Vaccini in un periodo di doppia pandemia: vaccino COVID-19 nelle persone con HIV

Le persone con HIV (PWH) possono presentare un rischio maggiore di malattie correlate al COVID-19 o di mortalità in seguito all’infezione da SARS-CoV-21-5 e i vaccini COVID-19 svolgeranno un ruolo significativo nella lotta alla pandemia. Attualmente, in Ontario sono disponibili due vaccini a mRNA (Pfizer-BioNTech, Moderna), entrambi con un regime a due dosi6,7. Sebbene i dati finora non suggeriscano particolari problemi di sicurezza per gli PWH, solo un numero limitato di PWH ha partecipato agli studi sul vaccino COVID-19 ed è stato reclutato tardivamente durante due recenti ampi studi di conferma di approvazione. Inoltre, la revisione dell’approvazione d’emergenza degli studi di conferma per uno dei vaccini non includeva i PWH nei calcoli di sicurezza ed efficacia7,8, compresi i PWH sottoposti a terapia antiretrovirale (ART) che presentano viremia di basso livello in corso, immunosenescenza e/o attivazione immunitaria persistente. . Tuttavia, gli PWH sono incoraggiati a vaccinarsi tempestivamente mentre la raccolta dei dati continua.

Una lacuna significativa nelle nostre conoscenze – e basata sull’esperienza con i vaccini somministrati a PWH per altri agenti patogeni9 – è se i vaccini COVID-19 possano avere un impatto sull’infiammazione cronica in corso e su altre disregolazioni immunitarie che possono esacerbare l’incidenza della comorbilità o influenzare la dinamica della malattia. il serbatoio del virus dell’immunodeficienza umana (HIV). Pertanto, comprendere in che modo i vaccini COVID-19 influenzano l’attivazione immunitaria e i serbatoi dell’HIV negli PWH è di fondamentale importanza e potrebbe avere implicazioni per 38 milioni di PWH a livello globale. Inoltre, l’immunosenescenza prematura precedentemente segnalata in PWH, unita all’eterogeneità della ricostituzione immunitaria dopo l’inizio della ART, suggerisce che sarà fondamentale determinare se i vaccini COVID-19 possono indurre risposte immunitarie protettive e robuste sia a breve che a lungo termine, in particolare in sottogruppi specifici con ridotta immunocompetenza. Chiarire l’effetto dei vaccini COVID-19 sull’attivazione immunitaria e sul serbatoio dell’HIV, nonché l’efficacia del vaccino nella PWH, è fondamentale ma è improbabile che venga valutato dagli sponsor del vaccino.

Ci aspettiamo che la nostra popolazione in studio non sarà inclusa nella somministrazione prioritaria dei vaccini COVID-19 in Ontario. La nostra popolazione target è costituita da persone con età superiore ai 55 anni, spesso con comorbilità, a cui è probabile che venga offerta la vaccinazione entro una finestra temporale e un periodo di tempo convenienti per questa ricerca diretta.

Rischio di COVID-19 nelle persone con HIV (PWH)

Sebbene i dati sul rischio di COVID-19 sulle persone con HIV (PWH) siano limitati, prove emergenti suggeriscono che le persone con HIV potrebbero presentare un aumento del rischio di malattie correlate a COVID-19 o di mortalità in seguito all’infezione da SARS-CoV-2. Ad esempio, uno studio osservazionale prospettico condotto nel Regno Unito ha dimostrato che, dopo aver adeguato diverse variabili tra cui sesso, etnia, età e comorbilità selezionate, lo stato positivo all’HIV è rimasto significativamente associato a un aumento del rischio di mortalità al 28° giorno tra gli individui ricoverati in ospedale per COVID-19. 195. Un altro studio del Regno Unito ha anche dimostrato che le persone con disabilità sperimentano un rischio maggiore di mortalità da COVID-19 dopo aver aggiustato i dati per età, sesso, deprivazione, etnia, fumo e obesità (hazard ratio aggiustato 2,59; IC al 95% 1,74-3,84)3. Allo stesso modo, anche uno studio di coorte sulla popolazione del Sud Africa ha dimostrato che l’HIV è associato alla mortalità per COVID-19 con un rapporto di rischio aggiustato di 2,14 (IC al 95% 1,70-2,70)10. È importante notare, tuttavia, che in questi studi non sono stati inclusi diversi potenziali fattori confondenti, come l'occupazione e i marcatori surrogati del controllo dell'HIV11.

Nel frattempo, altri studi suggeriscono che l’HIV potrebbe svolgere un ruolo più sfumato negli esiti del COVID-19. Ad esempio, mentre uno studio di New York ha mostrato che una percentuale maggiore di PWH ha subito ricovero ospedaliero, ricovero in unità di terapia intensiva (ICU) e/o decesso a causa di COVID-19 rispetto agli individui HIV-negativi, gli autori hanno commentato che la maggior parte degli PWH che che hanno avuto esiti scarsi correlati al COVID-19 avevano una conta di CD4 inferiore (< 500 cellule/μL)12. Allo stesso modo, uno studio multinazionale ha rilevato che una conta di CD4 inferiore (< 200 cellule/mm3) è associata a esiti gravi definiti dal ricovero in terapia intensiva, dalla ventilazione meccanica o dalla morte13. Un altro studio di coorte multicentrico che ha coinvolto tre paesi europei ha condotto un’analisi multivariata per dimostrare che l’unico fattore associato a COVID-19 grave è una conta attuale di CD4 inferiore a 350 cellule/μL (aOR 2,85; IC al 95% 1,26-6,44), e con la mortalità, un basso nadir della conta delle cellule T CD44. In sintesi, l’immunodeficienza può essere un possibile fattore di rischio per la gravità della malattia COVID-19 nella PWH nel contesto della soppressione virale. La prevenzione mediata dal vaccino dell’infezione da SARS-CoV-2 e/o della malattia grave con COVID-19 è essenziale in questa popolazione vulnerabile.

I vaccini contro il COVID-19 svolgeranno un ruolo significativo nella lotta alla pandemia. Attualmente, ci sono due vaccini a mRNA da utilizzare in Ontario (Pfizer-BioNTech, Moderna), entrambi con un regime a due dosi.

L'attuale raccomandazione del Comitato consultivo nazionale per l'immunizzazione (NACI) afferma che "nessun segnale preoccupante è stato notato fino ad oggi in partecipanti non immunodepressi con una condizione immunocompromettente (ad esempio, infezione da HIV stabile) inclusi negli studi clinici" e che "le persone che vivono affetti da HIV che sono considerati immunocompetenti possono essere vaccinati"15. Tuttavia, il numero di PWH reclutati in questi studi fino ad oggi è molto piccolo. Vi è anche qualche suggerimento che l’età avanzata e la sua immunosenescenza associata possano avere implicazioni importanti, come evidenziato dai risultati dello studio sulla ridotta efficacia del vaccino con un ampio intervallo di confidenza nei partecipanti più anziani (di età superiore ai 65 anni). Nella misura in cui gli anziani sono spesso caratterizzati come suscettibili a segni accelerati o accentuati di invecchiamento e immunosenescenza, questi risultati sottolineano la necessità di valutare più chiaramente gli effetti del vaccino in questo gruppo. Altrimenti, l’efficacia del vaccino in particolari sottogruppi di PWH, compresi quelli con viremia di basso livello, immunosenescenza e/o attivazione immunitaria persistente, è in gran parte sconosciuta.

Immunogenicità Al momento, si presume che i vaccini in grado di suscitare risposte robuste e durature da parte delle cellule T e B siano correlati immunitari della protezione negli individui vaccinati16. Sia il vaccino Pfizer-BioNTech che quello Moderna hanno descritto l’immunogenicità nei loro studi precedenti.

I dati sull’immunogenicità e sui potenziali correlati di protezione sono limitati in questo momento e carenti nel PWH, soprattutto nei sottogruppi con ripristino immunitario non ottimale. Date le lacune nell’analisi dell’approvazione del vaccino per PWH, è importante stabilire i profili di immunogenicità nei PWH che ricevono vaccini.

Attivazione immunitaria persistente nella PWH

Nonostante gli incredibili progressi nell’efficacia dell’ART, la soppressione virale con l’ART è spesso insufficiente a smorzare completamente l’accresciuta attivazione immunitaria presente nella PWH. È importante sottolineare che l’attivazione immunitaria persistente e/o l’infiammazione sono emerse come predittori indipendenti di morbilità e mortalità nell’artrite reumatoide trattata con ART. I marcatori chiave dell’attivazione immunitaria e dell’infiammazione nel contesto dell’infezione da HIV comprendono i livelli plasmatici di IL-6 e della proteina C-reattiva (CRP), nonché il marcatore della coagulazione D-dimero e il marcatore di attivazione dei monociti solubili sCD1420-22. Un altro marcatore di infiammazione ampiamente utilizzato è l’attivazione delle cellule T definita dall’espressione di CD38 e HLA-DR23.

L’attivazione immunitaria ha evidentemente un impatto negativo sulla morbilità e sulla mortalità della PWH, ma è stata anche collegata al serbatoio dell’HIV24. Le implicazioni dei vaccini COVID-19 sull’attivazione immunitaria e, a sua volta, sul serbatoio dell’HIV del PWH trattato con ART rimangono poco chiare. Data la mancanza di prove sui vaccini anti-COVID-19, la nostra attuale comprensione del loro potenziale impatto sulla PWH può essere estrapolata solo da studi precedenti su vaccini non-COVID-19.

Vaccini non-COVID-19 e loro effetto sulla PWH

Esistono diversi vaccini non-COVID-19 raccomandati per gli adulti affetti da PWH in Canada, compresi quelli contro influenza, tetano/difterite/pertosse, polmonite/malattie pneumococciche, malattia meningococcica, epatite B e papillomavirus umano. In particolare, è stato precedentemente dimostrato che alcuni di questi vaccini inducono temporaneamente l’attivazione immunitaria e/o influenzano il serbatoio dell’HIV. Ad esempio, uno studio che prevedeva la somministrazione del vaccino antinfluenzale nei soggetti PWH sottoposti ad ART con carica virale soppressa ha dimostrato che la trascrizione dell’RNA dell’HIV può verificarsi nella settimana successiva alla vaccinazione9. Gli autori hanno anche notato una maggiore attivazione immunitaria (definita dall’espressione di CD38 e HLA-DR) durante le quattro settimane successive alla vaccinazione. Allo stesso modo, un altro studio che ha valutato l’effetto del vaccino pneumococcico sull’artrite reumatoide trattata con ART con carica virale soppressa ha osservato un aumento transitorio dei livelli plasmatici di HIV RNA post-vaccinazione, che sono tornati a livelli non rilevabili entro quattro settimane25. Inoltre, il lavoro precedente di alcuni dei co-investigatori di questa attuale richiesta di sovvenzione ha anche dimostrato che il vaccino antinfluenzale può aumentare in modo sproporzionato il carico virale dell’HIV nelle cellule T CD4+ specifiche dell’influenza di PWH trattati con ART con cariche virali soppresse, suggerendo la capacità della vaccinazione influenzare il serbatoio dell’HIV26.

Una lacuna significativa nelle nostre conoscenze è se i vaccini COVID-19, in particolare con la loro nuova piattaforma basata su mRNA, possano avere un impatto sull’infiammazione cronica in corso e su altre disregolazioni immunitarie che possono esacerbare l’incidenza della comorbilità o influenzare la dinamica del serbatoio dell’HIV in PWH.

Una lacuna significativa nelle nostre conoscenze è se i vaccini COVID-19 possano indurre risposte immunitarie protettive e robuste sia a breve che a lungo termine, in particolare in sottogruppi specifici con immunocompetenza ridotta e ben descritta. Questa è una questione critica da affrontare poiché le agenzie, inclusa la NACI, hanno espresso preoccupazioni sull’efficacia nel contesto dell’immunodeficienza. L'attuale raccomandazione NACI afferma che "attualmente non ci sono dati sulla vaccinazione COVID-19 in individui immunodepressi" e che poiché "[l] il grado relativo di immunodeficienza negli individui immunocompromessi è variabile a seconda della condizione di base, la progressione delle malattie e dell’uso di farmaci che sopprimono la funzione immunitaria… il bilancio tra benefici e rischi deve essere stabilito caso per caso”. Inoltre, vi è il suggerimento che l’immunosenescenza e l’età avanzata possano avere implicazioni importanti, come evidenziato da una ridotta efficacia con un ampio intervallo di confidenza con entrambi i vaccini nei partecipanti di età superiore ai 65 anni. Un’altra lacuna significativa nelle nostre conoscenze è che non sappiamo se i vaccini contro il COVID-19 possano avere un impatto sull’infiammazione cronica in corso e su altre disregolazioni immunitarie che possono esacerbare l’incidenza della comorbilità o influenzare la dinamica del serbatoio dell’HIV. È importante sottolineare che nessuna di queste lacune di conoscenza sarà probabilmente valutata dagli sponsor dei vaccini.

OBIETTIVI DI STUDIO Valutare l’effetto dei vaccini COVID-19 sulla generazione di una risposta immunitaria specifica per SARS-CoV-2, inducendo l’attivazione immunitaria sistemica e influenzando i serbatoi virali dell’HIV nella PWH.

Ipotesi:

Primario: il PWH mostrerà una risposta immunitaria ridotta verso i vaccini COVID-19 in termini di robustezza e durata della risposta immunitaria.

Secondario: i vaccini COVID-19 influenzeranno negativamente l’attivazione immunitaria e i serbatoi dell’HIV nella PWH.

ANALISI STATISTICA Le caratteristiche di base saranno esaminate per valutare la comparabilità dei partecipanti nei bracci di studio. Le variabili continue come l'età e la conta delle cellule T CD4+ saranno descritte in termini di mediane e intervalli interquartili. Le variabili categoriche come il genere e la razza saranno descritte con proporzioni.

Le analisi tra i gruppi HIV positivi e HIV negativi utilizzeranno il test t di Student a 2 campioni o il test di Wilcoxon se c'è una deviazione dalla normalità. Gli intervalli di confidenza al 95% bilaterali saranno ottenuti eseguendo trasformazioni logaritmiche dei titoli calcolando l'intervallo di confidenza al 95% con riferimento alla distribuzione t di Student, e quindi esponendo i limiti degli intervalli di confidenza. Verranno fatti tentativi per cercare le tendenze tra i sottogruppi dell'HIV sopra elencati.

• farmaci negli ultimi 6 mesi (gli steroidi topici sono consentiti)
• Per i partecipanti HIV-negativi: condizioni di compromissione del sistema immunitario o assunzione di farmaci che sopprimono la risposta immunitaria

DISEGNO DELLO STUDIO Questo è uno studio osservazionale prospettico, non randomizzato per esaminare l'immunogenicità del vaccino SARS-CoV-2, l'attivazione immunitaria e i serbatoi dell'HIV nelle persone con infezione da HIV rispetto agli individui HIV-negativi, in quelli di età pari o superiore a 55 anni.

Poiché il Canada sta attualmente lanciando i vaccini contro il COVID-19, i due vaccini più imminenti sono i vaccini mRNA. Si tratta del vaccino Pfizer-BioNTech COVID-19 somministrato a 3 settimane di distanza e del vaccino Moderna COVID-19 somministrato a 4 settimane di distanza. Considerati i requisiti unici di conservazione di questi vaccini, si prevede che il vaccino Moderna sarà utilizzato principalmente nelle cliniche di assistenza primaria come la Maple Leaf Medical Clinic, Toronto. Tuttavia, il protocollo consentirà anche lo studio osservazionale di individui a cui è stato somministrato il vaccino Pfizer-BioNTech, se disponibile. Prevediamo la disponibilità generale di entrambi i vaccini per la popolazione di assistenza primaria entro il 1 marzo 2021. La vaccinazione avverrà secondo le linee guida cliniche e di sanità pubblica. I vaccini COVID-19 non verranno somministrati come parte di questo studio di ricerca.

Durata dello studio: si tratta di uno studio longitudinale in un unico sito in cui 75 partecipanti in totale vengono seguiti per 48 settimane con prelievi di sangue e campioni di saliva. Le valutazioni verranno effettuate allo screening, al basale e in 8 ulteriori momenti durante lo studio. I dettagli sullo screening e sulle visite di follow-up sono descritti nella sezione 4.4 Campionamento.

Piano di reclutamento

Per lo studio saranno reclutati un totale di 75 partecipanti. Il coordinatore della ricerca clinica eseguirà la revisione della cartella con la supervisione del ricercatore principale per contattare i potenziali partecipanti allo studio che soddisfano i criteri di ammissibilità. La ripartizione dei bracci di studio è descritta qui:

• Risponditori immunitari PWH (n= 35): carica virale non rilevabile per più di 1 anno, CD4 >500/μL, rapporto CD4/CD8 >1 inclusi individui con un nadir CD4 basso storico

• Non-responder immunitari PWH (n= 10): carica virale non rilevabile, CD4 <350/μL o rapporto CD4/CD8 <0,75 per più di 1 anno

• PWH Viremici a basso livello (n= 10): viremia a basso livello (<1.000 copie/mL) per più di 1 anno, qualsiasi CD4, qualsiasi rapporto CD4/CD8

• Controllo HIV-negativo (n= 20): abbinati per età e sesso

Con il progredire dell'arruolamento, cercheremo di aumentare il numero dei bracci dei non-responder immunitari PWH e dei bracci viremici di basso livello PWH, come appropriato e fattibile.

Screening I partecipanti saranno valutati per valutare l'interesse a partecipare alla sperimentazione clinica e l'idoneità per lo studio in base ai criteri di inclusione ed esclusione. La ricerca nei database si concentrerà inoltre sull’ottimizzazione della diversità demografica in base a razza/etnia e sesso/genere. Ai partecipanti interessati allo studio e che soddisfano i criteri di inclusione ed esclusione verrà fornito il modulo di consenso da esaminare e verrà data risposta a tutte le domande. La visita di screening avrà luogo entro 90 giorni prima della visita di riferimento.

Durante la visita di screening verranno eseguiti esami del sangue di routine, tra cui ematologia, biochimica, infezioni trasmesse sessualmente e proteina C-reattiva. Oltre alle analisi del sangue di routine, nei partecipanti positivi all'HIV verranno eseguiti i seguenti controlli: conta dei CD4, carica virale, rapporto CD4/CD8. Oltre alle analisi del sangue di routine, nei partecipanti negativi all'HIV verrà eseguito quanto segue: Test HIV.

Campionamento:

Visita i campioni di ricerca sulla data e l'ora

1. Screening* Fino a 90 giorni prima del basale
2. Basale Fino a 24 ore prima del vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml), saliva

1a dose di vaccino COVID-19 (procedura clinica; non parte di questo studio di ricerca) 3 Follow-up 1 10 giorni dopo il 1° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml) 4 Follow-up 2 21 giorni dopo il 1° vaccino 7 provette di sangue ( 62,5 ml) 5 Follow-up 3 28 giorni dopo il 1° vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml), saliva 2a dose di vaccino COVID-19 (procedura clinica; non parte di questo studio di ricerca) 6 Follow-up 4 7 giorni dopo il 2° vaccino 7 provette per sangue (62,5 ml), saliva 7 Follow-up 5 14 giorni dopo il 2° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml) 8 Follow-up 6 28 giorni dopo il 2° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml) 9 Follow-up 7 24 settimane dopo il 1° vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml), saliva 10 Follow-up 8* 48 settimane dopo il 1° vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml)

La figura sopra descrive tutte le visite di studio e i campioni raccolti ad ogni visita. I partecipanti devono fornire una copia della scheda di vaccinazione che confermi di aver ricevuto il vaccino COVID-19. La visita basale (V1) è definita come la raccolta del campione fino a 24 ore prima di ricevere la prima dose del vaccino COVID-19. Tutte le altre visite successive avverranno +/- 3 giorni rispetto a quelli indicati. Va notato che la V3 (visita vaccinale post-prime di 21 giorni) deve avvenire prima di ricevere la seconda dose di vaccino, indipendentemente dal fatto che i partecipanti ricevano il vaccino Moderna o Pfizer-BioNTech.

Nel caso in cui un partecipante non riceva la dose di richiamo alla data prevista, tutti i tempi successivi alla dose di richiamo verranno adeguati in base all'ora della dose di richiamo. Ad esempio, se un partecipante arrivasse a ricevere il booster Moderna 35 giorni dopo l'inizio invece dell'orario previsto di 28 giorni dopo l'inizio per motivi indipendenti dalla sua volontà, i punti temporali V4 e V5 verrebbero adeguati di conseguenza. Concederemo un ritardo per il richiamo in questo studio affinché un partecipante possa rimanere nel protocollo dello studio, poiché si prevede che l'immunità venga comunque ottenuta con un richiamo in un momento ritardato. Inoltre, se la seconda dose viene ritardata di oltre 2 settimane (ad es. Nonostante l'attuale spinta dell'Ontario a ritardare la seconda dose fino a 16 settimane), aggiungeremo una visita prima della seconda dose programmata (fino a 7 giorni prima della seconda dose). Le visite di studio saranno pertanto riviste per le persone con > 2 settimane di ritardo nella seconda dose come segue:

Visita i campioni di ricerca sulla data e l'ora

1. Screening* Fino a 90 giorni prima del basale
2. Basale Fino a 24 ore prima del vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml), saliva

1a dose di vaccino COVID-19 (procedura clinica; non parte di questo studio di ricerca) 3 Follow-up 1 10 giorni dopo il 1° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml) 4 Follow-up 2 21 giorni dopo il 1° vaccino 7 provette di sangue ( 62,5 ml) 5 Follow-up 3 28 giorni dopo il 1° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml), saliva 6 Follow-up 4 7 giorni prima del ritardo del 2° vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml), saliva 2a dose di vaccino COVID-19 (procedura clinica; non parte di questo studio di ricerca) 7 Follow-up 5 7 giorni dopo il 2° vaccino 7 provette per sangue (62,5 ml), saliva 8 Follow-up 6 14 giorni dopo il 2° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml) 9 Follow-up 7 28 giorni dopo il 2° vaccino 7 provette di sangue (62,5 ml) 10 Follow-up 8 24 settimane dopo il 1° vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml), saliva 11 Follow-up 9* 48 settimane dopo il 1° vaccino 13 provette di sangue (113,5 ml)

Dato il frequente numero di prelievi di sangue, i partecipanti saranno comunque invitati a rimanere nello studio se saltano le visite.

È possibile che ad alcuni partecipanti venga offerta una terza dose di richiamo di vaccino secondo le nuove raccomandazioni formulate dalle agenzie vaccinali dell'Ontario e del Canada a causa della potenziale diminuzione del vaccino di 6 mesi o di altra immunosoppressione sottostante (ad esempio, chemioterapia). Se un partecipante riceve una dose di richiamo, verrà invitato a fornire un prelievo di sangue (7 provette di sangue) e saliva entro 7 giorni dal terzo richiamo e poi 1 e 3 mesi dopo. Se queste visite si avvicinano di una settimana agli stessi punti temporali delle visite di follow-up già programmate nella tabella sopra, utilizzeremo quel prelievo di sangue anche come visite di follow-up.

Assegnazione dei numeri di identificazione del partecipante A ciascun partecipante che acconsente verrà assegnato un numero di identificazione del partecipante (PID) univoco, che identifica il partecipante per tutte le procedure relative allo studio. I PID sono una combinazione del numero del sito a quattro cifre più il numero del partecipante a tre cifre che inizia con 001 (ad esempio, 3001-001). Una volta assegnati, i PID non possono essere riutilizzati per nessun motivo.

Valutazioni cliniche:

Visita di screening: i partecipanti saranno valutati per valutare l'interesse nella partecipazione allo studio e l'idoneità per lo studio in base ai criteri di inclusione ed esclusione. Ai partecipanti interessati allo studio e che soddisfano i criteri di inclusione ed esclusione verrà fornito il modulo di consenso da esaminare e verrà data risposta a tutte le domande. Le valutazioni cliniche includeranno un'anamnesi (che sarà condotta dal coordinatore della ricerca attraverso la revisione delle cartelle cliniche con la supervisione del ricercatore principale) e analisi del sangue di routine oltre alla carica virale, alla conta dei CD4, al rapporto CD4/CD8 per i partecipanti positivi all'HIV e al test dell'HIV per Partecipanti HIV-negativi. L'anamnesi farmacologica concomitante e il regime cART saranno documentati ad ogni visita. Verrà valutata anche la documentazione dell'infezione da COVID-19: questa è documentata come avvenuta nei partecipanti che presentavano almeno due dei seguenti sintomi: febbre (temperatura ≥ 38°C), brividi, mialgia, mal di testa, mal di gola o nuovi disturbi dell'olfatto o del gusto , o come verificatosi in coloro che avevano almeno un segno o sintomo respiratorio (inclusi tosse, mancanza di respiro o evidenza clinica o radiografica di polmonite) e almeno un tampone nasofaringeo, tampone nasale o campione di saliva (o campione respiratorio, se il partecipante era ricoverato in ospedale) che era positivo per SARS-CoV-2 mediante il test della reazione a catena della polimerasi con trascrittasi inversa (RT-PCR). Dati demografici: le informazioni demografiche (data di nascita, sesso, razza) verranno registrate durante lo screening.

Vaccinazione: ai partecipanti verranno somministrati vaccini COVID-19 secondo le specifiche standard fornite dai produttori di vaccini. La vaccinazione non è una visita di studio di ricerca, ma piuttosto somministrata secondo le linee guida cliniche e di salute pubblica. Il vaccino che con maggiore probabilità verrà somministrato a causa della disponibilità e dei requisiti di conservazione sarà il vaccino Moderna COVID-19, che verrà somministrato il giorno 0 e la settimana 4 (28 giorni dopo). È anche possibile che sia disponibile il vaccino Pfizer-BioNTech COVID-19 che verrà somministrato dal medico di base il giorno 0 e la settimana 3 (21 giorni dopo). Verrà documentata la data della vaccinazione e del prodotto vaccinale (Moderna o Pfizer-BioNTech).

RACCOLTA DEI CAMPIONI:

Poiché si tratta di uno studio osservazionale, verranno raccolti solo campioni e informazioni cliniche.

Linea di base (V2):

Fino a 24 ore prima di ricevere la vaccinazione si otterrà: Conferma del regime cART; Un campione di saliva utilizzando una provetta salivette da consegnare al partecipante e restituire al coordinatore dello studio clinico dopo un minuto; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 provette EDTA e 10 provette ACD (113,5 ml di sangue)

Giorno 10 Post-prime (V3):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 EDTA e 4 ACD (62,5 ml di sangue); Informarsi sulla reattogenicità immediata del vaccino

Giorno 21 Post-prime (V4):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 EDTA e 4 ACD (62,5 ml di sangue)

Giorno 28 Post-prime (V5):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Un campione di saliva utilizzando una provetta salivette da consegnare al partecipante e restituire al coordinatore dello studio clinico dopo un minuto; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 provette EDTA e 10 provette ACD (113,5 ml di sangue)

Giorno 7 Post-richiamo (V6 o V7 se la seconda dose è ritardata):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Campione di saliva; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 EDTA e 4 ACD (62,5 ml di sangue); Informarsi sulla reattogenicità immediata del vaccino

Giorno 14 Post-richiamo (V7 o V8 se seconda dose ritardata):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 EDTA e 4 ACD (62,5 ml di sangue)

Giorno 28 Post-richiamo (V8 o V9 se seconda dose ritardata):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 EDTA e 4 ACD (62,5 ml di sangue)

Settimana 24 Post-prime (V9 o V10 se seconda dose ritardata):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Campione di saliva; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 provette EDTA e 10 provette ACD (113,5 ml di sangue)

Settimana 48 Post-prime (V10 o V11 se seconda dose ritardata):

Valutazione di farmaci concomitanti nuovi o continuativi, incluso il regime cART; Valutazione se si è sviluppata infezione da COVID-19; Venipuntura di 1 provetta SST, 2 provette EDTA e 10 provette ACD (113,5 ml di sangue)

Se la seconda dose viene ritardata di oltre 2 settimane, verrà programmata un'ulteriore visita di studio immediatamente (fino a 3 giorni) prima della seconda dose. Questa visita sarà la visita n. 6 dove un totale di 1 provetta SST, 2 EDTA e 10 provette ACD (113,5 ml sangue) verranno raccolti oltre al campione di saliva. Tutte le visite successive verranno modificate di conseguenza, per cui la V6 originale diventerà V7, V7->V8 e così via, terminando con V10->V11.

Progetti di ricerca:

La saliva e un sottoinsieme di campioni di sangue andranno all'Università di Toronto. I campioni destinati all'Università di Toronto e agli ospedali affiliati verranno elaborati centralmente nel laboratorio Ostrowski presso l'edificio delle scienze mediche, Università di Toronto e conservati nel laboratorio Ostrowski. I campioni per l'NIH verranno spediti direttamente dalla Maple Leaf Medical Clinic al laboratorio Chun dell'NIH, Bethesda, MD, USA. I test sulla saliva verranno eseguiti dal laboratorio Gommerman dell'Università di Toronto. I test sierologici verranno eseguiti dal laboratorio Gingras del Mount Sinai Hospital, affiliato all’Università di Toronto. I test di neutralizzazione e le risposte immunitarie delle cellule T al COVID-19 verranno eseguiti presso il laboratorio Ostrowski. Il test IPDA sarà effettuato presso il laboratorio Ostrowski in collaborazione con Brad Jones (Cornell University). I campioni inviati al NIH verranno conservati nel laboratorio di Chun e il laboratorio di Chun eseguirà analisi del serbatoio virale e analisi di attivazione immunitaria. Il laboratorio Moir eseguirà studi immunitari sulle cellule B. Tutti i laboratori hanno una vasta esperienza nella gestione dei campioni umani dalla lavorazione alla conservazione. Tutti i campioni che lasciano la Maple Leaf Clinic vengono anonimizzati.

I seguenti saggi verranno eseguiti nei seguenti laboratori:

Gruppo del Dott. Mario Ostrowski:

Il laboratorio Ostrowski ha sviluppato competenze nello sviluppo di un test interno di microneutralizzazione del virus SARS-CoV-2 vivo. Inoltre, il suo laboratorio ha fornito studi preclinici sullo sviluppo di un vaccino canadese mRNA contro il COVID-19 in collaborazione con Providence Therapeutics in Canada27. Il laboratorio esegue regolarmente test di neutralizzazione della SARS-CoV-2 per un certo numero di ricercatori. Il laboratorio ha inoltre caratterizzato le risposte immunitarie delle cellule T nell’infezione da COVID-19 e utilizzerà i test ELISPOT delle cellule T per determinare le risposte immunitarie delle cellule T agli antigeni del vaccino28. Il laboratorio è principalmente un laboratorio per l'HIV e, in collaborazione con il dottor R. Brad Jones della Cornell University, eseguirà i test sul DNA provirale intatto. Il laboratorio di Jones ha una vasta esperienza nella progettazione di un test interno di cui condividerà il protocollo presso l'Università di Toronto, per accelerare l'analisi dei dati. Entrambi hanno pubblicato su questo test29. I seguenti test verranno eseguiti in W0, W24, W48: titolo di neutralizzazione di SARS-CoV-2 (test di microneutralizzazione di riduzione della placca); ELISPOT delle cellule T per SARS-CoV-2 IPDA (test del DNA provirale intatto).

Gruppo del dottor Tae-Wook Chun:

Il programma del Dr. Chun si concentra su 1) delineare il ruolo dei serbatoi virali nella patogenesi della malattia da HIV; 2) esaminare i fattori virali e dell'ospite che contribuiscono al mantenimento dei serbatoi dell'HIV; e 3) sviluppare strategie terapeutiche volte a raggiungere un controllo virologico duraturo negli individui infetti in assenza di terapia antiretrovirale. Il laboratorio del Dr. Chun condurrà analisi multiple sui serbatoi virali dell'HIV, un'ampia fenotipizzazione immunitaria delle cellule T e la profilazione di biomarcatori solubili.

Gruppo della Dott.ssa Susan Moir:

L'obiettivo principale del programma di ricerca del Dr. Moir è studiare il ruolo delle cellule B nella patogenesi della malattia da HIV, con l'obiettivo finale di colmare le lacune nella conoscenza relativa all'immunità umorale contro il virus. Questa conoscenza è fondamentale per lo sviluppo di un vaccino efficace basato su anticorpi e per il progresso degli interventi immunoterapeutici nei soggetti infetti da HIV. Il Dr. Moir si concentrerà principalmente sulla fenotipizzazione longitudinale delle cellule B/plasmablasti e sulle risposte antigene-specifiche e sulla fenotipizzazione delle cellule B/memoria e sulle risposte antigene-specifiche.

Gruppo della Dott.ssa Jennifer Gommerman:

Il dottor Gommerman guida un team COVID-19 che sta esaminando le risposte della mucosa salivare alla SARS-CoV-2, e in particolare la risposta IgA, ritenuta cruciale per proteggere dall’infezione e dal trasporto del virus. Il suo team utilizzerà campioni di saliva raccolti per testare la risposta IgA a SARS-CoV-2 S e RBD. Il suo laboratorio ha sviluppato internamente test sensibili e specifici per determinare l’immunità della mucosa al virus SARS-CoV-230. Non è noto se gli attuali vaccini COVID-19 inducano un’immunità a livello della mucosa. I seguenti test verranno eseguiti alle settimane 0, 5, 24: IgA salivari contro SARS-CoV-2 S, RBD e NP.

Gruppo della Dott.ssa Anne-Claude Gingras:

La Dott.ssa Anne-Claude Gingras è un'esperta in studi sull'interazione proteica e ad alto rendimento e il suo gruppo ha sviluppato test ELISA per il test SARS-CoV-2, il dominio di legame del recettore (RBD) e le proteine ​​nucleocapside (IgG, IgA, IgM) su una piattaforma robotica che può essere ampliato per testare migliaia di campioni al giorno. Ha anche sviluppato un test surrogato basato su ELISA in grado di prevedere la capacità di neutralizzazione del siero nei confronti della SARS-CoV-2 e ha ottimizzato un test di neutralizzazione dei picchi basato su lentivirus30,31. Verranno eseguiti i seguenti test in ogni momento e screening: IgG sierica contro SARS-CoV-2, nucleocapside e dominio RBD. La presenza di questi anticorpi al basale indicherà una precedente SARS-CoV-2 e costituirà un criterio di esclusione. I vaccini COVID inducono solo anticorpi contro la proteina spike della SARS-CoV-2 e i soccorritori dovrebbero sviluppare anticorpi contro la punta e l’RBD, ma non contro il nucleocapside. Gli anticorpi contro il nucleocapside indicherebbero una risposta immunitaria all’infezione piuttosto che al vaccino.

Revisione REB e approvazione - conduzione dello studio Il sito otterrà l'approvazione per il protocollo di studio e il modulo di consenso prima dell'inizio dello studio da parte del REB del Comitato etico della ricerca dell'Università di Toronto. Il REB esaminerà tutta la documentazione appropriata dello studio per salvaguardare i diritti, la sicurezza e il benessere dei partecipanti. Lo studio sarà condotto solo dopo aver ottenuto l’approvazione etica. Una copia del protocollo (comprese le modifiche del protocollo), tutte le versioni dei moduli di consenso informato, altre informazioni che i partecipanti devono compilare come strumenti di sondaggio o questionari e qualsiasi materiale pubblicitario/reclutamento proposto devono essere esaminati e approvati dal REB di ciascun partecipante centro prima dell’attuazione dello studio.