadchip Infinium Human Methylation 850K (EPIC).
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1 dia
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Correlacionar as variáveis epigenéticas encontradas com marcadores bioquímicos, composição corporal e desempenho físico.
Prazo: 1 dia
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Para isso, serão realizadas as seguintes avaliações: Teste de caminhada de seis minutos: será medida a distância total percorrida (metros) em 6 minutos. Teste de flexão do antebraço: a pontuação é obtida pelo número total de flexões realizadas corretamente durante 30 segundos. Mensuração da força de preensão manual: o teste de força de preensão manual em kg será realizado em dinamômetro manual: A pontuação será obtida pelo número total de execuções completas durante 30 segundos. A composição corporal será realizada por varredura corporal total e regional usando iDXA. O exame fornecerá medidas em gramas do corpo total e regional (membros inferiores direitos e esquerdos, tronco, membros superiores direitos e esquerdos e cabeça) de: massa gorda (g); percentual de gordura total e regional (% G); conteúdo mineral ósseo; o tecido mole magro apendicular será determinado pela soma do tecido mole magro dos membros inferiores e superiores nos lados direito e esquerdo. |
1 dia
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Colaboradores e Investigadores
É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.
Datas de registro do estudo
Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
21 de fevereiro de 2024
Conclusão Primária (Real)
5 de setembro de 2024
Conclusão do estudo (Estimado)
5 de outubro de 2024
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
23 de setembro de 2024
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
25 de setembro de 2024
Primeira postagem (Real)
1 de outubro de 2024
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
2 de outubro de 2024
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
30 de setembro de 2024
Última verificação
1 de setembro de 2024
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- 73189623.6.0000.5659
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
NÃO
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Não
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
Não
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