AATDの治療のための細胞遺伝子編集のためのiPSCの準備

AATは主に肝細胞で産生されるため、肝細胞での補正は最も有望なアプローチです。 IHEP細胞と多能性幹細胞または間葉系幹細胞由来肝細胞様細胞は、ドナー器官とは無関係に疾患モデリング、移植、および組織工学の潜在的な細胞源を提供します。

ただし、大規模な薬物ライブラリスクリーニングを含む文献で報告されているすべての研究は、1つまたは少数のAATバリアントまたはAATD患者に由来する股関節細胞株に基づいています。 さらに、Pi*ZZの10％のサブグループのみが臨床的に関連する肝疾患を発症し、遺伝的および/または環境修飾子が影響を受けたホモ接合体が肝疾患の影響を受けやすいかどうかを判断するという強い疑いがあります。 さらに、Pi*Zzではなく他のAAT遺伝子型の細胞AAT蓄積を減らす際の潜在的な薬物の有効性について、および肝臓包含および臨床的に明らかな肝疾患に関連する他のまれな変異についての研究はありません。 この制限は、新しい治療法の開発における強い障壁を表しています。 このため、調査員は異なる疾患プロファイルを持つ候補者を選択します。 調査員は、まれな病理学的変異体のキャリアを含む、さまざまな遺伝子型の患者を募集することを計画しています。 IPSCは末梢血および尿細胞から生成され、細胞が特徴付けられ、保存されます。 PBMCは凍結され、誘導された多能性幹細胞に再プログラムされます。 導出されたiPSCは、免疫蛍光炎の標準的な方法であるQRTPCR、組み合わせたゲノムハイブリダイゼーション（CGH）とflowyToMetryによって特徴付けられ、3つの胚層に分化されます。

さらに、調査員はiPSCをHeathocytes（IHEP）に区別します。 AAT欠損患者からのiPSC由来肝細胞は、突然変異に対して特徴付けられます。 肝細胞固有のターゲティングを開発しようとする試みがありましたが、現在の提案では、研究者は、リポソーム/ビロソームの表面にアシアロフチンを統合/統合することにより、肝細胞特異的リポソーム/ビロソームによる細胞特異的標的の2つの異なるアプローチの開発とテストを目指しています。 2）肝細胞由来の脱細胞表面膜を持つBESを運ぶリポソーム/ウイルソームをコーティングし、AATD IHEPのBESを供給して、AAT欠乏症の治療のためのこの方法の実現可能性をテストします。 これらの肝細胞はBESで処理され、その効果は深いシーケンス、免疫組織化学、およびAATの分泌によって評価されます。

ベース編集は、研究者がAATDを治すために治療として使用する精密医療の新たな方法です。 ターゲットに到達するために、調査員はここで細胞外小胞を使用して肝臓に基本編集者を届けることを提案します。 細胞外小胞は、ほぼすべてのタイプの細胞によって分泌され、潜在的な治療タンパク質のキャリアとして使用できます。 ベース編集は、遺伝的変異を修正するための非常に有望な手法であることが示されています。 しかし、いくつかの課題は未解決のままであり、この助成金では、研究者は特異性、安定性、生物分布、および長期的な影響の分析に対処したいと考えています。