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Bewertung des DNA-Methylierungsmusters bei gesunden, sarkopenischen, fettleibigen und sarkopenisch fettleibigen älteren Frauen: Eine Querschnittsstudie

30. September 2024 aktualisiert von: Ellen Cristini de Freitas, University of Sao Paulo
EINLEITUNG: Sarkopenische Adipositas (SO), eine funktionelle und klinische Erkrankung, ist durch das gleichzeitige Vorliegen von Adipositas, gekennzeichnet durch überschüssige Fettmasse, und Sarkopenie, gekennzeichnet durch verminderte Kraft und Muskelmasse, gekennzeichnet. SO ist mit einem größeren Risiko gesundheitsbezogener unerwünschter klinischer Folgen verbunden als ältere Erwachsene, die nur an Fettleibigkeit und Sarkopenie leiden. Mit dem Altern gehen zahlreiche epigenetische Veränderungen einher. Zu diesen altersbedingten epigenetischen Veränderungen gehören DNA-Methylierung, Histonmodifikation, Chromatin-Remodellierung, nicht-kodierende RNA (ncRNA)-Regulation und RNA-Modifikation. Die DNA-Methylierung erfolgt an Cytosinen in CpG-Dinukleotiden im Genom und verändert sich mit dem Alter in verschiedenen menschlichen Geweben. Darüber hinaus können viele Gene auf CpG-Inseln mit dem Alterungsprozess hypermethyliert oder hypomethyliert werden. Bald könnte eine umfassende Erforschung der Kandidatengene Einblicke in die Pathogenese der sarkopenischen Fettleibigkeit liefern. Daher begünstigt das Verständnis, wie das Altern, insbesondere Sarkopenie, Fettleibigkeit und sarkopenische Fettleibigkeit, durch epigenetische Faktoren reguliert wird, die Entwicklung neuer Behandlungstherapien. Ziel ist es daher, den epigenetischen Einfluss auf die sarkopenische Adipositas bei älteren Frauen zu untersuchen. METHODEN: An dieser Querschnittsstudie werden 32 ältere Frauen teilnehmen, die als gesund eingestuft werden und an Sarkopenie, Fettleibigkeit und sarkopenischer Fettleibigkeit leiden, die in der Stadt Ribeirão Preto – SP leben. Die älteren Erwachsenen führen einen Ganzkörperscan und einen regionalen Körperscan mit iDXA, anthropometrischer Beurteilung, Funktionskapazitätstests und peripherer Blutentnahme zur Analyse biochemischer Marker und Epigenetik durch. Zur statistischen Analyse werden T-Test, ANOVA, lineare Regressionsmodelle und Pearson-Korrelation verwendet. Analysen des vollständigen Methyloms werden mithilfe von Bioinformatik-Tools, einschließlich spezieller Software, durchgeführt. ERWARTETE ERGEBNISSE: Es wird erwartet, dass es Unterschiede in den Mustern der Methylierung und Genexpression bei den analysierten Krankheiten geben wird. Darüber hinaus soll geklärt werden, wie epigenetische Veränderungen in diesem Prozess ablaufen.

Studienübersicht

Detaillierte Beschreibung

Die Stichprobengröße wurde a priori auf explorativer Basis berechnet, wobei die DNA-Methylierung als primäres Ergebnis berücksichtigt wurde. Die Analysen wurden mit R-Software (https://www.r-project.org) durchgeführt. Für die Berechnung wurden eine Effektgröße von 0,65, Alpha 0,05 und eine statistische Power von 0,80 verwendet. Somit werden insgesamt 32 Teilnehmer in die Studie einbezogen (n = 8 in jeder Gruppe). Der Methylierungsgrad wird durch Messung der Menge des für jede Sonde eingebauten Markers bestimmt. Die Bildintensitäten werden mit dem Illumina Genome Studio 2011.1 extrahiert. Methylierungsmodul 1.9.0 Software. Der Methylierungs-Score wird entsprechend dem Verhältnis der Fluoreszenzintensität als Beta-Wert (β) dargestellt. Beta-Werte können jeden Wert zwischen 0 (unmethyliert) und 1 (vollständig methyliert) annehmen. Anschließend werden die Bildintensitäten aus den Rohdaten (IDATS) mit dem Champ-Paket für R (Statistical Computing, VIE, Österreich) extrahiert. Alle genomweiten Methylierungsdaten werden per T-Test (innerhalb der Gruppen) analysiert, gefolgt vom Benjamini-Hochberg-Test. Die Pathway-Anreicherungsanalyse wird mit WEBGestalt und Reactome durchgeführt. Die Normalität der Datenverteilung wird durch den Shapiro-Wilk-Test überprüft und die deskriptive Statistik besteht aus Mittel- und Standardabweichungswerten. ANOVA wird zum Vergleich von Gruppen verwendet. Pearson-Korrelationen werden verwendet, um die Korrelation von DNA-Methylierungsmustern mit phänotypischen Variablen zu bewerten. Zur Analyse der Vorhersage des Methylierungsmusters und ausgewählter Variablen werden lineare Regressionsmodelle angewendet. Das multinomiale logistische Regressionsmodell wird in den Gruppen zur Assoziation mit der Telomerlänge (angepasst an BMI, Alter, ALST) verwendet. Die statistische Signifikanz wird auf 5 % festgelegt und alle Analysen werden mit der Software „Statistical Package for Social Sciences“ (SPSS Version 17.0 Inc.) durchgeführt. Chicago, IL).

Studientyp

Beobachtungs

Einschreibung (Geschätzt)

32

Kontakte und Standorte

Dieser Abschnitt enthält die Kontaktdaten derjenigen, die die Studie durchführen, und Informationen darüber, wo diese Studie durchgeführt wird.

Studienorte

    • Sao Paulo
      • Ribeirao Preto, Sao Paulo, Brasilien
        • University of São Paulo, School of Physical Education and Sports of Ribeirão Preto

Teilnahmekriterien

Forscher suchen nach Personen, die einer bestimmten Beschreibung entsprechen, die als Auswahlkriterien bezeichnet werden. Einige Beispiele für diese Kriterien sind der allgemeine Gesundheitszustand einer Person oder frühere Behandlungen.

Zulassungskriterien

Studienberechtigtes Alter

  • Erwachsene
  • Älterer Erwachsener

Akzeptiert gesunde Freiwillige

Ja

Probenahmeverfahren

Nicht-Wahrscheinlichkeitsprobe

Studienpopulation

Die Teilnehmer werden über soziale Medien und auf der Website der USP School of Physical Education and Sports (EEFERP/USP) rekrutiert. Interessierte Teilnehmer müssen sich online registrieren und der Forscher wird sie dann telefonisch kontaktieren, um ein Interview zu vereinbaren.

Beschreibung

Einschlusskriterien:

  • Körpermasse < 120 kg;
  • Bewegungsmangel (mindestens 3 Monate lang keine körperliche Bewegung ausüben);
  • keine Vitamin- oder Mineralstoffzusätze, angstlösende Medikamente oder blutzuckersenkende Mittel mit Aktivität auf Cytochrom P450 (CYP450)-Enzyme verwenden;
  • klassifiziert innerhalb der Kriterien für sarkopenische Adipositas, Sarkopenie und Fettleibigkeit.

Ausschlusskriterien:

  • Alkoholiker;
  • Raucher;
  • Infektionskrankheiten;
  • koronare Erkrankungen;
  • chronische Nierenerkrankungen und
  • Vorlage einer Punktzahl ≤ 13 für die kognitive Prüfung im Mini-Mental State Examination (MMSE).

Studienplan

Dieser Abschnitt enthält Einzelheiten zum Studienplan, einschließlich des Studiendesigns und der Messung der Studieninhalte.

Wie ist die Studie aufgebaut?

Designdetails

Kohorten und Interventionen

Gruppe / Kohorte
Intervention / Behandlung
Gesunde ältere Frauen
Ältere Frauen, die nicht an Sarkopenie, Fettleibigkeit oder sarkopenischer Fettleibigkeit leiden.
Keine (Beobachtungsstudie)
Ältere Frauen mit Sarkopenie
Ältere Frauen mit Sarkopenie, d. h. geringer Handgriffkraft und niedrigem Muskelmasseindex.
Keine (Beobachtungsstudie)
Ältere Frauen mit Fettleibigkeit
Keine (Beobachtungsstudie)
Ältere Frauen mit sarkopenischer Adipositas
Ältere Frauen mit sarkopenischer Adipositas, d. h. geringer Handgriffkraft, niedrigem Muskelmasseindex und hohem Body-Mass-Index.
Keine (Beobachtungsstudie)

Was misst die Studie?

Primäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Untersuchen Sie, ob der Gesundheitszustand (gesund, sarkopenisch, fettleibig oder mit sarkopenischer Fettleibigkeit) Veränderungen in der DNA-Methylierung fördert
Zeitfenster: 1 Tag
Zu diesem Zweck werden morgens nach 12-stündigem Fasten durch erfahrene Krankenschwestern Blutproben in EDTA-Röhrchen entnommen. Zur Analyse biochemischer und genetischer Marker (DNA-Methylierung und Genexpression) werden 5 ml Blut entnommen. Die DNA-Extraktion aus peripherem Blut wird mit dem AllPrepDNA/RNA/miRNA Universal Kit (Qiagen) gemäß den Anweisungen unter Verwendung von 200 µL des extrahierten Materials durchgeführt. Die Qualität der extrahierten DNA wird mit dem Greends DNA Quantification Reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) bewertet. Nach der Extraktion werden die Proben zur Analyse in einem Gefrierschrank bei -80 °C gelagert. Die DNA wird mit dem EZ DNA Methylation-Gold Conversion Kit (Zymo Research, CA, USA) gemäß den Anweisungen in Bisulfit umgewandelt, wobei nicht methyliertes Cytosin in Uracil umgewandelt wird. Die Array-basierte spezifische DNA-Methylierungsanalyse wird mit der Beadchip-Technologie Infinium Human Methylation 850K (EPIC) durchgeführt.
1 Tag

Sekundäre Ergebnismessungen

Ergebnis Maßnahme
Maßnahmenbeschreibung
Zeitfenster
Korrelieren Sie die gefundenen epigenetischen Variablen mit biochemischen Markern, der Körperzusammensetzung und der körperlichen Leistungsfähigkeit.
Zeitfenster: 1 Tag

Hierzu werden folgende Beurteilungen durchgeführt:

Sechs-Minuten-Gehtest: Die in 6 Minuten zurückgelegte Gesamtstrecke (Meter) wird gemessen.

Unterarmbeugungstest: Die Punktzahl ergibt sich aus der Gesamtzahl der innerhalb von 30 Sekunden korrekt ausgeführten Beugungen.

Handgriffkraftmessung: Der Handgriffkrafttest in kg wird mit einem Handdynamometer durchgeführt: Die Punktzahl ergibt sich aus der Gesamtzahl der vollständigen Ausführungen innerhalb von 30 Sekunden.

Die Körperzusammensetzung wird durch Scannen des gesamten und regionalen Körpers mit iDXA durchgeführt. Die Untersuchung liefert Messungen in Gramm des gesamten und regionalen Körpers (rechte und linke untere Gliedmaßen, Rumpf, rechte und linke obere Gliedmaßen und Kopf) von: Fettmasse (g); Prozentsatz des Gesamt- und Regionalfetts (% G); Knochenmineralgehalt; Das appendikuläre magere Weichgewebe wird durch Summieren des mageren Weichgewebes der unteren und oberen Gliedmaßen auf der rechten und linken Seite bestimmt.

1 Tag

Mitarbeiter und Ermittler

Hier finden Sie Personen und Organisationen, die an dieser Studie beteiligt sind.

Studienaufzeichnungsdaten

Diese Daten verfolgen den Fortschritt der Übermittlung von Studienaufzeichnungen und zusammenfassenden Ergebnissen an ClinicalTrials.gov. Studienaufzeichnungen und gemeldete Ergebnisse werden von der National Library of Medicine (NLM) überprüft, um sicherzustellen, dass sie bestimmten Qualitätskontrollstandards entsprechen, bevor sie auf der öffentlichen Website veröffentlicht werden.

Haupttermine studieren

Studienbeginn (Tatsächlich)

21. Februar 2024

Primärer Abschluss (Tatsächlich)

5. September 2024

Studienabschluss (Geschätzt)

5. Oktober 2024

Studienanmeldedaten

Zuerst eingereicht

23. September 2024

Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat

25. September 2024

Zuerst gepostet (Tatsächlich)

1. Oktober 2024

Studienaufzeichnungsaktualisierungen

Letztes Update gepostet (Tatsächlich)

2. Oktober 2024

Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt

30. September 2024

Zuletzt verifiziert

1. September 2024

Mehr Informationen

Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie

Plan für individuelle Teilnehmerdaten (IPD)

Planen Sie, individuelle Teilnehmerdaten (IPD) zu teilen?

NEIN

Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen

Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt

Nein

Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt

Nein

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