IPSC: n valmistus solugeenien muokkaamiseen AATD: n hoitoon

AAT tuotetaan pääasiassa hepatosyytteissä, joten hepatosyytissä korjaus on lupaavin lähestymistapa. IHEP-solut sekä pluripotenttiset kantasolut tai mesenkymaaliset kantasoluista peräisin olevat maksasolujen kaltaiset solut tarjoavat potentiaalisia solulähteitä taudin mallinnukselle, siirrolle ja kudostekniikasta riippumatta luovuttajaelimistä.

Kaikki kirjallisuudessa ilmoitetut tutkimukset, mukaan lukien suuri lääkekirjaston seulonta, perustuvat kuitenkin yhteen tai harvoihin AAT -varianttiin tai korkeintaan harvoissa HIPSC -solulinjoissa, jotka ovat peräisin AATD -potilaista. Lisäksi vain 10%: n PI*ZZ: n alaryhmä kehittyi kliinisesti merkityksellisen maksasairauden ja on voimakas epäilty, että geneettiset ja/tai ympäristömuokkaimet määrittävät, onko vaikuttunut homotsygootti alttiina maksasairauksille. Lisäksi potentiaalisen lääkkeen tehokkuudesta ei ole tutkimusta solujen AAT -kertymisen vähentämisessä muille AAT -genotyypeille PI*ZZ: lle ja muille harvinaisten mutaatioille, jotka liittyvät maksan sulkeumiin ja kliinisesti ilmeiseen maksasairauteen. Tämä rajoitus edustaa vahvaa estettä uusien terapioiden kehittämisessä. Tästä syystä tutkijat valitsevat ehdokkaat, joilla on erilaiset sairausprofiilit. Tutkijat aikovat rekrytoida potilaita, joilla on erilaisia ​​genotyyppejä, mukaan lukien harvinaisten patologisten varianttien kantajat. IPSC tuotetaan perifeerisestä verestä ja virtsasoluista, sitten solut karakterisoidaan ja varastoidaan. PBMC jäädytetään ja ohjelmoidaan uudelleen indusoituihin pluripotenttisiin kantasoluihin. Johdetulle IPSC: lle on tunnusomaista standardimenetelmät immunofluroscencen, qRTPCR: n, yhdistetyn genomisen hybridisaation (CGH) ja virtauskytkentämetrian, ja se erotetaan kolmeen ituskerrokseen.

Lisäksi tutkijat erottavat IPSC: n hepatosyytteiksi (IHEP). IPSC: n johdettuja hepatosyyttejä AAT -puutteellisista potilaista karakterisoidaan mutaatioille. Maksasyyttispesifistä kohdentamista on yritetty kehittää, mutta siis nykyisessä ehdotuksessa tutkijoiden tavoitteena on kehittää ja testata kaksi erilaista lähestymistapaa soluspesifiselle kohdistukselle: 1) hepatosyyttispesifisellä liposomilla/virosomilla integroimalla/konjugoimalla asialofeutiinia liposomien/virosomien pinnalla joko proteiiniofragmentteina tai peptidien pinnalla; 2) Liposomin/virosomin päällystäminen, joka kantaa BES: ää hepatosyytteistä johdetulla eksovesicle -pintakalvolla ja toimittaa AATD IHEP: n BES: n tämän menetelmän toteutettavuuden testaamiseksi AAT -puutteen hoitamiseksi. Näitä hepatosyyttejä käsitellään BES: llä, ja sen vaikutukset arvioidaan syvän sekvensoinnin, immunohistokemian ja AAT: n erityksen varmistamalla ELISA.

Pohjakäsittely on nouseva tarkkuuslääketieteen menetelmä, jota tutkijat aikovat käyttää hoitoon AATD: n parantamiseksi. Tavoitteen saavuttamiseksi tutkijat ehdottavat tässä käyttämään solunulkoisia rakkuloita maksan perustoimittajien toimittamiseen. Solunulkoiset vesikkelit erittyvät melkein kaikentyyppisillä soluilla, ja niitä voidaan käyttää potentiaalisten terapeuttisten proteiinien kantajina. On osoitettu, että perusmuokkaus on erittäin lupaava tekniikka geneettisen mutaation korjaamiseksi. Useat haasteet ovat kuitenkin edelleen ratkaisematta, ja tutkijat haluavat tässä avustuksessa puuttua: spesifisyys, stabiilisuus, biojakautuminen ja pitkäaikaisten vaikutusten analysointi.