Vakcíny v době duální pandemie: Vakcína COVID-19 u lidí s HIV

Lidé s HIV (PWH) mohou zaznamenat zvýšené riziko onemocnění nebo úmrtnosti souvisejících s COVID-19 při infekci SARS-CoV-21-5 a vakcíny proti COVID-19 budou hrát významnou roli v boji proti pandemii. V současnosti jsou v Ontariu k dispozici dvě mRNA vakcíny (Pfizer-BioNTech, Moderna), obě s dvoudávkovým režimem6,7. Zatímco dosavadní údaje nenaznačují žádné zvláštní obavy o bezpečnost PWH, pouze omezený počet PWH se účastnil zkoušek vakcíny COVID-19 a byli přijati pozdě během dvou nedávných velkých potvrzujících schvalovacích studií. Kromě toho nouzový schvalovací přezkum potvrzujících studií pro jednu z vakcín nezahrnoval PWH do výpočtů bezpečnosti a účinnosti7,8, včetně PWH užívajících antiretrovirovou terapii (ART), kteří vykazují pokračující nízkou virémii, imunosenescenci a/nebo přetrvávající imunitní aktivaci . Přesto se PWH doporučuje, aby se okamžitě nechala očkovat, zatímco sběr dat pokračuje.

Významnou mezerou v našich znalostech – a na základě zkušeností s vakcínami podávanými PWH pro jiné patogeny9 – je, zda vakcíny COVID-19 mohou mít nějaký dopad na probíhající chronický zánět a další imunitní dysregulaci, která může zhoršit výskyt komorbidity nebo ovlivnit dynamiku rezervoár viru lidské imunodeficience (HIV). Pochopení toho, jak vakcíny COVID-19 ovlivňují imunitní aktivaci a rezervoáry HIV v PWH, je proto nanejvýš důležité a může mít důsledky pro 38 milionů PWH na celém světě. Kromě toho předčasná imunosenescence dříve hlášená u PWH spojená s heterogenitou imunitní rekonstituce po zahájení ART naznačuje, že bude zásadní určit, zda vakcíny COVID-19 mohou vyvolat ochranné a robustní imunitní reakce jak v krátkodobém, tak v dlouhodobém horizontu. zejména ve specifických podskupinách se sníženou imunokompetencí. Objasnění účinku vakcín COVID-19 na imunitní aktivaci a rezervoár HIV, stejně jako účinnost vakcíny u PWH, jsou kritické, ale je nepravděpodobné, že by je vyhodnotili sponzoři vakcín.

Očekáváme, že naše studovaná populace nebude zahrnuta do časného prioritního podávání vakcín COVID-19 v Ontariu. Naší cílovou populací jsou PWH ve věku nad 55 let, často s komorbiditami, kterým bude pravděpodobně nabídnuto očkování v nejvhodnějším okně a vhodném časovém rámci pro tento řízený výzkum.

Riziko COVID-19 u lidí s HIV (PWH)

Přestože údaje o riziku COVID-19 u lidí s HIV (PWH) jsou omezené, objevující se důkazy naznačují, že PWH může mít zvýšené riziko onemocnění souvisejících s COVID-19 nebo úmrtnost po infekci SARS-CoV-2. Například prospektivní observační studie ze Spojeného království ukázala, že po úpravě na několik proměnných, včetně pohlaví, etnického původu, věku a vybraných komorbidit, zůstal HIV pozitivní stav významně spojen se zvýšeným rizikem úmrtnosti ve 28. dni u jedinců hospitalizovaných pro COVID- 195. Další studie ze Spojeného království také ukázala, že PWH má zvýšené riziko úmrtnosti na COVID-19 po přizpůsobení věku, pohlaví, deprivaci, etnické příslušnosti, kouření a obezitě (upravený poměr rizik 2,59; 95% CI 1,74–3,84)3. Podobně populační kohortová studie z Jižní Afriky také prokázala, že HIV je spojen s úmrtností na COVID-19 s upraveným poměrem rizik 2,14 (95% CI 1,70-2,70)10. Je však důležité poznamenat, že v těchto studiích nebylo zahrnuto několik potenciálních matoucích faktorů, jako je povolání a náhradní markery kontroly HIV11.

Mezitím jiné studie naznačují, že HIV může hrát ve výsledcích COVID-19 jemnější roli. Zatímco například studie z New Yorku ukázala, že vyšší podíl PWH zažil hospitalizaci, přijetí na jednotku intenzivní péče (JIP) a/nebo úmrtí v důsledku COVID-19 ve srovnání s HIV-negativními jedinci, autoři poznamenali, že většina PWH, kteří špatné výsledky související s COVID-19 měly nižší (< 500 buněk/ul) počet CD412. Podobně mezinárodní studie zjistila, že nižší (< 200 buněk/mm3) počet CD4 je spojen s vážnými následky, jak jsou definovány přijetím na JIP, mechanickou ventilací nebo úmrtím13. Další multicentrická kohortová studie zahrnující tři evropské země provedla vícerozměrnou analýzu, která ukázala, že jediným faktorem spojeným se závažným onemocněním COVID-19 je současný počet CD4 nižší než 350 buněk/ul (aOR 2,85; 95% CI 1,26–6,44). as úmrtností, nízký nejnižší počet CD4 T buněk4. Stručně řečeno, imunodeficience může být možným rizikovým faktorem pro závažnost onemocnění COVID-19 u PWH v kontextu virové suprese. Prevence infekce SARS-CoV-2 a/nebo závažného onemocnění COVID-19 zprostředkovaná vakcínou je u této zranitelné populace zásadní.

Vakcíny proti COVID-19 budou hrát významnou roli v boji proti pandemii. V současnosti jsou v Ontariu k dispozici dvě mRNA vakcíny (Pfizer-BioNTech, Moderna), obě s dvoudávkovým režimem.

Současné doporučení Národního poradního výboru pro imunizaci (NACI) uvádí, že „dosud nebyly zaznamenány žádné znepokojivé bezpečnostní signály u neimunosupresivních účastníků s imunokompromitujícím stavem (např. stabilní infekce HIV), kteří byli zařazeni do klinických studií“ a že „lidé žijící s HIV, kteří jsou považováni za imunokompetentní, mohou být očkováni“15. Počet PWH přijatých v těchto studiích je však k dnešnímu dni velmi malý. Existuje také určitá domněnka, že vyšší věk as ním spojená imunosenescence mohou mít důležité důsledky, jak dokazují výsledky pokusů se sníženou účinností vakcíny s širokým intervalem spolehlivosti u starších účastníků (ve věku 65+). Vzhledem k tomu, že starší PWH jsou často charakterizováni jako náchylní k urychleným nebo zvýrazněným známkám stárnutí a imunosenescence, tato zjištění podtrhují potřebu jasněji vyhodnotit účinky vakcíny v této skupině. Jinak je účinnost vakcíny v konkrétních podskupinách PWH včetně těch s probíhající nízkou úrovní virémie, imunosenescencí a/nebo přetrvávající imunitní aktivací z velké části neznámá.

Imunogenicita V současné době se předpokládá, že vakcíny, které mohou vyvolat robustní a dlouhotrvající reakce T buněk a B buněk, jsou imunitními koreláty ochrany u očkovaných jedinců16. Jak vakcíny Pfizer-BioNTech, tak vakcíny Moderna popsaly imunogenicitu ve svých dřívějších studiích.

Údaje o imunogenicitě a potenciálních korelátech ochrany jsou v současné době omezené a chybí u PWH, zejména v podskupinách se suboptimální obnovou imunity. Vzhledem k mezerám v analýze schvalování vakcín pro PWH je důležité stanovit profily imunogenicity u PWH dostávajících vakcíny.

Přetrvávající imunitní aktivace u PWH

Navzdory neuvěřitelným pokrokům v účinnosti ART je virová suprese pomocí ART často nedostatečná k úplnému utlumení zvýšené imunitní aktivace přítomné u PWH. Důležité je, že přetrvávající imunitní aktivace a/nebo zánět se ukázaly jako nezávislé prediktory morbidity a mortality u PWH léčených ART. Mezi klíčové markery imunitní aktivace a zánětu v souvislosti s infekcí HIV patří plazmatické hladiny IL-6 a C-reaktivního proteinu (CRP), stejně jako koagulační marker D-dimer a marker aktivace rozpustných monocytů sCD1420-22. Dalším široce používaným markerem zánětu je aktivace T buněk, jak je definována expresí CD38 a HLA-DR23.

Imunitní aktivace má evidentně negativní dopad na morbiditu a mortalitu PWH, ale je také spojována s rezervoárem HIV24. Důsledky vakcín proti COVID-19 na imunitní aktivaci a následně na rezervoár HIV PWH ošetřeného ART zůstávají nejasné. Vzhledem k nedostatku důkazů o vakcínách proti COVID-19 lze naše současné chápání jejich potenciálního dopadu na PWH pouze extrapolovat z předchozích studií o vakcínách jiných než COVID-19.

Vakcíny jiné než COVID-19 a jejich vliv na PWH

Existuje několik vakcín jiných než COVID-19, které se doporučují pro dospělé PWH v Kanadě, včetně vakcín proti chřipce, tetanu/záškrtu/černému kašli, pneumonii/pneumokokovým onemocněním, meningokokovým onemocněním, hepatitidě B a lidskému papilomaviru. Je pozoruhodné, že některé z těchto vakcín již dříve prokázaly, že přechodně indukují imunitní aktivaci a/nebo ovlivňují zásobník HIV. Například studie zahrnující podávání vakcíny proti chřipce v PWH na ART s potlačenou virovou zátěží ukázala, že v týdnu po očkování může dojít k transkripci RNA HIV9. Autoři také zaznamenali zvýšenou imunitní aktivaci (definovanou expresí CD38 a HLA-DR) během čtyř týdnů po vakcinaci. Podobně další studie zkoumající účinek pneumokokové vakcíny na PWH léčenou ART s potlačenou virovou zátěží pozorovala přechodné zvýšení plazmatických hladin HIV RNA po vakcinaci, které se vrátily na nedetekovatelné hladiny během čtyř týdnů25. Kromě toho předchozí práce některých spoluřešitelů této současné grantové žádosti také prokázala, že vakcína proti chřipce může neúměrně zvýšit provirovou zátěž HIV v CD4+ T buňkách specifických pro chřipku u PWH ošetřených ART s potlačenou virovou zátěží, což naznačuje schopnost vakcinace ovlivnit zásobník HIV26.

Významnou mezerou v našich znalostech je, zda vakcíny COVID-19, zejména s jejich novou platformou založenou na mRNA, mohou mít nějaký dopad na probíhající chronický zánět a další imunitní dysregulaci, která může zhoršit výskyt komorbidity nebo ovlivnit dynamiku rezervoáru HIV v PWH.

Významnou mezerou v našich znalostech je, zda vakcíny COVID-19 mohou vyvolat ochranné a robustní imunitní reakce v krátkodobém i dlouhodobém horizontu, zejména ve specifických podskupinách s dobře popsanou, sníženou imunokompetencí. Toto je kritický problém, který je třeba řešit, protože agentury včetně NACI vyjádřily obavy ohledně účinnosti v souvislosti s imunodeficiencí. Současné doporučení NACI uvádí, že „v současné době neexistují žádné údaje o očkování proti COVID-19 u jedinců, kteří jsou imunosuprimovaní“, a že „[r]elativní stupeň imunodeficience u jedinců, kteří jsou imunokompromitováni, se liší v závislosti na základním stavu, progrese nemocí a užívání léků, které potlačují imunitní funkce... rovnováha přínosů a rizik musí být stanovena případ od případu“. Kromě toho existuje návrh, že imunosenescence a vyšší věk mohou mít důležité důsledky, o čemž svědčí snížená účinnost s širokým intervalem spolehlivosti u obou vakcín u účastníků starších 65 let. Další významnou mezerou v našich znalostech je, že nevíme, zda vakcíny COVID-19 mohou mít nějaký dopad na probíhající chronický zánět a další imunitní dysregulaci, která může zhoršit výskyt komorbidity nebo ovlivnit dynamiku rezervoáru HIV. Důležité je, že ani jedna z těchto mezer ve znalostech pravděpodobně nebude hodnocena sponzory vakcín.

CÍLE STUDIE Vyhodnotit účinek vakcín COVID-19 na vytvoření specifické imunitní odpovědi SARS-CoV-2, indukci systémové imunitní aktivace a ovlivnění rezervoárů viru HIV v PWH.

hypotézy:

Primární: PWH bude vykazovat sníženou imunitní odpověď na vakcíny COVID-19, pokud jde o robustnost a trvanlivost imunitní odpovědi.

Sekundární: Vakcíny COVID-19 nepříznivě ovlivní aktivaci imunity a rezervoáry HIV v PWH.

STATISTICKÁ ANALÝZA Základní charakteristiky budou zkoumány za účelem posouzení srovnatelnosti účastníků ve větvích studie. Spojité proměnné, jako je věk a počet CD4+ T buněk, budou popsány z hlediska mediánů a interkvartilních rozsahů. Kategoriální proměnné jako pohlaví a rasa budou popsány s proporcemi.

Analýzy mezi HIV pozitivními a HIV negativními skupinami budou používat 2-vzorkový Studentův t-test nebo Wilcoxonův test, pokud dojde k odchylce od normálu. Dvoustranné 95% intervaly spolehlivosti budou získány provedením logaritmických transformací titrů s výpočtem 95% intervalu spolehlivosti s odkazem na Studentovo t-rozdělení a poté umocněním limitů intervalů spolehlivosti. Budou provedeny pokusy hledat trendy mezi výše uvedenými podskupinami HIV.

• léky během posledních 6 měsíců (topické steroidy jsou povoleny)
• Pro HIV-negativní účastníky: stavy ohrožující imunitu nebo léky, které potlačují imunitní odpověď

NÁVRH STUDIE Toto je prospektivní, nerandomizovaná observační studie, která zkoumá imunogenicitu vakcíny SARS-CoV-2, imunitní aktivaci a rezervoáry HIV u lidí s infekcí HIV ve srovnání s HIV-negativními jedinci ve věku 55 a více let.

Vzhledem k tomu, že Kanada v současné době zavádí vakcíny proti COVID-19, dvě nejvíce hrozící vakcíny jsou vakcíny mRNA. Jedná se o vakcínu Pfizer-BioNtech COVID-19 podanou s odstupem 3 týdnů a vakcínu Moderna COVID-19 podanou s odstupem 4 týdnů. Vzhledem k jedinečným požadavkům na skladování těchto vakcín se očekává, že vakcína Moderna bude používána především na klinikách primární péče, jako je Maple Leaf Medical Clinic, Toronto. Protokol však také umožní pozorovací studii jedinců, kterým je podávána vakcína Pfizer-BioNTech, pokud je také dostupná. Předpokládáme všeobecnou dostupnost obou vakcín pro populaci primární péče do 1. března 2021. Očkování bude probíhat v souladu s klinickými pokyny a pokyny pro veřejné zdraví. Vakcíny COVID-19 nebudou v rámci této výzkumné studie podávány.

Délka studie: Jedná se o longitudinální studii na jednom místě, kde je celkem 75 účastníků sledováno po dobu 48 týdnů s odběry krve a odběrem slin. Hodnocení se provedou při screeningu, základní linii a v 8 dalších časových bodech během studie. Podrobnosti o screeningu a následných návštěvách jsou uvedeny v části 4.4 Odběr vzorků.

Náborový plán

Do studie bude přijato celkem 75 účastníků. Koordinátor klinického výzkumu provede kontrolu diagramu pod dohledem hlavního zkoušejícího, aby kontaktoval potenciální účastníky studie, kteří splňují kritéria způsobilosti. Rozdělení studijních ramen je popsáno zde:

• PWH Imunitní respondéři (n= 35): nedetekovatelná virová nálož po dobu 1 roku a více, CD4 >500/ul, poměr CD4/CD8 >1 včetně jedinců s historicky nízkou nejnižší hodnotou CD4

• PWH Imunitní non-responders (n= 10): nedetekovatelná virová zátěž, CD4 <350/ul nebo poměr CD4/CD8 <0,75 po dobu 1 roku a více

• PWH Nízkoúrovňová viremie (n= 10): Nízkoúrovňová virémie (<1 000 kopií/ml) po dobu 1 roku a více, jakýkoli CD4, jakýkoli poměr CD4/CD8

• HIV-negativní kontrola (n= 20): věk a pohlaví se shodují

Jak bude registrace pokračovat, pokusíme se zvýšit počet v ramenech PWH Immune non-responders a PWH low-level viremics, jak to bude vhodné a proveditelné.

Screening Účastníci budou posouzeni, aby se posoudil zájem o účast v klinickém hodnocení a vhodnost pro studii na základě kritérií pro zařazení a vyloučení. Vyhledávání v databázi se také zaměří na optimalizaci demografické diverzity na základě rasy/etnické příslušnosti a pohlaví/genderu. Účastníci, kteří mají o studii zájem a kteří splňují kritéria pro zařazení a vyloučení, obdrží formulář souhlasu k přezkoumání a budou zodpovězeny případné dotazy. Screeningová návštěva se uskuteční do 90 dnů před základní návštěvou.

Na screeningové návštěvě budou provedeny rutinní krevní testy včetně hematologie, biochemie, sexuálně přenosných infekcí a C-reaktivního proteinu. Kromě rutinních krevních testů budou u HIV pozitivních účastníků prováděny následující: počet CD4, virová nálož, poměr CD4/CD8. Kromě rutinního odběru krve bude u HIV negativních účastníků prováděno: HIV test.

Vzorkování:

Navštivte Čas Datum Výzkum Vzorky

1. Screening* Až 90 dní před výchozí hodnotou
2. Výchozí stav Až 24 hodin před vakcínou 13 krevních zkumavek (113,5 ml), sliny

1. dávka vakcíny COVID-19 (klinický postup; není součástí této výzkumné studie) 3 Sledování 1 10 dní po 1. vakcíně 7 krevních zkumavek (62,5 ml) 4 Sledování 2 21 dní po 1. vakcíně 7 krevních zkumavek ( 62,5 ml) 5 Sledování 3 28 dní po první vakcíně 13 krevních zkumavek (113,5 ml), sliny 2. dávka vakcíny COVID-19 (klinický postup; není součástí této výzkumné studie) 6 Sledování 4 7 dní po 2. vakcíně 7 zkumavek s krví (62,5 ml), sliny 7 Sledování 5 14 dní po 2. vakcíně 7 krevní zkumavky (62,5 ml) 8 sledování 6 28 dní po 2. vakcíně 7 krevních zkumavek (62,5 ml) 9 Sledování 7 24 týdnů po první vakcíně 13 krevních zkumavek (113,5 ml), sliny 10 Kontrola 8* 48 týdnů po 1. vakcíně 13 krevních zkumavek (113,5 ml)

Výše uvedený obrázek popisuje všechny studijní návštěvy a vzorky odebrané při každé návštěvě. Účastníci musí poskytnout kopii očkovacího průkazu potvrzujícího, že dostali vakcínu COVID-19. Základní návštěva (V1) je definována jako odběr vzorků do 24 hodin před podáním první dávky vakcíny COVID-19. Všechny další následné návštěvy se uskuteční +/- 3 dny uvedených dnů. Je třeba poznamenat, že V3 (návštěva 21 dní po primární vakcíně) musí proběhnout před podáním 2. dávky vakcíny, bez ohledu na to, zda účastníci dostanou vakcínu Moderna nebo Pfizer-BioNTech.

V případě, že účastník nedostane přeočkování v plánovaném termínu, všechny časové body po přeočkování budou upraveny podle času přeočkování. Pokud si například účastník přišel pro svůj booster Moderna 35 dní po premiérě namísto plánovaného času 28 dní po premiérě z důvodů, které nemůže ovlivnit, časové body V4 a V5 by byly odpovídajícím způsobem upraveny. V této studii povolíme odklad, aby účastník zůstal v protokolu studie, protože se očekává, že imunita by měla být stále získána posilovací dávkou v opožděném časovém bodě. Navíc, pokud je druhá dávka opožděna o více než 2 týdny (tj. Současný tlak Ontaria na odložení druhé dávky až o 16 týdnů), přidáme jednu návštěvu před plánovanou druhou dávkou (až 7 dní před druhou dávkou). Studijní návštěvy budou proto revidovány pro osoby s > 2 týdny opožděné druhé dávky takto:

Navštivte Čas Datum Výzkum Vzorky

1. Screening* Až 90 dní před výchozí hodnotou
2. Výchozí stav Až 24 hodin před vakcínou 13 krevních zkumavek (113,5 ml), sliny

1. dávka vakcíny COVID-19 (klinický postup; není součástí této výzkumné studie) 3 Sledování 1 10 dní po 1. vakcíně 7 krevních zkumavek (62,5 ml) 4 Sledování 2 21 dní po 1. vakcíně 7 krevních zkumavek ( 62,5 ml) 5 Sledování 3 28 dní po 1. vakcíně 7 zkumavek s krví (62,5 ml), sliny 6 Kontrola 4 7 dní před odloženou 2. vakcínou 13 krevních zkumavek (113,5 ml), sliny 2. dávka vakcíny COVID-19 (klinický postup; není součástí této výzkumné studie) 7 Sledování 5 7 dní po 2. vakcíně 7 zkumavek s krví (62,5 ml), sliny 8 Sledování 6 14 dní po 2. vakcíně 7 krevní zkumavky (62,5 ml) 9 Sledování 7 28 dní po 2. vakcíně 7 krevních zkumavek (62,5 ml) 10 sledování 8 24 týdnů po první vakcíně 13 krevních zkumavek (113,5 ml), sliny 11 Kontrola 9* 48 týdnů po 1. vakcíně 13 krevních zkumavek (113,5 ml)

Vzhledem k častému počtu odběrů krve budou účastníci stále vyzváni, aby zůstali ve studii, pokud zmeškají návštěvy.

Je možné, že některým účastníkům může být nabídnuta třetí posilovací dávka vakcíny podle nových doporučení vydaných Ontariem a kanadskými očkovacími agenturami kvůli potenciálnímu oslabení vakcíny o 6 měsíců nebo jiné základní imunosupresi (např. chemoterapie). Pokud účastník dostane posilovací dávku, bude vyzván k odběru krve (7 krevních zkumavek) a slin do 7 dnů po 3. přeočkování a poté 1 a 3 měsíce poté. Pokud se tyto návštěvy časově blíží stejným časovým bodům již naplánovaných následných návštěv ve výše uvedené tabulce o jeden týden, pak tento odběr krve použijeme také jako následné návštěvy.

Přidělení identifikačních čísel účastníků Každému účastníkovi, který souhlasí, bude přiděleno jedinečné identifikační číslo účastníka (PID), které identifikuje účastníka pro všechny postupy související se studií. PID jsou kombinací čtyřmístného čísla webu a 3místného čísla účastníka začínajícího 001 (např. 3001-001). Jakmile jsou PID přiřazeny, nelze je z žádného důvodu znovu použít.

Klinická hodnocení:

Screeningová návštěva: Účastníci budou posouzeni, aby se posoudil zájem o účast ve studii a vhodnost pro studii na základě kritérií pro zařazení a vyloučení. Účastníci, kteří mají o studii zájem a kteří splňují kritéria pro zařazení a vyloučení, obdrží formulář souhlasu k přezkoumání a budou zodpovězeny případné dotazy. Klinická hodnocení budou kromě virové nálože, počtu CD4, poměru CD4/CD8 u HIV pozitivních účastníků a testu na HIV zahrnovat lékařskou anamnézu (provede koordinátor výzkumu prostřednictvím kontroly grafu pod dohledem hlavního zkoušejícího) a rutinní vyšetření krve. HIV negativní účastníci. Při každé návštěvě bude zdokumentována anamnéza souběžné medikace a režim cART. Posouzena bude také dokumentace infekce COVID-19: Je zdokumentováno, že k tomu dochází u účastníků, kteří měli alespoň dva z následujících příznaků: horečka (teplota ≥38C), zimnice, myalgie, bolest hlavy, bolest v krku nebo nová porucha čichu nebo chuti nebo jako vyskytující se u těch, kteří měli alespoň jeden respirační příznak nebo symptom (včetně kašle, dušnosti nebo klinických nebo rentgenových známek pneumonie) a alespoň jeden nosohltanový výtěr, nosní výtěr nebo vzorek slin (nebo vzorek z dýchacích cest, pokud byl účastník hospitalizován), který byl pozitivní na SARS-CoV-2 testem reverzní transkriptázy-polymerázové řetězové reakce (RT-PCR). Demografické údaje: Demografické údaje (datum narození, pohlaví, rasa) budou zaznamenány při Screeningu.

Očkování: Účastníkům budou podávány vakcíny proti COVID-19 podle standardních specifikací poskytnutých výrobci vakcín. Očkování není výzkumná studijní návštěva, ale spíše se provádí podle klinických pokynů a pokynů pro veřejné zdraví. Vakcína, která bude s největší pravděpodobností podána kvůli požadavkům na dostupnost a skladování, bude vakcína Moderna COVID-19, která bude aplikována v den 0 a týden 4 (o 28 dní později). Je také možné, že bude k dispozici vakcína Pfizer-BioNtech COVID-19, kterou bude poskytovat poskytovatel primární péče v den 0 a týden 3 (o 21 dní později). Bude doloženo datum očkování a očkovací přípravek (Moderna nebo Pfizer-BioNTech).

SBÍRKA VZORŮ:

Protože se jedná o observační studii, budou shromažďovány pouze vzorky a klinické informace.

Základní (V2):

Až 24 hodin před očkováním bude získáno následující: Potvrzení režimu cART; Vzorek slin pomocí zkumavky se salivettem, který má být podán účastníkovi a vrácen koordinátorovi klinické studie po jedné minutě; Venepunkce 1 zkumavky SST, 2 zkumavek EDTA a 10 zkumavek ACD (113,5 ml krve)

Den 10 Post-Prime (V3):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; Venipunkce 1 zkumavek SST, 2 EDTA a 4 ACD (62,5 ml krve); Zeptejte se na okamžitou reaktogenitu vakcíny

Den 21 Post-Prime (V4):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; Venepunkce 1 SST, 2 EDTA a 4 ACD zkumavek (62,5 ml krve)

Den 28 Post-Prime (V5):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Vzorek slin pomocí zkumavky se salivettem, který má být podán účastníkovi a vrácen koordinátorovi klinické studie po jedné minutě; Venepunkce 1 zkumavky SST, 2 zkumavek EDTA a 10 zkumavek ACD (113,5 ml krve)

Den 7 po přeočkování (V6 nebo V7, pokud je druhá dávka odložena):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; vzorek slin; Venipunkce 1 zkumavek SST, 2 EDTA a 4 ACD (62,5 ml krve); Zeptejte se na okamžitou reaktogenitu vakcíny

Den 14 po přeočkování (V7 nebo V8, pokud je druhá dávka odložena):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; Venepunkce 1 SST, 2 EDTA a 4 ACD zkumavek (62,5 ml krve)

28. den po přeočkování (V8 nebo V9 v případě opožděné druhé dávky):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; Venepunkce 1 SST, 2 EDTA a 4 ACD zkumavek (62,5 ml krve)

24. týden po primární dávce (V9 nebo V10, pokud je druhá dávka odložena):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; vzorek slin; Venepunkce 1 zkumavky SST, 2 zkumavek EDTA a 10 zkumavek ACD (113,5 ml krve)

48. týden po primární dávce (V10 nebo V11, pokud je druhá dávka opožděna):

Posouzení nových nebo pokračujících souběžných léků, včetně režimu cART; Posouzení, zda došlo k rozvoji infekce COVID-19; Venepunkce 1 zkumavky SST, 2 zkumavek EDTA a 10 zkumavek ACD (113,5 ml krve)

Pokud se druhá dávka zpozdí o více než 2 týdny, bude bezprostředně (až 3 dny) před druhou dávkou naplánována další návštěva studie. Tato návštěva bude návštěvou č. 6, kde bude celkem 1 zkumavka SST, 2 zkumavky EDTA a 10 zkumavek ACD (113,5 ml krev) bude odebrána kromě vzorku slin. Všechny následující návštěvy budou odpovídajícím způsobem upraveny tak, že původní V6 se změní na V7, V7->V8 a tak dále a končí na V10->V11.

Výzkumné projekty:

Sliny a podskupina krevních vzorků poputují na University of Toronto. Vzorky putující na University of Toronto a přidružené nemocnice budou centrálně zpracovány v laboratoři Ostrowski v budově Medical Sciences, University of Toronto a uloženy v laboratoři Ostrowski. Vzorky pro NIH budou přímo odeslány z lékařské kliniky Maple Leaf do laboratoře Chun v NIH, Bethesda, MD, USA. Testy slin bude provádět laboratoř Gommerman na University of Toronto. Sérologické testy bude provádět laboratoř Gingras v nemocnici Mount Sinai Hospital, která je přidružena k University of Toronto. Neutralizační testy a imunitní reakce T buněk na COVID-19 budou prováděny v laboratoři Ostrowski. Test IPDA bude proveden v laboratoři Ostrowski ve spolupráci s Bradem Jonesem (Cornell University). Vzorky odeslané do NIH budou uloženy v laboratoři Chun a laboratoř Chun bude provádět testy virových rezervoárů a testy imunitní aktivace. Laboratoř Moir bude provádět studie imunity B buněk. Všechny laboratoře mají rozsáhlé zkušenosti se správou lidských vzorků od zpracování až po skladování. Všechny vzorky opouštějící kliniku Maple Leaf jsou deidentifikovány.

Následující testy budou provedeny v následujících laboratořích:

Skupina Dr. Maria Ostrowskiho:

Laboratoř Ostrowski vyvinula odborné znalosti ve vývoji interního mikroneutralizačního testu živého viru SARS-CoV-2. Jeho laboratoř navíc poskytla předklinické studie o vývoji kanadské mRNA vakcíny COVID-19 ve spolupráci s Providence Therapeutics v Kanadě27. Laboratoř běžně provádí testy neutralizace SARS-CoV-2 pro řadu vyšetřovatelů. Laboratoř také charakterizovala imunitní reakce T lymfocytů při infekci COVID-19 a bude používat testy T lymfocytů ELISPOT ke stanovení imunitních reakcí T lymfocytů na antigeny vakcíny28. Laboratoř je hlavně laboratoří HIV a ve spolupráci s Dr. R. Bradem Jonesem z Cornell University bude provádět testy intaktní provirální DNA. Jonesova laboratoř má rozsáhlé zkušenosti s navrhováním vlastního testu, jehož protokol bude sdílet v U of Toronto, aby urychlil analýzu dat. Oba publikovali v tomto testu29. Následující testy budou provedeny ve W0, W24, W48: Neutralizační titr na SARS-CoV-2 (test redukce plaku mikroneutralizace); ELISPOT T buněk na SARS-CoV-2 IPDA (test intaktní provirové DNA).

Skupina Dr. Tae-Wooka Chuna:

Program Dr. Chuna se zaměřuje na 1) vymezení role virových rezervoárů v patogenezi onemocnění HIV; 2) zkoumání hostitelských a virových faktorů, které přispívají k udržení rezervoárů HIV; a 3) vývoj terapeutických strategií zaměřených na dosažení trvalé virologické kontroly u infikovaných jedinců v nepřítomnosti antiretrovirové terapie. Laboratoř Dr. Chuna bude provádět několik testů na virové rezervoáry HIV, rozsáhlé imunitní fenotypování T buněk a profilování rozpustných biomarkerů.

Skupina Dr. Susan Moirové:

Primárním cílem výzkumného programu Dr. Moira je studovat roli B buněk v patogenezi onemocnění HIV, s konečným cílem vyplnit mezery ve znalostech týkajících se humorální imunity proti viru. Tyto znalosti jsou zásadní pro vývoj účinné vakcíny na bázi protilátek a pro pokrok v imunoterapeutických intervencích u jedinců infikovaných HIV. Dr. Moir se primárně zaměří na longitudinální fenotypování B-buněk/plazmablastů a antigen-specifické reakce a B-buněčné/paměťové fenotypování a antigen-specifické reakce.

Skupina Dr. Jennifer Gommermanové:

Dr. Gommerman vede tým COVID-19, který zkoumá reakce slinných sliznic na SARS-CoV-2, a zejména odpověď IgA, která je považována za klíčovou pro ochranu před infekcí a přenosem viru. Její tým použije odebrané vzorky slin k testování odpovědi IgA na SARS-CoV-2 S a RBD. Její laboratoř vyvinula vlastní citlivé a specifické testy k určení slizniční imunity vůči viru SARS-CoV-230. Není známo, zda současné vakcíny COVID-19 navozují nějakou imunitu na slizniční úrovni. Následující testy budou provedeny ve W0, 5, 24: Slinné IgA až SARS-CoV-2 S, RBD a NP.

Skupina Dr. Anne-Claude Gingrasové:

Dr. Anne-Claude Gingras je odbornicí na proteinové interakce a vysoce výkonné studie a její skupina vyvinula SARS-CoV-2 spike and Receptor Binding Domain (RBD) a testy ELISA na nukleokapsidový protein (IgG, IgA, IgM) na robotické platformě které lze zvětšit na testování tisíců vzorků denně. Vyvinula také náhradní test založený na ELISA, který dokáže předpovědět neutralizační schopnost séra vůči SARS-CoV-2, a optimalizovala test neutralizace hrotů na bázi lentivirů30,31. Ve všech časových bodech a screeningu budou provedeny následující testy: Sérový IgG na SARS-CoV-2, nukleokapsidu a doménu RBD. Přítomnost těchto protilátek na začátku bude indikovat předchozí SARS-CoV-2 a bude kritériem vyloučení. COVID vakcíny pouze indukují protilátky proti spike proteinu SARS-CoV-2 a respondéři by si měli vyvinout protilátky proti spike a RBD, ale ne proti nukleokapsidu. Protilátky proti nukleokapsidu by spíše naznačovaly imunitní odpověď na infekci než na vakcínu.

Přezkoumání a schválení REB – provedení studie Místo obdrží souhlas pro protokol studie a formulář souhlasu před zahájením studie od Etické rady pro výzkum University of Toronto REB. REB zkontroluje veškerou příslušnou dokumentaci studie, aby byla zajištěna práva, bezpečnost a blaho účastníků. Studie bude provedena až po získání etického souhlasu. Kopie protokolu (včetně dodatků k protokolu), všechny verze formulářů informovaného souhlasu, další informace, které mají účastníci vyplnit, jako jsou nástroje průzkumu nebo dotazníky, a veškeré navrhované reklamní/náborové materiály musí být přezkoumány a schváleny REB každého zúčastněného. centra před provedením zkoušky.