Impfstoffe in einer Zeit der dualen Pandemie: COVID-19-Impfstoff bei Menschen mit HIV

Bei Menschen mit HIV (PWH) besteht möglicherweise ein erhöhtes Risiko für COVID-19-bedingte Krankheiten oder die Sterblichkeit bei einer SARS-CoV-2-Infektion1-5, und COVID-19-Impfstoffe werden eine wichtige Rolle bei der Bekämpfung der Pandemie spielen. Derzeit werden in Ontario zwei mRNA-Impfstoffe eingesetzt (Pfizer-BioNTech, Moderna), beide mit einem Zwei-Dosen-Regime6,7. Obwohl die Daten bisher keine besonderen Sicherheitsbedenken für Menschen mit Menschen mit Behinderungen nahelegen, hat nur eine begrenzte Anzahl von Menschen mit Menschen mit Menschen an COVID-19-Impfstoffversuchen teilgenommen und sie wurden erst spät im Rahmen zweier kürzlich durchgeführter großer bestätigender Zulassungsstudien rekrutiert. Darüber hinaus wurden bei der Notfallzulassungsprüfung der Bestätigungsstudien für einen der Impfstoffe PWH nicht in Sicherheits- und Wirksamkeitsberechnungen einbezogen7,8, einschließlich PWH, die eine antiretrovirale Therapie (ART) erhalten und eine anhaltende niedrige Virämie, Immunseneszenz und/oder anhaltende Immunaktivierung aufweisen . Dennoch werden Menschen mit Behinderungen aufgefordert, sich umgehend impfen zu lassen, während die Datenerhebung noch andauert.

Eine erhebliche Lücke in unserem Wissen – und basierend auf Erfahrungen mit Impfstoffen, die Patienten mit PWH gegen andere Krankheitserreger verabreicht werden9 – besteht darin, ob COVID-19-Impfstoffe Auswirkungen auf anhaltende chronische Entzündungen und andere Immundysregulationen haben könnten, die das Auftreten von Komorbidität verschlimmern oder die Dynamik beeinflussen können das Reservoir des Humanen Immundefizienzvirus (HIV). Daher ist es von größter Bedeutung zu verstehen, wie sich COVID-19-Impfstoffe auf die Immunaktivierung und die HIV-Reservoirs bei PWH auswirken und möglicherweise Auswirkungen auf 38 Millionen PWH weltweit haben. Darüber hinaus legt die früher bei PWH berichtete vorzeitige Immunseneszenz in Verbindung mit der Heterogenität der Immunrekonstitution nach Einleitung einer ART nahe, dass es von entscheidender Bedeutung sein wird, festzustellen, ob COVID-19-Impfstoffe sowohl kurz- als auch langfristig schützende und robuste Immunantworten auslösen können. insbesondere in bestimmten Untergruppen mit verminderter Immunkompetenz. Die Aufklärung der Wirkung von COVID-19-Impfstoffen auf die Immunaktivierung und das HIV-Reservoir sowie die Wirksamkeit des Impfstoffs bei PWH sind von entscheidender Bedeutung, werden aber von Impfstoffsponsoren wahrscheinlich nicht bewertet.

Wir gehen davon aus, dass unsere Studienpopulation nicht in die frühe Prioritätsverabreichung der COVID-19-Impfstoffe in Ontario einbezogen wird. Unsere Zielgruppe sind Menschen mit über 55-jährigen Menschen mit häufigen Komorbiditäten, denen die Impfung wahrscheinlich innerhalb eines möglichst günstigen Zeitfensters und Zeitrahmens für diese gezielte Forschung angeboten wird.

Risiko von COVID-19 bei Menschen mit HIV (PWH)

Obwohl nur begrenzte Daten zum Risiko von COVID-19 bei Menschen mit HIV (PWH) vorliegen, deuten neue Erkenntnisse darauf hin, dass bei PWH bei einer SARS-CoV-2-Infektion möglicherweise ein erhöhtes Risiko für COVID-19-bedingte Erkrankungen oder die Sterblichkeit besteht. Beispielsweise zeigte eine prospektive Beobachtungsstudie aus dem Vereinigten Königreich, dass der HIV-positive Status nach Bereinigung um mehrere Variablen wie Geschlecht, ethnische Zugehörigkeit, Alter und ausgewählte Komorbiditäten weiterhin signifikant mit einem erhöhten Risiko der Sterblichkeit am 28. Tag bei Personen verbunden war, die wegen COVID-19 ins Krankenhaus eingeliefert wurden. 195. Eine weitere Studie aus dem Vereinigten Königreich zeigte ebenfalls, dass PWH nach Anpassung an Alter, Geschlecht, Benachteiligung, ethnische Zugehörigkeit, Rauchen und Fettleibigkeit ein erhöhtes Risiko für die Sterblichkeit durch COVID-19 haben (angepasste Hazard-Ratio 2,59; 95 %-KI 1,74–3,84)3. Ebenso zeigte eine Bevölkerungskohortenstudie aus Südafrika, dass HIV mit der COVID-19-Mortalität assoziiert ist, mit einer angepassten Hazard-Ratio von 2,14 (95 %-KI 1,70–2,70)10. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass mehrere potenzielle Störfaktoren in diesen Studien nicht berücksichtigt wurden, wie z. B. Beruf und Ersatzmarker für die HIV-Kontrolle11.

Unterdessen deuten andere Studien auf eine differenziertere Rolle von HIV bei den COVID-19-Ergebnissen hin. Während beispielsweise eine Studie aus New York zeigte, dass ein höherer Anteil der PWH im Vergleich zu HIV-negativen Personen einen Krankenhausaufenthalt, eine Einweisung auf die Intensivstation (ICU) und/oder einen Tod aufgrund von COVID-19 erlebte, bemerkten die Autoren, dass die meisten PWH dies erlitten Patienten mit schlechten Ergebnissen im Zusammenhang mit COVID-19 hatten eine niedrigere CD4-Zahl (< 500 Zellen/µL)12. In ähnlicher Weise ergab eine multinationale Studie, dass eine niedrigere CD4-Zahl (< 200 Zellen/mm3) mit schwerwiegenden Folgen im Sinne von Aufnahme auf die Intensivstation, mechanischer Beatmung oder Tod verbunden ist13. Eine weitere multizentrische Kohortenstudie mit drei europäischen Ländern führte eine multivariate Analyse durch, um zu zeigen, dass der einzige Faktor, der mit schwerem COVID-19 in Zusammenhang steht, eine aktuelle CD4-Zahl von weniger als 350 Zellen/µL ist (aOR 2,85; 95 %-KI 1,26–6,44). und mit der Mortalität eine niedrige CD4-T-Zellzahl im Tiefpunkt4. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass eine Immunschwäche im Zusammenhang mit der Virussuppression ein möglicher Risikofaktor für die Schwere der COVID-19-Erkrankung bei PWH sein kann. Die durch Impfung vermittelte Prävention einer SARS-CoV-2-Infektion und/oder einer schweren Erkrankung mit COVID-19 ist in dieser gefährdeten Bevölkerungsgruppe von entscheidender Bedeutung.

COVID-19-Impfstoffe werden eine wichtige Rolle bei der Bekämpfung der Pandemie spielen. Derzeit werden in Ontario zwei mRNA-Impfstoffe eingesetzt (Pfizer-BioNTech, Moderna), beide mit einem Zwei-Dosen-Regime.

In der aktuellen Empfehlung des National Advisory Committee on Immunization (NACI) heißt es, dass „bei nicht immunsupprimierten Teilnehmern mit einer immungeschwächten Erkrankung (z. B. einer stabilen HIV-Infektion), die in die klinischen Studien einbezogen wurden, bisher keine besorgniserregenden Sicherheitssignale festgestellt wurden“ und dass „lebende Menschen … mit HIV, die als immunkompetent gelten, können geimpft werden“15. Allerdings ist die Zahl der in diesen Studien bisher rekrutierten PWH sehr gering. Es gibt auch einige Hinweise darauf, dass ein höheres Alter und die damit verbundene Immunseneszenz wichtige Auswirkungen haben könnten, wie die Studienergebnisse einer verringerten Wirksamkeit des Impfstoffs mit einem breiten Konfidenzintervall bei älteren Teilnehmern (über 65 Jahre) belegen. Da ältere PWH häufig als anfällig für beschleunigte oder verstärkte Alterserscheinungen und Immunseneszenz eingestuft werden, unterstreichen diese Ergebnisse die Notwendigkeit, die Impfeffekte in dieser Gruppe klarer zu bewerten. Ansonsten ist die Wirksamkeit des Impfstoffs bei bestimmten PWH-Untergruppen, einschließlich solcher mit anhaltender geringer Virämie, Immunoseneszenz und/oder anhaltender Immunaktivierung, weitgehend unbekannt.

Immunogenität Derzeit wird angenommen, dass Impfstoffe, die robuste und langanhaltende Reaktionen von T- und B-Zellen hervorrufen können, Immunkorrelate des Schutzes bei geimpften Personen sind16. Sowohl die Pfizer-BioNTech- als auch die Moderna-Impfstoffe haben in ihren früheren Studien Immunogenität beschrieben.

Die Daten zur Immunogenität und potenziellen Korrelaten des Schutzes sind derzeit begrenzt und fehlen bei PWH, insbesondere in Untergruppen mit suboptimaler Immunwiederherstellung. Angesichts der Lücken in der Impfstoffzulassungsanalyse für Menschen mit Behinderungen ist es wichtig, Immunogenitätsprofile für Menschen mit Behinderungen zu erstellen, die geimpft werden.

Anhaltende Immunaktivierung bei PWH

Trotz der unglaublichen Fortschritte in der Wirksamkeit von ART reicht die Virussuppression mit ART oft nicht aus, um die erhöhte Immunaktivierung bei PWH vollständig zu dämpfen. Wichtig ist, dass sich anhaltende Immunaktivierung und/oder Entzündung als unabhängige Prädiktoren für Morbidität und Mortalität bei ART-behandelten PWH herausgestellt haben. Zu den Schlüsselmarkern der Immunaktivierung und Entzündung im Zusammenhang mit einer HIV-Infektion gehören die Plasmaspiegel von IL-6 und C-reaktivem Protein (CRP) sowie der Gerinnungsmarker D-Dimer und der lösliche Monozytenaktivierungsmarker sCD1420-22. Ein weiterer weit verbreiteter Entzündungsmarker ist die T-Zell-Aktivierung, definiert durch die Expression von CD38 und HLA-DR23.

Die Immunaktivierung hat offensichtlich einen negativen Einfluss auf die Morbidität und Mortalität von PWH, wird aber auch mit dem HIV-Reservoir in Verbindung gebracht24. Die Auswirkungen der COVID-19-Impfstoffe auf die Immunaktivierung und damit auf das HIV-Reservoir ART-behandelter PWH bleiben unklar. Angesichts des Mangels an Beweisen für COVID-19-Impfstoffe kann unser derzeitiges Verständnis ihrer möglichen Auswirkungen auf PWH nur aus früheren Studien zu Nicht-COVID-19-Impfstoffen abgeleitet werden.

Nicht-COVID-19-Impfstoffe und ihre Wirkung auf PWH

In Kanada gibt es mehrere Nicht-COVID-19-Impfstoffe, die für erwachsene Menschen mit Menschen mit Behinderungen empfohlen werden, darunter solche gegen Grippe, Tetanus/Diphtherie/Keuchhusten, Lungenentzündung/Pneumokokken-Erkrankungen, Meningokokken-Erkrankung, Hepatitis B und humanes Papillomavirus. Insbesondere wurde bereits früher gezeigt, dass einige dieser Impfstoffe vorübergehend eine Immunaktivierung induzieren und/oder das HIV-Reservoir beeinflussen. Beispielsweise zeigte eine Studie, die die Verabreichung des Influenza-Impfstoffs bei PWH unter ART mit unterdrückter Viruslast umfasste, dass die HIV-RNA-Transkription in der Woche nach der Impfung erfolgen kann9. Die Autoren stellten außerdem eine verstärkte Immunaktivierung (definiert durch CD38- und HLA-DR-Expression) während der vier Wochen nach der Impfung fest. In ähnlicher Weise wurde in einer anderen Studie, die die Wirkung des Pneumokokken-Impfstoffs auf ART-behandelte PWH mit unterdrückter Viruslast untersuchte, ein vorübergehender Anstieg der Plasma-HIV-RNA-Spiegel nach der Impfung beobachtet, der innerhalb von vier Wochen wieder auf nicht mehr nachweisbare Werte zurückkehrte25. Darüber hinaus haben frühere Arbeiten einiger Mitforscher dieses aktuellen Förderantrags auch gezeigt, dass der Influenza-Impfstoff die provirale HIV-Belastung in influenzaspezifischen CD4+-T-Zellen von ART-behandelten Patienten mit unterdrückter Viruslast überproportional erhöhen kann, was auf die Möglichkeit einer Impfung hindeutet das HIV-Reservoir beeinflussen26.

Eine erhebliche Wissenslücke besteht darin, ob COVID-19-Impfstoffe, insbesondere mit ihrer neuartigen mRNA-basierten Plattform, Auswirkungen auf anhaltende chronische Entzündungen und andere Immundysregulationen haben könnten, die das Auftreten von Komorbidität verschlimmern oder die Dynamik des HIV-Reservoirs beeinflussen können PWH.

Eine erhebliche Wissenslücke besteht darin, ob COVID-19-Impfstoffe sowohl kurz- als auch langfristig schützende und robuste Immunantworten auslösen können, insbesondere in bestimmten Untergruppen mit gut beschriebener, verminderter Immunkompetenz. Dies ist ein kritisches Problem, das angegangen werden muss, da Behörden, darunter NACI, Bedenken hinsichtlich der Wirksamkeit im Zusammenhang mit Immunschwäche geäußert haben. In der aktuellen NACI-Empfehlung heißt es, dass „derzeit keine Daten zur COVID-19-Impfung bei immunsupprimierten Personen vorliegen“ und dass „der relative Grad der Immunschwäche bei immungeschwächten Personen abhängig von der Grunderkrankung und dem Verlauf unterschiedlich ist.“ von Krankheiten und der Einnahme von Medikamenten, die die Immunfunktion unterdrücken... die Abwägung von Nutzen und Risiken muss von Fall zu Fall erfolgen.“ Darüber hinaus gibt es Hinweise darauf, dass Immunseneszenz und höheres Alter wichtige Auswirkungen haben könnten, was sich in einer verringerten Wirksamkeit mit einem breiten Konfidenzintervall bei beiden Impfstoffen bei Teilnehmern über 65 Jahren zeigt. Eine weitere erhebliche Wissenslücke besteht darin, dass wir nicht wissen, ob COVID-19-Impfstoffe Auswirkungen auf anhaltende chronische Entzündungen und andere Immundysregulationen haben können, die das Auftreten von Komorbidität verschlimmern oder die Dynamik des HIV-Reservoirs beeinflussen können. Wichtig ist, dass keine dieser Wissenslücken von den Impfstoffsponsoren wahrscheinlich ausgewertet wird.

STUDIENZIELE: Bewertung der Wirkung von COVID-19-Impfstoffen auf die Erzeugung einer SARS-CoV-2-spezifischen Immunantwort, die Induktion einer systemischen Immunaktivierung und die Beeinflussung der HIV-Virusreservoirs bei Menschen mit HIV.

Hypothesen:

Primär: PWH zeigt eine verminderte Immunantwort auf COVID-19-Impfstoffe im Hinblick auf Robustheit und Dauerhaftigkeit der Immunantwort.

Sekundär: COVID-19-Impfstoffe wirken sich negativ auf die Immunaktivierung und die HIV-Reservoirs bei Menschen mit HIV aus.

STATISTISCHE ANALYSE Die Ausgangsmerkmale werden untersucht, um die Vergleichbarkeit der Teilnehmer in den Studienarmen zu beurteilen. Kontinuierliche Variablen wie Alter und CD4+-T-Zellzahl werden anhand von Medianwerten und Interquartilbereichen beschrieben. Kategoriale Variablen wie Geschlecht und Rasse werden mit Proportionen beschrieben.

Bei Analysen zwischen HIV-positiven und HIV-negativen Gruppen wird der 2-Stichproben-Student-T-Test oder der Wilcoxon-Test verwendet, wenn eine Abweichung von der Normalität vorliegt. Zweiseitige 95 %-Konfidenzintervalle werden durch logarithmische Transformationen der Titer, Berechnen des 95 %-Konfidenzintervalls unter Bezugnahme auf die Student-t-Verteilung und anschließendes Potenzieren der Grenzen der Konfidenzintervalle erhalten. Es wird versucht, nach Trends zwischen den oben aufgeführten HIV-Untergruppen zu suchen.

• Medikamente innerhalb der letzten 6 Monate (topische Steroide sind erlaubt)
• Für HIV-negative Teilnehmer: immungeschwächte Erkrankungen oder Einnahme von Medikamenten, die die Immunantwort unterdrücken

STUDIENDESIGN Hierbei handelt es sich um eine prospektive, nicht randomisierte Beobachtungsstudie zur Untersuchung der Immunogenität des SARS-CoV-2-Impfstoffs, der Immunaktivierung und der HIV-Reservoirs bei Menschen mit HIV-Infektion im Vergleich zu HIV-negativen Personen ab 55 Jahren.

Da Kanada derzeit mit der Einführung von COVID-19-Impfstoffen beschäftigt ist, sind die beiden Impfstoffe mit der höchsten Priorität mRNA-Impfstoffe. Dabei handelt es sich um den Pfizer-BioNTech-COVID-19-Impfstoff, der im Abstand von 3 Wochen verabreicht wird, und den Moderna-COVID-19-Impfstoff, der im Abstand von 4 Wochen verabreicht wird. Angesichts der besonderen Lagerungsanforderungen dieser Impfstoffe wird erwartet, dass der Moderna-Impfstoff hauptsächlich in Kliniken der Grundversorgung wie der Maple Leaf Medical Clinic in Toronto eingesetzt wird. Das Protokoll ermöglicht jedoch auch Beobachtungsstudien an Personen, denen der Pfizer-BioNTech-Impfstoff verabreicht wird, sofern dieser ebenfalls verfügbar ist. Wir gehen davon aus, dass beide Impfstoffe für die Grundversorgungsbevölkerung bis zum 1. März 2021 allgemein verfügbar sein werden. Die Impfung erfolgt gemäß den klinischen und öffentlichen Gesundheitsrichtlinien. Im Rahmen dieser Forschungsstudie werden keine COVID-19-Impfstoffe verabreicht.

Studiendauer: Dies ist eine Längsschnittstudie an einem einzigen Standort, bei der insgesamt 75 Teilnehmer über 48 Wochen mit Blutabnahmen und Speichelproben beobachtet werden. Die Bewertungen werden beim Screening, zu Studienbeginn und zu 8 weiteren Zeitpunkten während der Studie durchgeführt. Einzelheiten zu Screening- und Nachuntersuchungen finden Sie in Abschnitt 4.4 Probenahme.

Rekrutierungsplan

Insgesamt werden 75 Teilnehmer für die Studie rekrutiert. Der Koordinator der klinischen Forschung führt unter Aufsicht des Hauptforschers eine Diagrammüberprüfung durch, um potenzielle Studienteilnehmer zu kontaktieren, die die Zulassungskriterien erfüllen. Die Aufteilung der Studienzweige ist hier beschrieben:

• PWH-Immunresponder (n = 35): seit mehr als einem Jahr nicht nachweisbare Viruslast, CD4 > 500/ul, CD4/CD8-Verhältnis > 1, einschließlich Personen mit einem historischen, niedrigen CD4-Nadir

• PWH-Immun-Nonresponder (n = 10): nicht nachweisbare Viruslast, CD4 <350/µL oder CD4/CD8-Verhältnis <0,75 für mehr als ein Jahr

• PWH Low-Level-Virämie (n = 10): Low-Level-Virämie (<1.000 Kopien/ml) für 1+ Jahr, jedes CD4, jedes CD4/CD8-Verhältnis

• HIV-negative Kontrolle (n=20): Alter und Geschlecht übereinstimmen

Mit fortschreitender Einschreibung werden wir versuchen, die Zahl der PWH-Immun-Non-Responder und PWH-Low-Level-Virämie-Arme zu erhöhen, soweit angemessen und machbar.

Screening-Teilnehmer werden beurteilt, um das Interesse an der Teilnahme an der klinischen Studie und die Eignung für die Studie anhand von Einschluss- und Ausschlusskriterien zu beurteilen. Die Datenbanksuche wird sich auch auf die Optimierung der demografischen Vielfalt basierend auf Rasse/ethnischer Zugehörigkeit und Geschlecht konzentrieren. Teilnehmer, die an der Studie interessiert sind und die Einschluss- und Ausschlusskriterien erfüllen, erhalten das Einverständnisformular zur Durchsicht und beantworten alle Fragen. Der Screening-Besuch findet innerhalb von 90 Tagen vor dem Basisbesuch statt.

Beim Screening-Besuch werden routinemäßige Blutuntersuchungen durchgeführt, darunter Hämatologie, Biochemie, sexuell übertragbare Infektionen und C-reaktives Protein. Zusätzlich zur routinemäßigen Blutuntersuchung wird bei HIV-positiven Teilnehmern Folgendes durchgeführt: CD4-Zahl, Viruslast, CD4/CD8-Verhältnis. Zusätzlich zur routinemäßigen Blutuntersuchung wird bei HIV-negativen Teilnehmern Folgendes durchgeführt: HIV-Test.

Probenahme:

Besuchen Sie Zeit-Datum-Forschungsproben

1. Screening* Bis zu 90 Tage vor Studienbeginn
2. Ausgangswert Bis zu 24 Stunden vor der Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml), Speichel

1. Dosis des COVID-19-Impfstoffs (klinisches Verfahren; nicht Teil dieser Forschungsstudie) 3 Nachuntersuchung 1 10 Tage nach der 1. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml) 4 Nachuntersuchung 2 21 Tage nach der 1. Impfung 7 Blutröhrchen ( 62,5 ml) 5 Nachuntersuchung 3 28 Tage nach der 1. Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml), Speichel 2. Dosis des COVID-19-Impfstoffs (klinisches Verfahren; nicht Teil dieser Forschungsstudie) 6 Nachuntersuchung 4 7 Tage nach der 2. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml), Speichel 7 Nachuntersuchung 5 14 Tage nach der 2. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml) 8 Nachuntersuchung 6 28 Tage nach der 2. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml) 9 Nachuntersuchung 7 24 Wochen nach der 1. Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml), Speichel 10 Nachuntersuchung 8* 48 Wochen nach der 1. Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml)

Die obige Abbildung beschreibt alle Studienbesuche und die bei jedem Besuch gesammelten Proben. Die Teilnehmer müssen eine Kopie des Impfausweises vorlegen, der bestätigt, dass sie den COVID-19-Impfstoff erhalten haben. Der Basisbesuch (V1) ist definiert als Probenentnahme bis zu 24 Stunden vor Erhalt der ersten Dosis des COVID-19-Impfstoffs. Alle weiteren Folgebesuche finden +/- 3 Tage der angegebenen Tage statt. Es ist zu beachten, dass V3 (Besuch 21 Tage nach der Erstimpfung) vor Erhalt der 2. Impfdosis stattfinden muss, unabhängig davon, ob die Teilnehmer Moderna- oder Pfizer-BioNTech-Impfstoff erhalten.

Für den Fall, dass ein Teilnehmer seine Auffrischungsimpfung nicht zum geplanten Termin erhält, werden alle Zeitpunkte nach der Auffrischungsimpfung entsprechend dem Zeitpunkt der Auffrischungsdosis angepasst. Wenn ein Teilnehmer beispielsweise aus Gründen, auf die er keinen Einfluss hat, seinen Moderna-Booster erst 35 Tage nach der Veröffentlichung statt wie geplant 28 Tage nach der Veröffentlichung erhalten würde, würden die Zeitpunkte für V4 und V5 entsprechend angepasst. Wir werden in dieser Studie eine Verzögerung für die Auffrischimpfung zulassen, damit ein Teilnehmer im Studienprotokoll bleiben kann, da davon auszugehen ist, dass mit einer Auffrischimpfung zu einem späteren Zeitpunkt immer noch Immunität erreicht werden sollte. Wenn sich die zweite Dosis außerdem um mehr als 2 Wochen verzögert (d. h. Da Ontario derzeit darauf drängt, die zweite Dosis um bis zu 16 Wochen zu verschieben, werden wir einen Besuch vor der geplanten zweiten Dosis hinzufügen (bis zu 7 Tage vor der zweiten Dosis). Daher werden die Studienbesuche für Personen mit einer um mehr als 2 Wochen verzögerten zweiten Dosis wie folgt geändert:

Besuchen Sie Zeit-Datum-Forschungsproben

1. Screening* Bis zu 90 Tage vor Studienbeginn
2. Ausgangswert Bis zu 24 Stunden vor der Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml), Speichel

1. Dosis des COVID-19-Impfstoffs (klinisches Verfahren; nicht Teil dieser Forschungsstudie) 3 Nachuntersuchung 1 10 Tage nach der 1. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml) 4 Nachuntersuchung 2 21 Tage nach der 1. Impfung 7 Blutröhrchen ( 62,5 ml) 5 Nachuntersuchung 3 28 Tage nach der 1. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml), Speichel 6 Nachuntersuchung 4 7 Tage vor der verspäteten zweiten Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml), Speichel 2. Dosis des COVID-19-Impfstoffs (klinisches Verfahren; nicht Teil dieser Forschungsstudie) 7 Nachuntersuchung 5 7 Tage nach der 2. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml), Speichel 8 Nachuntersuchung 6 14 Tage nach der 2. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml) 9 Nachuntersuchung 7 28 Tage nach der 2. Impfung 7 Blutröhrchen (62,5 ml) 10 Nachuntersuchung 8 24 Wochen nach der 1. Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml), Speichel 11 Nachuntersuchung 9* 48 Wochen nach der 1. Impfung 13 Blutröhrchen (113,5 ml)

Angesichts der häufigen Anzahl von Blutabnahmen werden die Teilnehmer weiterhin eingeladen, an der Studie teilzunehmen, wenn sie Besuche verpassen.

Es ist möglich, dass einigen Teilnehmern gemäß den neuen Empfehlungen der Impfbehörden in Ontario und Kanada eine dritte Auffrischungsdosis des Impfstoffs angeboten wird, da die Impfung möglicherweise nach sechs Monaten nachlässt oder eine andere zugrunde liegende Immunsuppression (z. B. Chemotherapie) vorliegt. Wenn ein Teilnehmer eine Auffrischungsdosis erhält, wird er aufgefordert, innerhalb von 7 Tagen nach der 3. Auffrischungsdosis und dann 1 und 3 Monate danach eine Blutentnahme (7 Blutröhrchen) und Speichel durchzuführen. Wenn diese Besuche zeitlich um eine Woche näher an den gleichen Zeitpunkten der bereits geplanten Nachuntersuchungen in der obigen Tabelle liegen, verwenden wir diese Blutentnahme auch als Nachuntersuchungen.

Zuweisung von Teilnehmer-Identifikationsnummern Jedem Teilnehmer, der zustimmt, wird eine eindeutige Teilnehmer-Identifikationsnummer (PID) zugewiesen, die den Teilnehmer für alle studienbezogenen Verfahren identifiziert. PIDs sind eine Kombination aus einer vierstelligen Standortnummer und einer dreistelligen Teilnehmernummer, beginnend mit 001 (z. B. 3001-001). Einmal zugewiesene PIDs können aus keinem Grund wiederverwendet werden.

Klinische Bewertungen:

Screening-Besuch: Die Teilnehmer werden beurteilt, um das Interesse an einer Teilnahme an der Studie und ihre Eignung für die Studie anhand von Einschluss- und Ausschlusskriterien zu beurteilen. Teilnehmer, die an der Studie interessiert sind und die Einschluss- und Ausschlusskriterien erfüllen, erhalten das Einverständnisformular zur Durchsicht und beantworten alle Fragen. Klinische Bewertungen umfassen eine Anamnese (durchzuführen vom Forschungskoordinator durch Diagrammüberprüfung unter der Aufsicht des Hauptprüfarztes) und routinemäßige Blutuntersuchungen zusätzlich zur Viruslast, CD4-Zahl, CD4/CD8-Verhältnis für HIV-positive Teilnehmer und HIV-Test für HIV-negative Teilnehmer. Die Vorgeschichte der Begleitmedikation und das CART-Regime werden bei jedem Besuch dokumentiert. Die Dokumentation einer COVID-19-Infektion wird ebenfalls bewertet: Dies wird dokumentiert, wenn sie bei Teilnehmern auftrat, die mindestens zwei der folgenden Symptome aufwiesen: Fieber (Temperatur ≥38 °C), Schüttelfrost, Myalgie, Kopfschmerzen, Halsschmerzen oder eine neue Geruchs- oder Geschmacksstörung , oder wenn sie bei Personen auftreten, die mindestens ein respiratorisches Zeichen oder Symptom (einschließlich Husten, Kurzatmigkeit oder klinische oder radiologische Anzeichen einer Lungenentzündung) und mindestens einen Nasen-Rachen-Abstrich hatten, nasal Abstrich oder Speichelprobe (oder Atemwegsprobe, wenn der Teilnehmer im Krankenhaus war), die im Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktionstest (RT-PCR) positiv auf SARS-CoV-2 war. Demografische Daten: Demografische Informationen (Geburtsdatum, Geschlecht, Rasse) werden beim Screening erfasst.

Impfung: Den Teilnehmern werden COVID-19-Impfstoffe gemäß den Standardspezifikationen der Impfstoffhersteller verabreicht. Bei der Impfung handelt es sich nicht um einen Forschungsstudienbesuch, sondern sie wird gemäß den klinischen und öffentlichen Gesundheitsrichtlinien durchgeführt. Der Impfstoff, der aufgrund der Verfügbarkeits- und Lageranforderungen am wahrscheinlichsten verabreicht wird, wird der Moderna-COVID-19-Impfstoff sein, der am Tag 0 und in Woche 4 (28 Tage später) verabreicht wird. Es ist auch möglich, dass der Pfizer-BioNTech-COVID-19-Impfstoff verfügbar sein wird, der am Tag 0 und in Woche 3 (21 Tage später) vom Hausarzt verabreicht wird. Das Impfdatum und das Impfprodukt (Moderna oder Pfizer-BioNTech) werden dokumentiert.

PROBENSAMMLUNG:

Da es sich um eine Beobachtungsstudie handelt, werden nur Proben und klinische Informationen gesammelt.

Grundlinie (V2):

Bis zu 24 Stunden vor Erhalt der Impfung wird Folgendes eingeholt: Bestätigung des cART-Regimes; Eine Speichelprobe mit einem Speichelröhrchen, die dem Teilnehmer gegeben und nach einer Minute an den Koordinator der klinischen Studie zurückgegeben wird; Venenpunktion von 1 SST-Röhrchen, 2 EDTA- und 10 ACD-Röhrchen (113,5 ml Blut)

Tag 10 nach dem Prime (V3):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Venenpunktion von 1 SST-, 2 EDTA- und 4 ACD-Röhrchen (62,5 ml Blut); Erkundigen Sie sich nach der sofortigen Reaktogenität des Impfstoffs

Tag 21 nach dem Prime (V4):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Venenpunktion von 1 SST-, 2 EDTA- und 4 ACD-Röhrchen (62,5 ml Blut)

Tag 28 nach dem Prime (V5):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Eine Speichelprobe mit einem Speichelröhrchen, die dem Teilnehmer gegeben und nach einer Minute an den Koordinator der klinischen Studie zurückgegeben wird; Venenpunktion von 1 SST-Röhrchen, 2 EDTA- und 10 ACD-Röhrchen (113,5 ml Blut)

Tag 7 nach der Auffrischimpfung (V6 oder V7 bei verzögerter zweiter Dosis):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Speichelprobe; Venenpunktion von 1 SST-, 2 EDTA- und 4 ACD-Röhrchen (62,5 ml Blut); Erkundigen Sie sich nach der sofortigen Reaktogenität des Impfstoffs

Tag 14 nach der Auffrischimpfung (V7 oder V8 bei verzögerter zweiter Dosis):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Venenpunktion von 1 SST-, 2 EDTA- und 4 ACD-Röhrchen (62,5 ml Blut)

Tag 28 nach der Auffrischimpfung (V8 oder V9 bei verzögerter zweiter Dosis):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Venenpunktion von 1 SST-, 2 EDTA- und 4 ACD-Röhrchen (62,5 ml Blut)

Woche 24 nach dem Primen (V9 oder V10 bei verzögerter zweiter Dosis):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Speichelprobe; Venenpunktion von 1 SST-Röhrchen, 2 EDTA- und 10 ACD-Röhrchen (113,5 ml Blut)

Woche 48 nach der Erstimpfung (V10 oder V11 bei verzögerter zweiter Dosis):

Beurteilung neuer oder fortlaufender Begleitmedikamente, einschließlich cART-Regime; Beurteilung, ob sich eine COVID-19-Infektion entwickelt hat; Venenpunktion von 1 SST-Röhrchen, 2 EDTA- und 10 ACD-Röhrchen (113,5 ml Blut)

Wenn sich die zweite Dosis um mehr als 2 Wochen verzögert, wird unmittelbar (bis zu 3 Tage) vor der zweiten Dosis ein zusätzlicher Studienbesuch geplant. Bei diesem Besuch handelt es sich um Besuch Nr. 6, bei dem insgesamt 1 SST-Röhrchen, 2 EDTA- und 10 ACD-Röhrchen (113,5 ml) vorhanden sind Blut) werden zusätzlich zur Speichelprobe entnommen. Alle nachfolgenden Besuche werden entsprechend angepasst, wobei die ursprüngliche V6 zu V7, V7->V8 usw. wird und mit V10->V11 endet.

Forschungsprojekte:

Speichel und eine Teilmenge der Blutproben gehen an die University of Toronto. Proben, die an die University of Toronto und angeschlossene Krankenhäuser gehen, werden zentral im Ostrowski-Labor im Medical Sciences-Gebäude der University of Toronto verarbeitet und im Ostrowski-Labor gelagert. Proben für das NIH werden direkt von der Maple Leaf Medical Clinic an das Chun-Labor am NIH, Bethesda, MD, USA, verschickt. Speicheltests werden vom Gommerman-Labor an der University of Toronto durchgeführt. Serologische Tests werden vom Gingras-Labor am Mount Sinai Hospital durchgeführt, das der University of Toronto angegliedert ist. Neutralisierungstests und T-Zell-Immunantworten auf COVID-19 werden im Ostrowski-Labor durchgeführt. Der IPDA-Assay wird im Ostrowski-Labor in Zusammenarbeit mit Brad Jones (Cornell University) durchgeführt. An das NIH gesendete Proben werden im Chun-Labor gelagert und das Chun-Labor führt Virusreservoir-Assays und Immunaktivierungsassays durch. Das Moir-Labor wird B-Zell-Immunstudien durchführen. Alle Labore verfügen über umfangreiche Erfahrung im Umgang mit menschlichen Proben von der Verarbeitung bis zur Lagerung. Alle Proben, die die Maple Leaf Clinic verlassen, werden anonymisiert.

Die folgenden Tests werden in den folgenden Laboren durchgeführt:

Dr. Mario Ostrowskis Gruppe:

Das Ostrowski-Labor verfügt über Fachkenntnisse in der Entwicklung eines internen Mikroneutralisationstests für lebende SARS-CoV-2-Viren. Darüber hinaus hat sein Labor in Zusammenarbeit mit Providence Therapeutics in Kanada präklinische Studien zur Entwicklung eines kanadischen COVID-19-mRNA-Impfstoffs durchgeführt27. Das Labor führt routinemäßig SARS-CoV-2-Neutralisierungstests für eine Reihe von Forschern durch. Das Labor hat auch T-Zell-Immunantworten bei einer COVID-19-Infektion charakterisiert und wird T-Zell-ELISPOT-Assays verwenden, um T-Zell-Immunantworten auf die Impfstoffantigene zu bestimmen28. Das Labor ist hauptsächlich ein HIV-Labor und wird in Zusammenarbeit mit Dr. R. Brad Jones von der Cornell University die Tests auf intakte provirale DNA durchführen. Das Jones-Labor verfügt über umfangreiche Erfahrung in der Entwicklung eines internen Assays, dessen Protokoll er an der University of Toronto weitergeben wird, um die Datenanalyse zu beschleunigen. Sie haben beide zu diesem Test veröffentlicht29. Die folgenden Tests werden bei W0, W24, W48 durchgeführt: Neutralisationstiter gegen SARS-CoV-2 (Plaque-Reduktions-Mikroneutralisationsassay); T-Zell-ELISPOT zu SARS-CoV-2 IPDA (Test auf intakte provirale DNA).

Dr. Tae-Wook Chuns Gruppe:

Das Programm von Dr. Chun konzentriert sich auf 1) die Beschreibung der Rolle von Virusreservoirs bei der Pathogenese der HIV-Erkrankung; 2) Untersuchung von Wirts- und Virusfaktoren, die zur Aufrechterhaltung von HIV-Reservoirs beitragen; und 3) Entwicklung therapeutischer Strategien, die darauf abzielen, bei infizierten Personen eine dauerhafte virologische Kontrolle zu erreichen, auch wenn keine antiretrovirale Therapie vorliegt. Das Labor von Dr. Chun wird mehrere Tests zum HIV-Virusreservoir, eine umfassende Immunphänotypisierung von T-Zellen und die Profilierung löslicher Biomarker durchführen.

Dr. Susan Moirs Gruppe:

Der Hauptschwerpunkt von Dr. Moirs Forschungsprogramm liegt auf der Untersuchung der Rolle von B-Zellen bei der Pathogenese der HIV-Erkrankung, mit dem ultimativen Ziel, Wissenslücken über die humorale Immunität gegen das Virus zu schließen. Dieses Wissen ist von entscheidender Bedeutung für die Entwicklung eines wirksamen Impfstoffs auf Antikörperbasis und für die Weiterentwicklung immuntherapeutischer Interventionen bei HIV-infizierten Personen. Dr. Moir wird sich hauptsächlich auf die longitudinale B-Zell-/Plasmablasten-Phänotypisierung und Antigen-spezifische Reaktionen sowie die B-Zell-/Gedächtnis-Phänotypisierung und Antigen-spezifische Reaktionen konzentrieren.

Dr. Jennifer Gommermans Gruppe:

Dr. Gommerman leitet ein COVID-19-Team, das die Reaktionen der Speichelschleimhaut auf SARS-CoV-2 und insbesondere die IgA-Reaktion untersucht, die als entscheidend für den Schutz vor Infektionen und die Übertragung des Virus angesehen wird. Ihr Team wird gesammelte Speichelproben verwenden, um die IgA-Reaktion auf SARS-CoV-2 S und RBD zu testen. Ihr Labor hat intern empfindliche und spezifische Tests entwickelt, um die Schleimhautimmunität gegen das SARS-CoV-2-Virus zu bestimmen30. Es ist nicht bekannt, ob die aktuellen COVID-19-Impfstoffe eine Immunität auf Schleimhautebene induzieren. Die folgenden Tests werden bei W0, 5, 24 durchgeführt: Speichel-IgA gegen SARS-CoV-2 S, RBD und NP.

Gruppe von Dr. Anne-Claude Gingras:

Dr. Anne-Claude Gingras ist Expertin für Proteininteraktionen und Hochdurchsatzstudien und ihre Gruppe hat SARS-CoV-2-Spike- und Rezeptorbindungsdomänen- (RBD) und Nukleokapsid-Protein-ELISA-Tests (IgG, IgA, IgM) auf einer Roboterplattform entwickelt Das kann so skaliert werden, dass Tausende von Proben pro Tag getestet werden können. Sie hat außerdem einen ELISA-basierten Ersatztest entwickelt, der die Neutralisierungsfähigkeit des Serums gegenüber SARS-CoV-2 vorhersagen kann, und einen Lentivirus-basierten Spike-Neutralisierungstest optimiert30,31. Die folgenden Tests werden zu jedem Zeitpunkt und Screening durchgeführt: Serum-IgG gegen SARS-CoV-2, Nukleokapsid und RBD-Domäne. Das Vorhandensein dieser Antikörper zu Studienbeginn weist auf eine frühere SARS-CoV-2-Infektion hin und ist ein Ausschlusskriterium. Die COVID-Impfstoffe induzieren nur Antikörper gegen das SARS-CoV-2-Spike-Protein und Responder sollten Antikörper gegen Spike und RBD entwickeln, nicht jedoch gegen das Nukleokapsid. Antikörper gegen das Nukleokapsid würden eher auf eine Immunantwort auf eine Infektion als auf den Impfstoff hinweisen.

REB-Überprüfung und -Genehmigung – Durchführung der Studie. Der Standort wird vor Beginn der Studie die Genehmigung für das Studienprotokoll und das Einverständnisformular vom REB des Research Ethics Board der University of Toronto einholen. Das REB prüft alle relevanten Studienunterlagen, um die Rechte, die Sicherheit und das Wohlergehen der Teilnehmer zu gewährleisten. Die Studie wird erst durchgeführt, nachdem die Ethikgenehmigung vorliegt. Eine Kopie des Protokolls (einschließlich Protokolländerungen), aller Versionen der Einverständniserklärungen, anderer von den Teilnehmern auszufüllender Informationen wie Umfrageinstrumente oder Fragebögen sowie aller vorgeschlagenen Werbe-/Rekrutierungsmaterialien müssen vom REB jedes Teilnehmers überprüft und genehmigt werden Zentrum vor der Durchführung der Studie.