二重パンデミックの時代のワクチン: HIV 感染者に対する COVID-19 ワクチン

HIV (PWH) 感染者は、SARS-CoV-2 に感染すると、COVID-19 関連の病気や死亡のリスクが高まる可能性があり 1-5、新型コロナウイルスのワクチンはパンデミックとの闘いにおいて重要な役割を果たすことになる。 現在、オンタリオ州では 2 つの mRNA ワクチン (Pfizer-BioNTech、Moderna) が使用されており、どちらも 2 回投与レジメンです6,7。 これまでのデータはPWHに対する特別な安全性の懸念を示唆していないが、限られた数のPWHのみが新型コロナウイルスワクチン治験に参加しており、彼らは最近の2つの大規模な確認的承認研究の後半に募集された。 さらに、ワクチンの 1 つに関する確認試験の緊急承認審査では、安全性と有効性の計算に PWH が含まれていませんでした 7,8。これには、低レベルのウイルス血症、免疫老化、および/または持続的な免疫活性化が進行している抗レトロウイルス療法 (ART) を受けている PWH も含まれます。 。 それにも関わらず、PWH はデータ収集が続く間、速やかにワクチン接種を受けることが推奨されます。

私たちの知識と他の病原体に対して PWH に投与されたワクチンの経験に基づくと、我々の知識に大きなギャップがある 9 のは、新型コロナウイルス感染症ワクチンが、併存疾患の発生率を悪化させたり、感染症の動態に影響を与える可能性のある進行中の慢性炎症やその他の免疫調節異常に何らかの影響を与える可能性があるかどうかということである。ヒト免疫不全ウイルス（HIV）の貯蔵庫。 したがって、新型コロナウイルス感染症ワクチンがPWHの免疫活性化とHIV保有者にどのような影響を与えるかを理解することは最も重要であり、世界中の3,800万のPWHに影響を与える可能性があります。 さらに、PWHで以前に報告された早期免疫老化は、ART開始後の免疫再構成の不均一性と相まって、COVID-19ワクチンが短期および長期の両方で防御的で強力な免疫応答を誘導できるかどうかを判断することが重要であることを示唆しています。特に免疫能が低下した特定のサブグループで顕著です。 PWHにおけるワクチンの有効性だけでなく、免疫活性化やHIV保有者に対する新型コロナウイルスワクチンの影響を解明することは重要であるが、ワクチンスポンサーによって評価される可能性は低い。

私たちは、私たちの研究対象集団がオンタリオ州における新型コロナウイルス感染症ワクチンの早期優先投与に含まれないことを予想しています。 私たちの対象集団は、併存疾患を有することが多い55歳以上のPWHであり、この指示された研究にとって最も適切な枠と都合の良い期間内でワクチン接種が提供される可能性が高い人々です。

HIV感染者（PWH）における新型コロナウイルス感染症のリスク

HIV 感染者 (PWH) における新型コロナウイルス感染症のリスクに関するデータは限られていますが、新たな証拠は、PWH が SARS-CoV-2 感染時に新型コロナウイルス感染症関連疾患のリスクまたは死亡率の増加を経験する可能性があることを示唆しています。 例えば、英国の前向き観察研究では、性別、民族、年齢、一部の併存疾患などのいくつかの変数を調整した後でも、HIV陽性状態は依然として新型コロナウイルスで入院した個人の28日目死亡リスクの増加と有意に関連していることが示された。 195. 英国で行われた別の研究でも、年齢、性別、貧困、民族性、喫煙、肥満を調整した後、PWHの経験により新型コロナウイルス感染症による死亡リスクが高まることが示された（調整後ハザード比2.59、95％CI 1.74-3.84）3。 同様に、南アフリカの集団コホート研究でも、HIV が新型コロナウイルス感染症による死亡と関連しており、調整後のハザード比は 2.14 (95% CI 1.70-2.70)であることが示されました10。 ただし、HIV 制御の職業マーカーや代替マーカーなど、いくつかの潜在的な交絡因子がこれらの研究には含まれていないことに注意することが重要です11。

一方、他の研究は、HIV が新型コロナウイルス感染症の転帰において、より微妙な役割を果たしている可能性を示唆しています。 例えば、ニューヨークでの研究では、HIV陰性の人に比べて、PWHの方が新型コロナウイルス感染症による入院、集中治療室（ICU）への入室、および/または死亡を経験している割合が高いことが示されているが、著者らは、PWHのほとんどは、 COVID-19 関連の転帰が不良であった人は、CD4 数が低かった（< 500 細胞/uL）12。 同様に、多国籍研究では、CD4 数の低下 (< 200 細胞/mm3) が、ICU 入院、人工呼吸器、または死亡によって定義される重篤な転帰と関連していることが判明しました 13。 ヨーロッパ 3 か国が参加する別の多施設コホート研究では、多変量解析を実施し、重症度の COVID-19 に関連する唯一の要因は、現在の CD4 数が 350 細胞/μL 未満であることを示しました (aOR 2.85; 95% CI 1.26-6.44)。 死亡率が低い場合、CD4 T 細胞数は最低値になります4。 要約すると、免疫不全は、ウイルス抑制の観点から、PWH における COVID-19 疾患の重症化の危険因子となる可能性があります。 この脆弱な集団においては、SARS-CoV-2 感染や COVID-19 による重篤な疾患のワクチンによる予防が不可欠です。

新型コロナウイルス感染症（COVID-19）ワクチンは、パンデミックとの闘いにおいて重要な役割を果たすだろう。 現在、オンタリオ州では 2 種類の mRNA ワクチン (ファイザー・バイオエヌテック社、モデルナ社) が使用されており、どちらも 2 回投与のレジメンとなっています。

現在の国家予防接種諮問委員会（NACI）の勧告では、「臨床試験に参加した免疫不全状態（安定したHIV感染症など）を有する免疫抑制されていない参加者においては、これまでに懸念される安全性シグナルは認められていない」と述べられており、「生存している人々は」免疫正常であると考えられる HIV 感染者はワクチン接種を受けることができます。」15. しかし、これまでにこれらの試験で採用されたPWHの数は非常に少ない。 また、高齢者（65歳以上）の参加者において広い信頼区間でワクチンの有効性が低下したという試験結果から明らかなように、高齢とそれに伴う免疫老化が重要な意味を持つ可能性があるという示唆もある。 高齢のPWHは、老化や免疫老化の加速または強調された兆候に敏感であることが多いため、これらの発見は、このグループにおけるワクチンの効果をより明確に評価する必要性を強調しています。 それ以外の場合、進行中の低レベルのウイルス血症、免疫老化、および/または持続的な免疫活性化を患う患者を含む特定のPWHサブセットにおけるワクチンの有効性はほとんどわかっていません。

免疫原性 現時点では、T 細胞および B 細胞から強力かつ長期的な応答を引き出すことができるワクチンは、ワクチン接種を受けた個人の防御に免疫相関があると推定されています 16。 ファイザー・バイオエヌテックとモデルナの両ワクチンは、以前の試験で免疫原性を報告している。

免疫原性と防御の潜在的な相関関係に関するデータは現時点では限られており、特に免疫回復が最適以下のサブセットでは PWH が不足しています。 PWH のワクチン承認分析にギャップがあることを考慮すると、ワクチンを接種している PWH の免疫原性プロファイルを確立することが重要です。

PWHにおける持続的な免疫活性化

ART の有効性は驚くべき進歩を遂げているにもかかわらず、ART によるウイルス抑制では、PWH に存在する免疫活性化の亢進を完全に弱めるには不十分であることがよくあります。 重要なことは、持続的な免疫活性化および/または炎症が、ART 治療を受けた PWH の罹患率と死亡率の独立した予測因子として浮上していることです。 HIV 感染における免疫活性化と炎症の重要なマーカーには、IL-6 および C 反応性タンパク質 (CRP) の血漿レベル、凝固マーカー D ダイマーおよび可溶性単球活性化マーカー sCD1420-22 が含まれます。 炎症のもう 1 つの広く使用されているマーカーは、CD38 および HLA-DR23 の発現によって定義される T 細胞活性化です。

免疫活性化は明らかに PWH の罹患率と死亡率に悪影響を及ぼしますが、HIV の保有源とも関連付けられています 24。 新型コロナウイルス感染症ワクチンの免疫活性化への影響、ひいてはART治療を受けたPWHのHIV保有者への影響は依然として不明である。 新型コロナウイルス感染症ワクチンには証拠が不足しているため、PWH に対するワクチンの潜在的な影響に関する現在の理解は、非新型コロナウイルスワクチンに関する以前の研究から推定することしかできません。

非新型コロナウイルスワクチンとその PWH への影響

カナダでは成人PWHに推奨される非新型コロナウイルスワクチンがいくつかあり、これにはインフルエンザ、破傷風/ジフテリア/百日咳、肺炎/肺炎球菌疾患、髄膜炎菌疾患、B型肝炎、ヒトパピローマウイルスに対するワクチンが含まれる。 注目すべきことに、これらのワクチンの一部は、一時的に免疫活性化を誘導したり、HIV 保有者に影響を与えたりすることが以前に示されています。 例えば、ウイルス量を抑制したART中のPWHにおけるインフルエンザワクチンの投与に関する研究では、ワクチン接種後1週間にHIV RNA転写が起こる可能性があることが示されました9。 著者らはまた、ワクチン接種後4週間の間に免疫活性化（CD38およびHLA-DR発現によって定義される）が増強されたことにも注目した。 同様に、ウイルス量を抑制したART治療PWHに対する肺炎球菌ワクチンの効果を調査した別の研究では、ワクチン接種後の血漿HIV RNAレベルの一時的な上昇が観察され、4週間以内に検出不可能なレベルに戻りました25。 さらに、今回の助成金申請の共同研究者の一部による以前の研究でも、インフルエンザワクチンが、ウイルス量が抑制されたART治療PWHのインフルエンザ特異的CD4+ T細胞におけるHIVプロウイルス量を不釣り合いに増加させる可能性があることを実証しており、ワクチン接種の能力が示唆されている。 HIV 保有者に影響を与える26。

私たちの知識に大きなギャップがあるのは、新型コロナウイルス感染症ワクチン、特にその新しいmRNAベースのプラットフォームが、併存疾患の発生率を悪化させたり、HIV保有者の動態に影響を与えたりする可能性のある進行中の慢性炎症やその他の免疫調節異常に影響を与える可能性があるかどうかである。 PWH。

私たちの知識における大きなギャップは、特に免疫能力が低下していることがよく知られている特定のサブグループにおいて、新型コロナウイルス感染症ワクチンが短期および長期の両方で防御的で強力な免疫応答を誘導できるかどうかです。 NACIを含む政府機関が免疫不全の状況における有効性について懸念を表明しているため、これは対処すべき重要な問題です。 現在の NACI 勧告では、「免疫抑制状態にある個人における新型コロナウイルス感染症ワクチン接種に関するデータは現時点では存在しない」と述べており、「免疫不全状態にある個人における免疫不全の相対的な程度は基礎疾患、進行状況によって異なるため、病気の発生や免疫機能を抑制する薬剤の使用…利益とリスクのバランスをケースバイケースで判断する必要があります。」 さらに、65歳以上の参加者では両ワクチンの有効性が広い信頼区間で低下することから分かるように、免疫老化と高齢が重要な意味を持つ可能性があることが示唆されている。 私たちの知識におけるもう1つの大きなギャップは、併存疾患の発生率を悪化させたり、HIV保有者の動態に影響を与えたりする可能性のある、進行中の慢性炎症やその他の免疫調節異常に、新型コロナウイルス感染症ワクチンが何らかの影響を与える可能性があるかどうかが分からないことです。 重要なのは、これらの知識のギャップはいずれも、ワクチンスポンサーによって評価される可能性が低いということです。

研究の目的 SARS-CoV-2 特異的免疫反応の生成、全身免疫活性化の誘導、および PWH の HIV ウイルス保有者への影響に対する COVID-19 ワクチンの効果を評価すること。

仮説:

主要な要因: 免疫反応の堅牢性と持続性の観点から、PWH は COVID-19 ワクチンに対する免疫反応の低下を示します。

二次的: 新型コロナウイルス感染症ワクチンは、PWH の免疫活性化と HIV 保有者に悪影響を及ぼします。

統計分析 ベースラインの特徴を調べて、研究群の参加者の比較可能性を評価します。 年齢や CD4+ T 細胞数などの連続変数は、中央値と四分位範囲の観点から説明されます。 性別や人種などのカテゴリ変数は割合で説明されます。

HIV 陽性グループと HIV 陰性グループ間の分析には、正規性の偏差がある場合、2 サンプルのスチューデントの t 検定またはウィルコクソン検定が使用されます。 両側 95% 信頼区間は、力価の対数変換を実行し、スチューデントの t 分布を参照して 95% 信頼区間を計算し、信頼区間の限界を累乗することによって取得されます。 上記の HIV サブグループ間の傾向を探す試みが行われます。

• 過去6か月以内に投薬を受けている（ステロイド外用は許可されています）
• HIV 陰性の参加者: 免疫不全状態または免疫反応を抑制する薬剤を服用している場合

研究デザイン これは、55 歳以上の HIV 感染者の SARS-CoV-2 ワクチンの免疫原性、免疫活性化、および HIV 保有者を HIV 陰性者と比較して調べる前向きの非ランダム化観察研究です。

カナダは現在、新型コロナウイルス感染症（COVID-19）ワクチンの導入を進めており、最も差し迫ったワクチンはmRNAワクチンの2つである。 これらは、3週間の間隔で接種されるファイザー-BioNTechの新型コロナウイルス感染症ワクチンと、4週間の間隔で接種されるモデルナの新型コロナウイルス感染症ワクチンです。 これらのワクチンには独特の保管要件があるため、モデルナのワクチンは主にトロントのメープルリーフメディカルクリニックなどのプライマリケアクリニックで使用されることが予想されます。 ただし、このプロトコールでは、ファイザー・ビオンテックワクチンが利用可能であれば、それを投与されている個人の観察研究も許可されます。 私たちは、2021 年 3 月 1 日までに両方のワクチンがプライマリケア人口に一般に提供されると予測しています。 ワクチン接種は、臨床および公衆衛生のガイドラインに従って行われます。 新型コロナウイルス感染症（COVID-19）ワクチンは、この調査研究の一環として投与されません。

研究期間: これは単一施設での縦断的研究であり、合計 75 人の参加者が採血と唾液採取により 48 週間にわたって追跡調査されます。 評価は、スクリーニング時、ベースライン時、および研究中の追加の 8 時点で行われます。 スクリーニングおよびフォローアップ訪問の詳細については、セクション 4.4 サンプリングで概説されます。

採用計画

この研究には合計75人の参加者が募集される。 臨床研究コーディネーターは、研究代表者の監督の下でカルテのレビューを実施し、資格基準を満たす潜在的な研究参加者に連絡します。 研究群の内訳は次のとおりです。

• PWH 免疫応答者 (n= 35): 1 年以上ウイルス量が検出不能、CD4 >500/uL、CD4/CD8 比 >1 (歴史的に CD4 最低値が低い人を含む)

• PWH 免疫非反応者 (n= 10): ウイルス量が検出不能、CD4 <350/uL、または CD4/CD8 比 <0.75 が 1 年以上

• PWH 低レベルウイルス血症 (n= 10): 1 年以上の低レベルウイルス血症 (<1,000 コピー/mL)、任意の CD4、任意の CD4/CD8 比

• HIV 陰性対照 (n= 20): 年齢と性別を一致させた

登録が進むにつれて、適切かつ実行可能に応じて、PWH免疫非反応患者およびPWH低レベルウイルス血症群の数を増やすよう努めます。

スクリーニング参加者は、臨床試験への参加への関心と、包含基準および除外基準に基づいて研究への適切性を評価するために評価されます。 データベース検索では、人種/民族および性別/性別に基づいた人口統計の多様性の最適化にも焦点を当てます。 研究に興味があり、包含基準と除外基準を満たしている参加者には、検討するための同意書が与えられ、質問があれば答えられます。 スクリーニング訪問は、ベースライン訪問の90日以内に行われます。

スクリーニング訪問時には、血液学、生化学、性感染症、C 反応性タンパク質などの定期的な血液検査が行われます。 HIV 陽性の参加者には、ルーチンの血液検査に加えて、CD4 数、ウイルス量、CD4/CD8 比が実施されます。 HIV 陰性の参加者には、日常的な血液検査に加えて、以下の検査が行われます: HIV 検査。

サンプリング：

訪問日時 研究標本

1. スクリーニング* ベースラインの最大 90 日前まで
2. ベースライン ワクチン接種の24時間前まで 血液管13本（113.5mL）、 唾液

COVID-19 ワクチンの 1 回目の投与 (臨床手順; この研究研究の一部ではありません) 3 追跡調査 1 1 回目のワクチン接種後 10 日 血液管 7 本 (62.5mL) 4 追跡調査 2 1 回目のワクチン接種から 21 日後 血液管 7 本 ( 5 経過観察 3 初回ワクチン接種後 28 日 血液管 13 本 (113.5mL)、 唾液 新型コロナウイルス感染症ワクチンの 2 回目の投与 (臨床手順; この研究研究の一部ではありません) 6 追跡調査 4 2 回目のワクチン接種から 7 日後 7 血液チューブ (62.5mL)、唾液 7 追跡調査 5 2 回目のワクチン接種から 14 日後 7血液チューブ (62.5mL) 8 本 フォローアップ 6 2 回目のワクチン接種後 28 日 血液チューブ (62.5mL) 7 本9 追跡調査 7 初回ワクチン接種後 24 週間 血液管 13 本 (113.5mL)、 唾液 10 フォローアップ 8* 初回ワクチン接種後 48 週間 血液チューブ 13 本 (113.5mL)

上の図は、すべての研究訪問と各訪問で収集された標本を示しています。 参加者は、新型コロナウイルス感染症ワクチンの接種を受けたことを確認するワクチン接種カードのコピーを提出する必要があります。 ベースライン訪問（V1）は、新型コロナウイルス感染症（COVID-19）ワクチンの初回投与を受ける前に最大24時間の検体採取として定義されます。 それ以降のその他すべての訪問は、指定された日数の +/- 3 日後に行われます。 V3（プライムワクチン来院後21日）は、参加者がモデルナワクチンを接種するかファイザー・ビオンテックワクチンを接種するかに関係なく、ワクチンの2回目の接種を受ける前に実施する必要があることに注意してください。

参加者が予定日に追加免疫を受け取らなかった場合、追加免疫後のすべての時点は追加免疫の投与時間に応じて調整されます。 たとえば、参加者が制御不能な理由により、プライム後 28 日という予定時刻ではなく、プライム後 35 日にモデルナ ブースターを受け取りに来た場合、V4 および V5 の時点はそれに応じて調整されます。 免疫は遅れた時点でも追加免疫で獲得されるはずであるため、参加者が研究プロトコールに留まるために、この研究では追加免疫の遅延を許可します。 さらに、2回目の接種が2週間以上遅れた場合（つまり、 オンタリオ州は現在、2回目の接種を最大16週間延期するよう求めていますが、予定されている2回目の接種の前に1回の来院を追加します（2回目の接種の7日前まで）。 したがって、2 週間を超えて 2 回目の接種が遅れた患者の治験訪問は、以下のように修正されます。

訪問日時 研究標本

1. スクリーニング* ベースラインの最大 90 日前まで
2. ベースライン ワクチン接種の24時間前まで 血液管13本（113.5mL）、 唾液

COVID-19 ワクチンの 1 回目の投与 (臨床手順; この研究研究の一部ではありません) 3 追跡調査 1 1 回目のワクチン接種後 10 日 血液管 7 本 (62.5mL) 4 追跡調査 2 1 回目のワクチン接種から 21 日後 血液管 7 本 ( 62.5mL) 5 経過観察 3 1回目のワクチン接種後28日 血液チューブ(62.5mL) 7本、唾液 6本フォローアップ 4 7 日前に 2 回目のワクチンを延期 13 本の血液チューブ (113.5mL)、 唾液 新型コロナウイルス感染症 (COVID-19) ワクチンの 2 回目の投与 (臨床手順; この研究研究の一部ではありません) 7 追跡調査 5 2 回目のワクチン接種から 7 日後 7 血液チューブ (62.5mL)、唾液 8 追跡調査 6 2 回目のワクチン接種から 14 日後 7血液チューブ (62.5mL) 9 本 追跡調査 7 2 回目のワクチン接種後 28 日 血液チューブ 7 本 (62.5mL) 10 追跡調査 8 初回ワクチン接種後 24 週間 血液管 13 本 (113.5mL)、 唾液 11 フォローアップ 9* 初回ワクチン接種後 48 週間 血液チューブ 13 本 (113.5mL)

頻繁な採血回数を考慮すると、参加者は訪問を欠席した場合でも研究に残るよう招待されます。

ワクチン効果が6か月までに弱まる可能性や、その他の基礎的な免疫抑制（化学療法など）があるため、一部の参加者には、オンタリオ州とカナダのワクチン機関による新たな推奨に従ってワクチンの3回目の追加接種が提供される可能性があります。 参加者が追加接種を受ける場合、3回目の追加接種から7日以内、その後1ヵ月後と3ヵ月後に採血（7本の血液管）と唾液を採取するよう求められます。 これらの訪問が、上記の表ですでに予定されているフォローアップ訪問の同じ時点に 1 週​​間近い場合は、その採血をフォローアップ訪問としても使用します。

参加者識別番号の割り当て 同意した各参加者には、すべての研究関連手順で参加者を識別する一意の参加者識別番号 (PID) が割り当てられます。 PID は、4 桁のサイト番号と 001 で始まる 3 桁の参加者番号の組み合わせです (例: 3001-001)。 一度割り当てられた PID は、いかなる理由であっても再利用できません。

臨床評価:

スクリーニング訪問: 参加者は、対象および除外基準に基づいて、研究への参加への関心と研究の適切性を評価するために評価されます。 研究に興味があり、包含基準と除外基準を満たしている参加者には、検討するための同意書が与えられ、質問があれば答えられます。 臨床評価には、ウイルス量、CD4 数、HIV 陽性参加者の CD4/CD8 比、および HIV 陽性参加者の HIV 検査に加えて、病歴（研究代表者の監督の下、カルテレビューを通じて研究コーディネーターが実施）および日常的な血液検査が含まれます。 HIV 陰性の参加者。 併用薬歴と cART レジメンは来院ごとに記録されます。 新型コロナウイルス感染症の記録も評価されます。これは、以下の症状のうち少なくとも 2 つがあった参加者に発生したものとして記録されます: 発熱 (体温 38 度以上)、悪寒、筋肉痛、頭痛、喉の痛み、または新たな嗅覚障害または味覚障害、または少なくとも 1 つの呼吸器症状または症状 (咳、息切れ、または肺炎の臨床的または X 線写真による証拠を含む) と少なくとも 1 つの鼻咽頭ぬぐい液を持った人に発生するものとして、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）検査で SARS-CoV-2 陽性となった鼻腔ぬぐい液、または唾液サンプル（参加者が入院している場合は呼吸器サンプル）。 人口統計: 人口統計情報 (生年月日、性別、人種) はスクリーニング時に記録されます。

ワクチン接種：参加者は、ワクチン製造業者が提供する標準仕様に従って、新型コロナウイルス感染症（COVID-19）ワクチンを投与されます。 ワクチン接種は調査研究のための訪問ではなく、臨床および公衆衛生のガイドラインに従って実施されます。 入手可能性と保管要件の理由から最も投与される可能性が高いワクチンはモデルナ製の新型コロナウイルス感染症ワクチンで、0日目と4週目（28日後）に投与される。 また、Pfizer-BioNTech 新型コロナウイルス感染症ワクチンが入手可能となり、プライマリケア提供者によって 0 日目と 3 週目 (21 日後) に投与される可能性もあります。 ワクチン接種日とワクチン製品 (Moderna または Pfizer-BioNTech) が文書化されます。

標本の収集:

これは観察研究であるため、検体と臨床情報のみが収集されます。

ベースライン (V2):

ワクチン接種を受ける 24 時間前までに、以下の情報が得られます。 cART レジメンの確認。唾液チューブを使用した唾液標本は参加者に渡され、1分後に臨床研究コーディネーターに返却されます。 SST チューブ 1 本、EDTA チューブ 2 本、および ACD チューブ 10 本の静脈穿刺 (血液 113.5 ml)

プライム後 10 日目 (V3):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。 SST 1 本、EDTA 2 本、および ACD チューブ 4 本の静脈穿刺（血液 62.5 ml）。ワクチンの即時反応原性について問い合わせる

プライム後 21 日目 (V4):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。 SST 1 本、EDTA 2 本、ACD チューブ 4 本の静脈穿刺 (血液 62.5 ml)

プライム後 28 日目 (V5):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。唾液チューブを使用した唾液標本は参加者に渡され、1分後に臨床研究コーディネーターに返却されます。 SST チューブ 1 本、EDTA チューブ 2 本、および ACD チューブ 10 本の静脈穿刺 (血液 113.5 ml)

ブースター後 7 日目 (2 回目の投与が遅れた場合は V6 または V7):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。唾液標本。 SST 1 本、EDTA 2 本、および ACD チューブ 4 本の静脈穿刺（血液 62.5 ml）。ワクチンの即時反応原性について問い合わせる

ブースター後 14 日目 (2 回目の投与が遅れた場合は V7 または V8):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。 SST 1 本、EDTA 2 本、ACD チューブ 4 本の静脈穿刺 (血液 62.5 ml)

ブースター後 28 日目 (2 回目の投与が遅れた場合は V8 または V9):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。 SST 1 本、EDTA 2 本、ACD チューブ 4 本の静脈穿刺 (血液 62.5 ml)

初回投与後 24 週目 (2 回目の投与が遅れた場合は V9 または V10):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。唾液標本。 SST チューブ 1 本、EDTA チューブ 2 本、および ACD チューブ 10 本の静脈穿刺 (血液 113.5 ml)

初回投与後 48 週目 (2 回目の投与が遅れた場合は V10 または V11):

cARTレジメンを含む、新規または継続中の併用薬の評価。新型コロナウイルス感染症を発症したかどうかの評価。 SST チューブ 1 本、EDTA チューブ 2 本、および ACD チューブ 10 本の静脈穿刺 (血液 113.5 ml)

2回目の投与が2週間以上遅れた場合、2回目の投与の直前（最大3日）に追加の治験来院が予定されます。 この訪問は訪問 #6 となり、合計 1 本の SST チューブ、2 本の EDTA、および 10 本の ACD チューブ (113.5ml) 唾液検体に加えて血液）も採取されます。 後続のすべての訪問はそれに応じて調整され、元の V6 が V7、V7->V8 などになり、V10->V11 で終わります。

研究プロジェクト:

唾液と血液検体の一部はトロント大学に送られる。 トロント大学および関連病院に送られる検体は、トロント大学医科学棟のオストロフスキー研究室で集中処理され、オストロフスキー研究室に保管されます。 NIH 用の検体は、Maple Leaf Medical Clinic から米国メリーランド州ベセスダにある NIH の Chun 研究室に直接発送されます。 唾液検査はトロント大学のゴマーマン研究室で行われます。 血清学的アッセイは、トロント大学と提携しているマウント サイナイ病院のギングラス研究室によって行われます。 中和アッセイと COVID-19 に対する T 細胞免疫応答はオストロフスキー研究室で実施されます。 IPDA アッセイは、Brad Jones (Cornell University) と協力して Ostrowski 研究室で行われます。 NIHに送られたサンプルはチュン研究室に保管され、チュン研究室はウイルス保有者アッセイと免疫活性化アッセイを実施する。 モイア研究室はB細胞免疫研究を実施します。 すべての研究所は、人体検体の処理から保管までの管理において豊富な経験を持っています。 メープルリーフクリニックから出たサンプルはすべて匿名化されます。

次のアッセイは、次のラボで実行されます。

マリオ・オストロウスキー博士のグループ:

オストロフスキー研究室は、生きた SARS-CoV-2 ウイルスの微量中和アッセイを社内で開発する専門知識を開発しました。 さらに、彼の研究室はカナダのプロビデンス・セラピューティクスと協力して、カナダの新型コロナウイルス感染症（COVID-19）mRNAワクチンの開発に関する前臨床研究を提供した27。 この研究室では、多数の研究者に対して SARS-CoV-2 中和アッセイを定期的に実施しています。 同研究室は、新型コロナウイルス感染症における T 細胞免疫応答の特性評価も行っており、T 細胞 ELISPOT アッセイを使用してワクチン抗原に対する T 細胞免疫応答を決定する予定です 28。 この研究室は主に HIV 研究室であり、コーネル大学の R. ブラッド ジョーンズ博士と協力して、インタクトなプロウイルス DNA アッセイを実行します。 ジョーンズ研究室は、データ分析を促進するために、トロント大学でそのプロトコールを共有する社内アッセイの設計に豊富な経験を持っています。 彼らは両方ともこのアッセイについて発表しています29。 以下のアッセイは、W0、W24、W48 で実行されます。 SARS-CoV-2 に対する中和力価 (プラーク減少微量中和アッセイ)。 SARS-CoV-2 IPDA に対する T 細胞 ELISPOT (インタクトなプロウイルス DNA アッセイ)。

チョン・テウク博士のグループ:

Chun 博士のプログラムは、1) HIV 疾患の病因におけるウイルス保有者の役割を詳しく説明することに焦点を当てています。 2) HIV 保有者の維持に寄与する宿主およびウイルス要因を調べる。 3) 抗レトロウイルス療法がない場合に、感染者において持続的なウイルス制御を達成することを目的とした治療戦略を開発する。 Chun 博士の研究室では、複数の HIV ウイルス保有者アッセイ、T 細胞の広範な免疫表現型解析、および可溶性バイオマーカーのプロファイリングを実施します。

スーザン・モア博士のグループ:

モイア博士の研究プログラムの主な焦点は、ウイルスに対する体液性免疫に関する知識のギャップを埋めることを最終目標として、HIV 疾患の病因における B 細胞の役割を研究することです。 この知識は、効果的な抗体ベースのワクチンの開発と、HIV 感染者に対する免疫療法介入の進歩にとって重要です。 モイア博士は主に、縦断的なB細胞/形質芽細胞の表現型解析と抗原特異的応答、およびB細胞/記憶の表現型解析と抗原特異的応答に焦点を当てます。

ジェニファー・ゴマーマン博士のグループ:

ゴマーマン博士は、SARS-CoV-2に対する唾液粘膜反応、特にウイルスの感染と保菌を防ぐために重要であると考えられているIgA反応を研究している新型コロナウイルス感染症チームを率いている。 彼女のチームは、収集した唾液サンプルを使用して、SARS-CoV-2 S および RBD に対する IgA 反応を検査する予定です。 彼女の研究室は、SARS-CoV-2 ウイルスに対する粘膜免疫を測定するための高感度かつ特異的なアッセイを社内で開発しました30。 現在の新型コロナウイルス感染症ワクチンが粘膜レベルで免疫を誘導するかどうかは不明である。 次のアッセイは、W0、5、24 に行われます: 唾液 IgA 対 SARS-CoV-2 S、RBD、および NP。

アンヌ・クロード・ギングラス博士のグループ:

アンヌ・クロード・ギングラス博士はタンパク質相互作用とハイスループット研究の専門家であり、彼女のグループはロボットプラットフォーム上でSARS-CoV-2スパイク、受容体結合ドメイン（RBD）およびヌクレオカプシドタンパク質ELISA検査（IgG、IgA、IgM）を開発しました。 1 日に何千ものサンプルをテストできるようにスケールアップできます。 彼女はまた、SARS-CoV-2 に対する血清の中和能力を予測できる ELISA ベースの代替アッセイを開発し、レンチウイルスベースのスパイク中和アッセイを最適化しました 30,31。 以下のアッセイがすべての時点で行われ、SARS-CoV-2、ヌクレオカプシド、および RBD ドメインに対する血清 IgG のスクリーニングが行われます。 ベースラインでこれらの抗体が存在する場合は、以前に SARS-CoV-2 があったことを示し、除外基準となります。 新型コロナウイルスワクチンはSARS-CoV-2スパイクタンパク質に対する抗体のみを誘導し、反応者はスパイクとRBDに対する抗体を生成するはずだが、ヌクレオカプシドに対する抗体は生成しないはずである。 ヌクレオカプシドに対する抗体は、ワクチンではなく感染に対する免疫反応を示していると考えられます。

REB のレビューと承認 - 研究の実施 施設は、トロント大学研究倫理委員会 REB から研究開始前に研究計画書の承認と同意書を取得します。 REB は、参加者の権利、安全、幸福を守るために、適切な研究文書をすべてレビューします。 研究は倫理上の承認を得た後にのみ実施されます。 プロトコールのコピー（プロトコールの修正を含む）、すべてのバージョンのインフォームド・コンセントフォーム、調査手段やアンケートなどの参加者が記入するその他の情報、および提案された広告/採用資料は、各参加者の REB によって検討および承認されなければなりません。試験実施前にセンターに問い合わせてください。