Szczepionki w czasach podwójnej pandemii: szczepionka na Covid-19 u osób zakażonych wirusem HIV

Osoby zakażone wirusem HIV (PWH) mogą być narażone na zwiększone ryzyko chorób związanych z COVID-19 lub śmiertelność w wyniku zakażenia SARS-CoV-21-5, a szczepionki przeciwko Covid-19 będą odgrywać znaczącą rolę w zwalczaniu pandemii. Obecnie w Ontario stosowane są dwie szczepionki mRNA (Pfizer-BioNTech, Moderna), obie w schemacie dwudawkowym6,7. Chociaż dotychczasowe dane nie wskazują na żadne szczególne obawy dotyczące bezpieczeństwa PWH, tylko ograniczona liczba PWH wzięła udział w badaniach szczepionki przeciwko Covid-19 i zostali oni zrekrutowani późno podczas dwóch niedawnych dużych badań potwierdzających zatwierdzenie szczepionki. Ponadto przegląd zatwierdzenia w trybie pilnym badań potwierdzających jedną ze szczepionek nie uwzględnił PWH w obliczeniach bezpieczeństwa i skuteczności7,8, w tym PWH otrzymujących terapię przeciwretrowirusową (ART), u których występuje utrzymująca się wiremia na niskim poziomie, starzenie się układu odpornościowego i/lub trwała aktywacja immunologiczna . Niemniej jednak zachęca się PWH do niezwłocznego zaszczepienia się do czasu kontynuowania gromadzenia danych.

Istotna luka w naszej wiedzy – opartej na doświadczeniach ze szczepionkami podawanymi PWH przeciwko innym patogenom9 – dotyczy tego, czy szczepionki przeciwko Covid-19 mogą mieć jakikolwiek wpływ na trwający przewlekły stan zapalny i inne zaburzenia regulacji układu odpornościowego, które mogą zaostrzyć częstość występowania chorób współistniejących lub wpłynąć na dynamikę choroby. rezerwuar ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV). Dlatego zrozumienie, w jaki sposób szczepionki przeciwko Covid-19 wpływają na aktywację układu odpornościowego i rezerwuar wirusa HIV u PWH, ma ogromne znaczenie i może mieć konsekwencje dla 38 milionów PWH na całym świecie. Co więcej, przedwczesne starzenie się układu odpornościowego zgłaszane wcześniej u PWH w połączeniu z niejednorodnością rekonstrukcji układu odpornościowego po rozpoczęciu ART sugeruje, że kluczowe będzie ustalenie, czy szczepionki przeciwko Covid-19 mogą indukować ochronną i silną odpowiedź immunologiczną zarówno w perspektywie krótkoterminowej, jak i długoterminowej, szczególnie w określonych podgrupach z obniżoną odpornością. Wyjaśnienie wpływu szczepionek przeciwko Covid-19 na aktywację układu odpornościowego i rezerwuar wirusa HIV, a także skuteczność szczepionki u osób z PWH mają kluczowe znaczenie, ale jest mało prawdopodobne, że zostaną ocenione przez sponsorów szczepionek.

Oczekujemy, że nasza populacja badana nie zostanie objęta wczesnym priorytetowym podawaniem szczepionek przeciwko Covid-19 w Ontario. Naszą populacją docelową są osoby w wieku powyżej 55 lat, często cierpiące na choroby współistniejące, którym prawdopodobnie zostanie zaproponowane szczepienie w najbardziej dogodnym terminie i w najdogodniejszych ramach czasowych dla ukierunkowanych badań.

Ryzyko zakażenia Covid-19 u osób zakażonych wirusem HIV (PWH)

Chociaż dane dotyczące ryzyka zakażenia wirusem HIV (PWH) są ograniczone, pojawiające się dowody sugerują, że u osób zakażonych SARS-CoV-2 ryzyko wystąpienia chorób związanych z COVID-19 lub śmiertelności może być zwiększone. Na przykład prospektywne badanie obserwacyjne przeprowadzone w Wielkiej Brytanii wykazało, że po uwzględnieniu kilku zmiennych, w tym płci, pochodzenia etnicznego, wieku i wybranych chorób współistniejących, status zakażenia wirusem HIV pozostaje istotnie powiązany ze zwiększonym ryzykiem zgonu w 28. dniu wśród osób hospitalizowanych z powodu Covid-19. 195. Inne badanie przeprowadzone w Wielkiej Brytanii również wykazało, że osoby PWH doświadczające zwiększonego ryzyka zgonu z powodu Covid-19 po uwzględnieniu wieku, płci, ubóstwa, pochodzenia etnicznego, palenia i otyłości (skorygowany współczynnik ryzyka 2,59; 95% CI 1,74–3,84)3. Podobnie populacyjne badanie kohortowe przeprowadzone w Republice Południowej Afryki również wykazało, że HIV jest powiązany ze śmiertelnością z powodu Covid-19 przy skorygowanym współczynniku ryzyka wynoszącym 2,14 (95% CI 1,70–2,70)10. Należy jednak zauważyć, że w badaniach tych nie uwzględniono kilku potencjalnych czynników zakłócających, takich jak zawód i zastępcze markery kontroli wirusa HIV11.

Tymczasem inne badania sugerują bardziej złożoną rolę, jaką wirus HIV może odgrywać w wynikach leczenia Covid-19. Na przykład, chociaż badanie przeprowadzone w Nowym Jorku wykazało, że większy odsetek PWH był hospitalizowany, przyjęty na oddział intensywnej terapii (OIOM) i/lub zmarł z powodu Covid-19 w porównaniu z osobami zakażonymi wirusem HIV, autorzy zauważyli, że większość PWH, które osoby, które doświadczyły słabych wyników związanych z COVID-19, miały niższą (< 500 komórek/µl) liczbę CD412. Podobnie międzynarodowe badanie wykazało, że niższa (< 200 komórek/mm3) liczba komórek CD4 wiąże się z poważnymi skutkami definiowanymi jako przyjęcie na oddział intensywnej terapii, wentylacja mechaniczna lub śmierć13. W innym wieloośrodkowym badaniu kohortowym obejmującym trzy kraje europejskie przeprowadzono analizę wieloczynnikową, aby wykazać, że jedynym czynnikiem związanym z ciężkim przebiegiem Covid-19 jest aktualna liczba CD4 mniejsza niż 350 komórek/µl (aOR 2,85; 95% CI 1,26–6,44). i ze śmiertelnością, niską nadirową liczbą limfocytów T CD44. Podsumowując, niedobór odporności może być potencjalnym czynnikiem ryzyka ciężkości choroby Covid-19 u osób z PWH w kontekście supresji wirusa. W tej bezbronnej populacji zasadnicze znaczenie ma zapobieganie za pośrednictwem szczepionek zakażeniu SARS-CoV-2 i/lub ciężkiej chorobie wywołanej przez Covid-19.

Szczepionki na Covid-19 odegrają znaczącą rolę w walce z pandemią. Obecnie w Ontario stosowane są dwie szczepionki mRNA (Pfizer-BioNTech, Moderna), obie w schemacie dwudawkowym.

Aktualne zalecenie Krajowego Komitetu Doradczego ds. Szczepień (NACI) stwierdza, że ​​„jak dotąd nie zaobserwowano żadnych niepokojących sygnałów dotyczących bezpieczeństwa u uczestników badań klinicznych bez immunosupresji ze stanem obniżonej odporności (np. stabilnym zakażeniem wirusem HIV)” oraz że „osoby żyjące zakażone wirusem HIV, które uznaje się za immunokompetentne, mogą zostać zaszczepione”15. Jednakże liczba PWH włączonych dotychczas do tych badań jest bardzo mała. Istnieją również sugestie, że starszy wiek i związane z nim immunostarzenie mogą mieć ważne implikacje, o czym świadczą wyniki badań dotyczących zmniejszonej skuteczności szczepionki z szerokim przedziałem ufności u starszych uczestników (w wieku 65+). W zakresie, w jakim starsze PWH są często charakteryzowane jako podatne na przyspieszone lub uwydatnione oznaki starzenia i immunostarzenia, odkrycia te podkreślają potrzebę wyraźniejszej oceny działania szczepionki w tej grupie. Poza tym skuteczność szczepionki w poszczególnych podgrupach PWH, w tym u tych z utrzymującą się wiremią na niskim poziomie, immunosenescencją i/lub trwałą aktywacją immunologiczną, jest w dużej mierze nieznana.

Immunogenność Obecnie uważa się, że szczepionki, które mogą wywołać silną i długotrwałą odpowiedź limfocytów T i B, są immunologicznymi korelatami ochrony u zaszczepionych osób16. Zarówno szczepionki Pfizer-BioNTech, jak i Moderna opisywały immunogenność we wcześniejszych badaniach.

Dane dotyczące immunogenności i potencjalnych korelatów ochrony są obecnie ograniczone i brakuje ich w przypadku PWH, szczególnie w podgrupach z suboptymalną odbudową odporności. Biorąc pod uwagę luki w analizie zatwierdzania szczepionek dla PWH, ważne jest ustalenie profili immunogenności u PWH otrzymujących szczepionki.

Trwała aktywacja immunologiczna w PWH

Pomimo niewiarygodnego postępu w skuteczności ART, supresja wirusa za pomocą ART jest często niewystarczająca, aby całkowicie stłumić podwyższoną aktywację immunologiczną obecną w PWH. Co ważne, utrzymująca się aktywacja immunologiczna i/lub stan zapalny okazały się niezależnymi czynnikami prognostycznymi zachorowalności i śmiertelności w PWH leczonym ART. Kluczowymi markerami aktywacji układu odpornościowego i stanu zapalnego w kontekście zakażenia wirusem HIV są poziomy IL-6 i białka C-reaktywnego (CRP) w osoczu, a także marker krzepnięcia D-dimer i rozpuszczalny marker aktywacji monocytów sCD1420-22. Innym powszechnie stosowanym markerem stanu zapalnego jest aktywacja limfocytów T, zdefiniowana na podstawie ekspresji CD38 i HLA-DR23.

Aktywacja immunologiczna ma ewidentnie negatywny wpływ na zachorowalność i śmiertelność z powodu PWH, ale powiązano ją również z rezerwuarem wirusa HIV24. Wpływ szczepionek przeciwko Covid-19 na aktywację układu odpornościowego, a co za tym idzie, na rezerwuar wirusa HIV u PWH leczonych ART pozostaje niejasny. Biorąc pod uwagę brak dowodów na temat szczepionek przeciwko Covid-19, naszą obecną wiedzę na temat ich potencjalnego wpływu na PWH można ekstrapolować jedynie na podstawie wcześniejszych badań dotyczących szczepionek innych niż COVID-19.

Szczepionki inne niż COVID-19 i ich wpływ na PWH

W Kanadzie istnieje kilka szczepionek innych niż COVID-19 zalecanych dla dorosłych PWH, w tym przeciwko grypie, tężcowi, błonicy, krztuścowi, zapaleniu płuc, chorobom pneumokokowym, chorobie meningokokowej, wirusowemu zapaleniu wątroby typu B i wirusowi brodawczaka ludzkiego. Warto zauważyć, że wcześniej wykazano, że niektóre z tych szczepionek przejściowo indukują aktywację układu odpornościowego i/lub wpływają na rezerwuar wirusa HIV. Na przykład badanie obejmujące podawanie szczepionki przeciw grypie u osób z PWH w ramach terapii ART ze zmniejszoną miano wirusa wykazało, że transkrypcja RNA wirusa HIV może nastąpić w tygodniu po szczepieniu9. Autorzy zauważyli także zwiększoną aktywację immunologiczną (zdefiniowaną na podstawie ekspresji CD38 i HLA-DR) w ciągu czterech tygodni po szczepieniu. Podobnie w innym badaniu oceniającym wpływ szczepionki pneumokokowej na PWH leczonego ART ze stłumionym miano wirusa zaobserwowano przejściowy wzrost poziomu RNA HIV w osoczu po szczepieniu, który powrócił do niewykrywalnego poziomu w ciągu czterech tygodni25. Co więcej, wcześniejsze prace niektórych współautorów niniejszego wniosku o dotację wykazały również, że szczepionka przeciw grypie może nieproporcjonalnie zwiększać obciążenie prowirusem HIV w specyficznych dla grypie limfocytach T CD4+ u PWH leczonych ART ze stłumionym miano wirusa, co sugeruje możliwość szczepienia wpływać na rezerwuar wirusa HIV26.

Istotną luką w naszej wiedzy jest to, czy szczepionki przeciwko Covid-19, szczególnie z nową platformą opartą na mRNA, mogą mieć jakikolwiek wpływ na trwające przewlekłe stany zapalne i inne zaburzenia regulacji układu odpornościowego, które mogą zaostrzyć częstość występowania chorób współistniejących lub wpłynąć na dynamikę rezerwuaru HIV w organizmie. PWH.

Istotną luką w naszej wiedzy jest to, czy szczepionki przeciwko Covid-19 mogą indukować ochronną i silną odpowiedź immunologiczną zarówno w perspektywie krótkoterminowej, jak i długoterminowej, szczególnie w określonych podgrupach z dobrze opisaną, obniżoną odpornością. Jest to kluczowa kwestia, którą należy się zająć, ponieważ agencje, w tym NACI, wyraziły obawy dotyczące skuteczności w kontekście niedoborów odporności. Aktualne zalecenie NACI stwierdza, że ​​„obecnie nie ma danych na temat szczepień przeciwko Covid-19 osobom z obniżoną odpornością” oraz że „względny stopień niedoboru odporności u osób z obniżoną odpornością jest zmienny w zależności od choroby podstawowej, progresja choroby i stosowania leków osłabiających funkcje odpornościowe... należy dokonać bilansu korzyści i ryzyka indywidualnie dla każdego przypadku”. Co więcej, istnieje sugestia, że ​​immunostarzenie się i starszy wiek mogą mieć istotne implikacje, o czym świadczy zmniejszona skuteczność obu szczepionek przy szerokim przedziale ufności u uczestników w wieku powyżej 65 lat. Inną znaczącą luką w naszej wiedzy jest to, że nie wiemy, czy szczepionki przeciwko Covid-19 mogą mieć jakikolwiek wpływ na trwające przewlekłe stany zapalne i inne zaburzenia regulacji układu odpornościowego, które mogą zaostrzać częstość występowania chorób współistniejących lub wpływać na dynamikę rezerwuaru wirusa HIV. Co ważne, sponsorzy szczepionek prawdopodobnie nie będą oceniać żadnej z tych luk w wiedzy.

CELE BADANIA Ocena wpływu szczepionek przeciwko COVID-19 na generowanie specyficznej odpowiedzi immunologicznej SARS-CoV-2, indukowanie ogólnoustrojowej aktywacji układu odpornościowego i oddziaływanie na rezerwuary wirusa HIV w PWH.

Hipotezy:

Pierwotny: PWH będzie wykazywał zmniejszoną odpowiedź immunologiczną na szczepionki przeciwko COVID-19 pod względem siły i trwałości odpowiedzi immunologicznej.

Wtórne: szczepionki przeciwko COVID-19 będą niekorzystnie wpływać na aktywację układu odpornościowego i rezerwuary wirusa HIV u osób z PWH.

ANALIZA STATYSTYCZNA Charakterystyka wyjściowa zostanie zbadana w celu oceny porównywalności uczestników w ramionach badania. Zmienne ciągłe, takie jak wiek i liczba limfocytów T CD4+, zostaną opisane w kategoriach median i zakresów międzykwartylowych. Zmienne kategoryczne, takie jak płeć i rasa, zostaną opisane za pomocą proporcji.

Analizy pomiędzy grupami zakażonymi wirusem HIV i grupami zakażonymi wirusem HIV będą przeprowadzane przy użyciu testu t-Studenta dla 2 próbek lub testu Wilcoxona, jeśli wystąpi odchylenie od normalności. Dwustronne 95% przedziały ufności zostaną otrzymane poprzez wykonanie logarytmicznych przekształceń mian, obliczenie 95% przedziału ufności w odniesieniu do rozkładu t-Studenta, a następnie potęgowanie granic przedziałów ufności. Podjęte zostaną próby poszukiwania trendów pomiędzy wymienionymi powyżej podgrupami HIV.

• leki w ciągu ostatnich 6 miesięcy (dopuszczalne są miejscowe sterydy)
• W przypadku uczestników niezakażonych wirusem HIV: osoby z zaburzeniami odporności lub przyjmujące leki hamujące odpowiedź immunologiczną

PROJEKT BADANIA Jest to prospektywne, nierandomizowane badanie obserwacyjne mające na celu zbadanie immunogenności szczepionki SARS-CoV-2, aktywacji układu odpornościowego i rezerwuarów wirusa HIV u osób zakażonych wirusem HIV w porównaniu z osobami niezakażonymi wirusem HIV, w wieku 55 lat i więcej.

Ponieważ Kanada wprowadza obecnie szczepionki na Covid-19, dwiema najbardziej zbliżającymi się szczepionkami są szczepionki mRNA. Są to szczepionka Pfizer-BioNTech Covid-19 podawana w odstępie 3 tygodni i szczepionka Moderna Covid-19 podawana w odstępie 4 tygodni. Biorąc pod uwagę wyjątkowe wymagania dotyczące przechowywania tych szczepionek, oczekuje się, że szczepionka Moderna będzie stosowana głównie w klinikach podstawowej opieki zdrowotnej, takich jak Maple Leaf Medical Clinic w Toronto. Jednakże protokół umożliwi również badanie obserwacyjne osób, którym podaje się szczepionkę firmy Pfizer-BioNTech, jeśli jest ona również dostępna. Przewidujemy ogólną dostępność obu szczepionek dla populacji podstawowej opieki zdrowotnej do 1 marca 2021 r. Szczepienie odbędzie się zgodnie z wytycznymi klinicznymi i wytycznymi dotyczącymi zdrowia publicznego. W ramach tego badania nie będą podawane szczepionki przeciwko Covid-19.

Czas trwania badania: Jest to badanie podłużne prowadzone w jednym ośrodku, w którym łącznie 75 uczestników obserwowano przez 48 tygodni, pobierając krew i pobierając próbki śliny. Oceny zostaną przeprowadzone podczas badań przesiewowych, na początku badania i w 8 dodatkowych punktach czasowych badania. Szczegóły dotyczące badań przesiewowych i wizyt kontrolnych przedstawiono w części 4.4 Pobieranie próbek.

Plan rekrutacji

Do badania zostanie zatrudnionych łącznie 75 uczestników. Koordynator badań klinicznych przeprowadzi przegląd wykresów pod nadzorem głównego badacza, aby skontaktować się z potencjalnymi uczestnikami badania, którzy spełniają kryteria kwalifikacyjne. Podział ramion badania opisano tutaj:

• PWH Osoby z odpowiedzią immunologiczną (n= 35): niewykrywalne miano wirusa przez ponad 1 rok, CD4 >500/uL, stosunek CD4/CD8 >1, w tym osoby z historycznym, niskim nadirem CD4

• PWH Osoby nieodpowiadające na leczenie (n= 10): niewykrywalne miano wirusa, CD4 <350/uL lub stosunek CD4/CD8 <0,75 przez ponad 1 rok

• PWH Wiremika niskiego poziomu (n= 10): wiremia niskiego poziomu (<1000 kopii/ml) przez ponad rok, dowolny CD4, dowolny stosunek CD4/CD8

• Kontrola ujemna pod względem wirusa HIV (n= 20): wiek i płeć dopasowana

W miarę postępu rekrutacji, w miarę możliwości i możliwości będziemy zwiększać liczbę pacjentów w grupie PWH z nieodpowiadającą odpowiedzią immunologiczną oraz w grupach PWH z niskim poziomem wiremii.

Badanie przesiewowe Uczestnicy zostaną poddani ocenie pod kątem zainteresowania udziałem w badaniu klinicznym i przydatności do badania w oparciu o kryteria włączenia i wykluczenia. Przeszukiwanie baz danych będzie również skupiać się na optymalizacji różnorodności demograficznej w oparciu o rasę/pochodzenie etniczne i płeć/płeć. Uczestnicy, którzy są zainteresowani badaniem i spełniają kryteria włączenia i wyłączenia, otrzymają formularz zgody do wglądu i udzielą odpowiedzi na wszelkie pytania. Wizyta przesiewowa odbędzie się w ciągu 90 dni przed wizytą wyjściową.

Podczas wizyty przesiewowej zostaną wykonane rutynowe badania krwi, obejmujące hematologię, biochemię, zakażenia przenoszone drogą płciową i badanie białka C-reaktywnego. Oprócz rutynowych badań krwi u uczestników zakażonych wirusem HIV zostaną wykonane następujące badania: liczba CD4, miano wirusa, stosunek CD4/CD8. Oprócz rutynowych badań krwi u osób zakażonych wirusem HIV zostaną wykonane następujące badania: Test na obecność wirusa HIV.

Próbowanie:

Odwiedź Godzina Data Próbki badawcze

1. Badanie przesiewowe* Do 90 dni przed wartością wyjściową
2. Wartość wyjściowa Do 24 godzin przed szczepieniem 13 probówek z krwią (113,5 ml), ślina

Pierwsza dawka szczepionki przeciwko COVID-19 (procedura kliniczna; nie jest częścią tego badania) 3 Kontrola 1 10 dni po pierwszej szczepionce 7 probówek z krwią (62,5 ml) 4 Kontrola 2 21 dni po pierwszej szczepionce 7 probówek z krwią ( 62,5 ml) 5 Kontrola 3 28 dni po pierwszej szczepionce 13 probówek z krwią (113,5 ml), ślina 2. dawka szczepionki przeciwko COVID-19 (procedura kliniczna; nie jest częścią tego badania) 6 Kontrola 4 7 dni po 2. szczepionce 7 Probówki z krwią (62,5 ml), ślina 7 Kontrola 5 14 dni po 2. szczepionce 7 probówki z krwią (62,5 ml) 8 Kontrola 6 28 dni po drugiej szczepionce 7 probówki z krwią (62,5 ml) 9 Kontrola 7 24 tygodnie po pierwszej szczepionce 13 probówek z krwią (113,5 ml), ślina 10 Kontrola 8* 48 tygodni po pierwszej szczepionce 13 probówek z krwią (113,5 ml)

Powyższy rysunek opisuje wszystkie wizyty badawcze i próbki pobrane podczas każdej wizyty. Uczestnicy muszą przedstawić kopię karty szczepień potwierdzającą otrzymanie szczepionki przeciwko Covid-19. Wizytę wyjściową (V1) definiuje się jako pobranie próbki do 24 godzin przed otrzymaniem pierwszej dawki szczepionki przeciwko COVID-19. Wszystkie pozostałe kolejne wizyty będą odbywać się +/- 3 dni od wskazanych dni. Należy zaznaczyć, że wizyta V3 (wizyta 21 dni po szczepieniu podstawowym) musi odbyć się przed przyjęciem drugiej dawki szczepionki, niezależnie od tego, czy uczestnicy otrzymają szczepionkę Moderna czy Pfizer-BioNTech.

W przypadku, gdy uczestnik nie otrzyma dawki przypominającej w zaplanowanym terminie, wszystkie punkty czasowe po dawce przypominającej zostaną skorygowane zgodnie z godziną podania dawki przypominającej. Na przykład, jeśli uczestnik przyszedł po dawkę przypominającą Moderna 35 dni po szczepieniu zamiast w zaplanowanym czasie 28 dni po szczepieniu z przyczyn od niego niezależnych, wówczas punkty czasowe V4 i V5 zostaną odpowiednio dostosowane. Dopuścimy opóźnienie podania dawki przypominającej w tym badaniu, aby uczestnik mógł pozostać objęty protokołem badania, ponieważ oczekuje się, że odporność powinna zostać uzyskana po podaniu dawki przypominającej w opóźnionym momencie. Ponadto, jeżeli opóźnienie podania drugiej dawki wynosi więcej niż 2 tygodnie (tj. Obecnie władze Ontario naciskają na opóźnienie drugiej dawki nawet o 16 tygodni), dodamy jedną wizytę przed zaplanowaną drugą dawką (do 7 dni przed drugą dawką). Wizyty studyjne w przypadku osób, u których opóźnienie drugiej dawki trwało > 2 tygodnie, zostaną zatem skorygowane w następujący sposób:

Odwiedź Godzina Data Próbki badawcze

1. Badanie przesiewowe* Do 90 dni przed wartością wyjściową
2. Wartość wyjściowa Do 24 godzin przed szczepieniem 13 probówek z krwią (113,5 ml), ślina

Pierwsza dawka szczepionki przeciwko COVID-19 (procedura kliniczna; nie jest częścią tego badania) 3 Kontrola 1 10 dni po pierwszej szczepionce 7 probówek z krwią (62,5 ml) 4 Kontrola 2 21 dni po pierwszej szczepionce 7 probówek z krwią ( 62,5 ml) 5 Kontrola 3 28 dni po pierwszej szczepionce 7 probówek z krwią (62,5 ml), ślina 6 Kontrola 4 7 dni przed opóźnioną drugą szczepionką 13 probówek z krwią (113,5 ml), ślina 2. dawka szczepionki przeciwko COVID-19 (procedura kliniczna; nie jest częścią tego badania) 7 Kontrola 5 7 dni po 2. szczepionce 7 Probówki z krwią (62,5 ml), ślina 8 Kontrola 6 14 dni po 2. szczepionce 7 probówki z krwią (62,5 ml) 9 Kontrola 7 28 dni po drugiej szczepionce 7 probówki z krwią (62,5 ml) 10 Okres obserwacji 8 24 tygodnie po pierwszej szczepionce 13 probówek z krwią (113,5 ml), ślina 11 Kontrola 9* 48 tygodni po pierwszej szczepionce 13 probówek z krwią (113,5 ml)

Biorąc pod uwagę częstą liczbę pobrań krwi, uczestnicy będą nadal zapraszani do pozostania w badaniu, jeśli opuszczą wizyty.

Możliwe jest, że niektórym uczestnikom zostanie zaproponowana trzecia dawka przypominająca szczepionki zgodnie z nowymi zaleceniami wydanymi przez agencje ds. szczepionek w Ontario i Kanadzie ze względu na potencjalne zaprzestanie stosowania szczepionki o 6 miesięcy lub inną immunosupresję (np. chemioterapię). Jeśli uczestnik otrzyma dawkę przypominającą, zostanie poproszony o pobranie krwi (7 probówek) i śliny w ciągu 7 dni od podania trzeciej dawki przypominającej, a następnie 1 i 3 miesiące później. Jeżeli te wizyty są zbliżone w czasie do tych samych punktów czasowych, co już zaplanowane wizyty kontrolne na powyższym wykresie, o jeden tydzień, wówczas to pobranie krwi wykorzystamy również jako wizyty kontrolne.

Przydzielanie numerów identyfikacyjnych uczestnika Każdemu uczestnikowi, który wyrazi zgodę, zostanie przypisany unikalny numer identyfikacyjny uczestnika (PID), który identyfikuje uczestnika we wszystkich procedurach związanych z badaniem. Identyfikatory PID to kombinacja czterocyfrowego numeru lokalizacji i 3-cyfrowego numeru uczestnika rozpoczynającego się od cyfry 001 (np. 3001-001). Po przypisaniu identyfikatorów PID nie można z żadnego powodu ponownie wykorzystać.

Oceny kliniczne:

Wizyta przesiewowa: Uczestnicy zostaną poddani ocenie pod kątem zainteresowania udziałem w badaniu i jego przydatności do badania w oparciu o kryteria włączenia i wyłączenia. Uczestnicy, którzy są zainteresowani badaniem i spełniają kryteria włączenia i wyłączenia, otrzymają formularz zgody do wglądu i udzielą odpowiedzi na wszelkie pytania. Ocena kliniczna będzie obejmować wywiad lekarski (przeprowadzony przez koordynatora badania poprzez przegląd wykresów pod nadzorem głównego badacza) i rutynowe badania krwi, a także oznaczenie wiremii, liczby CD4, stosunku CD4/CD8 w przypadku uczestników zakażonych wirusem HIV oraz badanie na obecność wirusa HIV u osób zakażonych wirusem HIV. Uczestnicy bez wirusa HIV. Podczas każdej wizyty dokumentowana będzie historia jednoczesnego stosowania leków i schemat cART. Oceniona zostanie również dokumentacja zakażenia COVID-19: udokumentowano, że wystąpiło ono u uczestników, u których wystąpiły co najmniej dwa z następujących objawów: gorączka (temperatura ≥38°C), dreszcze, bóle mięśni, ból głowy, ból gardła lub nowe zaburzenia węchu lub smaku lub występujący u osób, u których wystąpił co najmniej jeden objaw lub objaw ze strony układu oddechowego (w tym kaszel, duszność lub kliniczne lub radiograficzne objawy zapalenia płuc) i co najmniej jeden wymaz z nosogardzieli, wymaz z nosa lub próbka śliny (lub próbka dróg oddechowych, jeśli uczestnik był hospitalizowany), która dała wynik pozytywny na obecność SARS-CoV-2 w teście reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (RT-PCR). Dane demograficzne: Informacje demograficzne (data urodzenia, płeć, rasa) zostaną zarejestrowane podczas Pokazu.

Szczepienia: Uczestnikom zostaną podane szczepionki przeciwko COVID-19 zgodnie ze standardowymi specyfikacjami dostarczonymi przez producentów szczepionek. Szczepienie nie jest wizytą naukową, lecz jest przeprowadzane zgodnie z wytycznymi klinicznymi i dotyczącymi zdrowia publicznego. Szczepionką, którą najprawdopodobniej zostanie podana ze względu na dostępność i wymogi dotyczące przechowywania, będzie szczepionka Moderna przeciwko COVID-19, która zostanie podana w dniu 0 i tygodniu 4 (28 dni później). Możliwe jest również, że dostępna będzie szczepionka Pfizer-BioNTech Covid-19, która będzie podawana przez podmiot świadczący podstawową opiekę zdrowotną w dniu 0 i tygodniu 3 (21 dni później). Data szczepienia i rodzaj szczepionki (Moderna lub Pfizer-BioNTech) zostaną udokumentowane.

KOLEKCJA OBRAZÓW:

Ponieważ jest to badanie obserwacyjne, zebrane zostaną wyłącznie próbki i informacje kliniczne.

Wartość bazowa (wersja 2):

Do 24 godzin przed przyjęciem szczepienia zostaną uzyskane: potwierdzenie schematu cART; Próbkę śliny pobraną za pomocą ślinianki, którą należy przekazać uczestnikowi i zwrócić koordynatorowi badania klinicznego po jednej minucie; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 probówek EDTA i 10 probówek ACD (113,5 ml krwi)

Dzień 10 Po zagruntowaniu (V3):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 EDTA i 4 ACD (62,5 ml krwi); Zapytaj o natychmiastową reaktogenność szczepionki

Dzień 21 Po zagruntowaniu (V4):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 EDTA i 4 ACD (62,5 ml krwi)

Dzień 28. Po zagruntowaniu (V5):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Próbkę śliny pobraną za pomocą ślinianki, którą należy przekazać uczestnikowi i zwrócić koordynatorowi badania klinicznego po jednej minucie; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 probówek EDTA i 10 probówek ACD (113,5 ml krwi)

Dzień 7 Po dawce przypominającej (V6 lub V7 w przypadku opóźnienia drugiej dawki):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Próbka śliny; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 EDTA i 4 ACD (62,5 ml krwi); Zapytaj o natychmiastową reaktogenność szczepionki

Dzień 14 Po dawce przypominającej (V7 lub V8 w przypadku opóźnienia drugiej dawki):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 EDTA i 4 ACD (62,5 ml krwi)

Dzień 28 Po dawce przypominającej (V8 lub V9 w przypadku opóźnienia drugiej dawki):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 EDTA i 4 ACD (62,5 ml krwi)

Tydzień 24. Po podaniu pierwszej dawki (V9 lub V10 w przypadku opóźnienia drugiej dawki):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Próbka śliny; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 probówek EDTA i 10 probówek ACD (113,5 ml krwi)

Tydzień 48. Po podaniu pierwszej dawki (V10 lub V11 w przypadku opóźnienia drugiej dawki):

Ocena nowych lub trwających jednocześnie leków, w tym schematu cART; Ocena, czy rozwinęła się infekcja COVID-19; Nakłucie żyły 1 probówki SST, 2 probówek EDTA i 10 probówek ACD (113,5 ml krwi)

W przypadku opóźnienia w przyjęciu drugiej dawki o więcej niż 2 tygodnie, niezwłocznie (do 3 dni) przed podaniem drugiej dawki wyznaczona zostanie dodatkowa wizyta studyjna. Ta wizyta będzie wizytą nr 6, podczas której w sumie 1 probówka SST, 2 probówki EDTA i 10 probówek ACD (113,5 ml) krew) zostanie pobrana oprócz próbki śliny. Wszystkie kolejne wizyty zostaną odpowiednio dostosowane, w wyniku czego oryginalne V6 stanie się V7, V7->V8 i tak dalej, kończąc na V10->V11.

Projekty badawcze:

Ślina i część próbek krwi trafią na Uniwersytet w Toronto. Próbki wysyłane na Uniwersytet w Toronto i do stowarzyszonych szpitali będą przetwarzane centralnie w laboratorium Ostrowskiego w budynku nauk medycznych Uniwersytetu w Toronto i przechowywane w laboratorium Ostrowskiego. Próbki dla NIH zostaną wysłane bezpośrednio z kliniki medycznej Maple Leaf do laboratorium Chun w NIH w Bethesda w stanie Maryland w USA. Badania śliny zostaną wykonane w laboratorium Gommerman na Uniwersytecie w Toronto. Testy serologiczne zostaną przeprowadzone w laboratorium Gingras w szpitalu Mount Sinai stowarzyszonym z Uniwersytetem w Toronto. Testy neutralizacji i odpowiedzi immunologicznej limfocytów T na Covid-19 będą wykonywane w laboratorium Ostrowskiego. Test IPDA zostanie wykonany w laboratorium Ostrowskiego we współpracy z Bradem Jonesem (Cornell University). Próbki przesłane do NIH będą przechowywane w laboratorium Chun, które przeprowadzi testy rezerwuaru wirusa i testy aktywacji układu odpornościowego. Laboratorium Moir przeprowadzi badania odporności komórek B. Wszystkie laboratoria mają szerokie doświadczenie w zarządzaniu próbkami ludzkimi, od przetwarzania po przechowywanie. Wszystkie próbki opuszczające klinikę Maple Leaf są poddawane deidentyfikacji.

W następujących laboratoriach zostaną wykonane następujące badania:

Grupa dr Mario Ostrowskiego:

Laboratorium Ostrowskiego rozwinęło wiedzę specjalistyczną w zakresie opracowania własnego testu mikroneutralizacji żywego wirusa SARS-CoV-2. Ponadto jego laboratorium przeprowadziło badania przedkliniczne dotyczące opracowania kanadyjskiej szczepionki mRNA przeciwko COVID-19 we współpracy z Providence Therapeutics w Kanadzie27. Laboratorium rutynowo wykonuje testy neutralizacji SARS-CoV-2 dla wielu badaczy. Laboratorium scharakteryzowało również odpowiedź immunologiczną limfocytów T w zakażeniu Covid-19 i wykorzysta testy ELISPOT limfocytów T do określenia odpowiedzi immunologicznej limfocytów T na antygeny szczepionkowe28. Laboratorium to głównie laboratorium zajmujące się HIV i we współpracy z dr R. Bradem Jonesem z Cornell University przeprowadzi testy nienaruszonego prowirusowego DNA. Laboratorium Jonesa ma duże doświadczenie w projektowaniu własnego testu, którego protokół udostępni na Uniwersytecie w Toronto, aby przyspieszyć analizę danych. Obaj opublikowali informacje na temat tego testu29. W T0, T24, T48 zostaną przeprowadzone następujące testy: Miano neutralizacji względem SARS-CoV-2 (test mikroneutralizacji redukcji płytki nazębnej); Komórki T ELISPOT na SARS-CoV-2 IPDA (test nienaruszonego prowirusowego DNA).

Grupa doktora Tae-Wooka Chuna:

Program dr Chuna koncentruje się na 1) określeniu roli rezerwuarów wirusa w patogenezie choroby HIV; 2) badanie czynników gospodarza i wirusa, które przyczyniają się do utrzymywania rezerwuarów wirusa HIV; oraz 3) opracowanie strategii terapeutycznych mających na celu osiągnięcie trwałej kontroli wirusologicznej u zakażonych osób w przypadku braku terapii przeciwretrowirusowej. Laboratorium dr Chuna przeprowadzi wiele testów rezerwuarowych wirusa HIV, szeroko zakrojone fenotypowanie immunologiczne limfocytów T i profilowanie rozpuszczalnych biomarkerów.

Grupa dr Susan Moir:

Głównym celem programu badawczego dr Moira jest badanie roli limfocytów B w patogenezie choroby HIV, a ostatecznym celem jest wypełnienie luk w wiedzy na temat odporności humoralnej przeciwko wirusowi. Wiedza ta ma kluczowe znaczenie dla opracowania skutecznej szczepionki opartej na przeciwciałach i postępu w interwencjach immunoterapeutycznych u osób zakażonych wirusem HIV. Doktor Moir skoncentruje się przede wszystkim na podłużnym fenotypowaniu komórek B/plazmablastów i odpowiedziach specyficznych dla antygenu oraz fenotypowaniu komórek B/pamięci i odpowiedziach specyficznych dla antygenu.

Grupa dr Jennifer Gommerman:

Dr Gommerman kieruje zespołem ds. COVID-19, który bada reakcje błony śluzowej śliny na SARS-CoV-2, a w szczególności reakcję IgA, która uważa się za kluczową dla ochrony przed infekcją i przenoszeniem wirusa. Jej zespół wykorzysta zebrane próbki śliny do przetestowania odpowiedzi IgA na SARS-CoV-2 S i RBD. Jej laboratorium opracowało własne czułe i specyficzne testy w celu określenia odporności błon śluzowych na wirusa SARS-CoV-230. Nie wiadomo, czy obecne szczepionki przeciwko Covid-19 wywołują jakąkolwiek odporność na poziomie błony śluzowej. W T0, 5, 24 zostaną wykonane następujące testy: ślinowe IgA przeciwko SARS-CoV-2 S, RBD i NP.

Grupa dr Anne-Claude Gingras:

Dr Anne-Claude Gingras jest ekspertem w dziedzinie interakcji białek i badań o dużej przepustowości, a jej grupa opracowała testy SARS-CoV-2 typu spike i domeny wiążącej receptor (RBD) oraz testy ELISA na białka nukleokapsydowe (IgG, IgA, IgM) na platformie zrobotyzowanej które można skalować w celu testowania tysięcy próbek dziennie. Opracowała także test zastępczy oparty na teście ELISA, który może przewidzieć zdolność neutralizacji surowicy do SARS-CoV-2 i zoptymalizowała test neutralizacji kolców oparty na lentiwirusie30,31. We wszystkich punktach czasowych i badaniach przesiewowych zostaną wykonane następujące testy: IgG surowicy przeciwko SARS-CoV-2, nukleokapsyd i domena RBD. Wyjściowa obecność tych przeciwciał będzie wskazywać na wcześniejszy SARS-CoV-2 i będzie kryterium wykluczenia. Szczepionki przeciwko COVID indukują jedynie przeciwciała przeciwko białku szczytowemu SARS-CoV-2, a osoby reagujące powinny wytworzyć przeciwciała przeciwko szczytowi i RBD, ale nie przeciwko nukleokapsydowi. Przeciwciała przeciwko nukleokapsydowi wskazywałyby na odpowiedź immunologiczną na infekcję, a nie na szczepionkę.

Przegląd i zatwierdzenie REB – prowadzenie badania Ośrodek uzyska zgodę na protokół badania i formularz zgody przed rozpoczęciem badania od Komisji Etyki Badań Uniwersytetu Toronto REB. Komisja REB dokona przeglądu całej odpowiedniej dokumentacji badania, aby chronić prawa, bezpieczeństwo i dobro uczestników. Badanie zostanie przeprowadzone dopiero po uzyskaniu zgody etycznej. Kopia protokołu (w tym poprawki do protokołu), wszystkie wersje formularzy świadomej zgody, inne informacje do wypełnienia przez uczestników, takie jak narzędzia ankietowe lub kwestionariusze, a także wszelkie proponowane materiały reklamowe/rekrutacyjne muszą zostać sprawdzone i zatwierdzone przez REB każdego uczestniczącego centrum przed wdrożeniem badania.