MS 치료를 위한 중간엽 줄기 세포

이 연구는 1/2상 공개 안전성 임상 시험으로 설계되었습니다. 첫 번째 단계에서는 15명의 동의한 다발성 경화증 환자가 포함됩니다.

포함 기준:

동의한 환자는 이 연구에 대해 다음 4개의 포함 기준을 충족했습니다.

1. 명확한 MS에 대한 Poser et al의 임상 기준;
2. 25세에서 65세 사이의 남성 및 임신하지 않은 여성;
3. 5년 이상의 질병 기간; 그리고
4. 지난 1년 동안 EDSS 점수가 1도 이상 증가했거나 외관상 MS에 대해 현재 사용 가능하고 등록된 약제(즉, 인터페론, 글라티라머 아세테이트[Copaxone] 및 면역억제제)에 대한 반응 실패 같은 기간 동안 최소 2개의 주요 MS 재발.

제외 기준:

1. 시험 전 3개월 동안 세포독성 약물(즉, 시클로포스파미드, 미톡산트론 및 아자티오프린)로 치료받은 환자;
2. 심각한 심장, 신부전, 간부전 또는 연구 결과를 해석하는 능력을 방해할 수 있는 기타 질병이 있는 환자;
3. 활동성 감염 환자; 그리고
4. 심각한 인지 기능 저하를 보이거나 사전 동의를 이해하고 서명할 수 없는 환자.

골수 흡인은 환자가 왼쪽 또는 오른쪽 옆으로 누운 상태에서 후상장골능에서 천자를 하는 짧은 전신마취 하에 수행됩니다. 각 환자로부터 약 200mL의 골수 접종물을 얻습니다.

MSC 준비 및 배양 정제된 MSC의 배양은 10% 태아 소 혈청, 1%가 보충된 낮은 포도당 수준의 여과 멸균 Dulbecco 변형 이글 배지(Qiagen, Valencia, California)를 사용하여 무균 조건(양압 청정실)에서 준비됩니다. L-글루타민, 및 1% 페니실린-스트렙토마이신-니스타틴 용액(모두 Biological Industries, Kibbutz Beit-Haemek, Israel).

Mesenchymal cell은 confluency에 도달할 때까지 40~60일 동안 배양한 다음 수확하고 액체 질소(-196°C)의 10% dimethyl sulfoxide 함유 배지에서 동결 보존합니다. 2주에 멸균 테스트 및 품질 관리를 위해 샘플을 채취합니다. 멸균이 확인된 후 MSC는 드라이아이스로 실험실로 옮겨지고 37°C 수조에서 해동되며 생리 식염수로 두 번 세척되어 잔류 디메틸 설폭사이드가 제거됩니다. 그런 다음 세포를 10x106/mL에서 15x106/mL의 농도로 일반 식염수에 재현탁합니다. 총 세포 수의 2/3(보통 60x106 ~ 100x106)는 척수강 내로, 1/3은 정맥 내로 주입됩니다. 주입할 세포 샘플을 형광 활성화 세포 분류기(FACS) 분석으로 테스트합니다. 세포(98%)는 중간엽 줄기세포(CD29, CD73, CD90, CD105 및 CD166)의 표면 마커 특성을 발현하고 CD34, CD45 및 CD14에 대해 음성이어야 합니다.

치료 프로토콜 모든 환자는 표준 요추 천자(평균 체중 Kg당 100만 세포)를 통해 경막내 주사를 받고 kg당 0.3-1백만 세포를 정맥 주사합니다.

확장 단계는 초기 임상시험 환자와 진행성 MS 환자 10명(총 24명의 환자)에 자가 MSC를 척수강내 또는 정맥주사를 반복하는 개방형 전향적 연구로 이 임상시험의 첫 번째 단계를 완료하는 환자에 대해 예정되어 있습니다. (2차 진행형, 1차 진행형 또는 재발 진행형). 환자는 본 연구에 포함되기 전 1년 동안 악화(EDSS 척도에서 최소 0.5도)를 경험하거나 충분한 회복 없이 적어도 한 번 이상의 주요 재발을 경험한 면역 조절 치료의 1차 및 2차 라인에 대한 실패로 정의되어야 합니다. 환자는 체중 1kg당 100만 MSC 100만개를 척수강내 및 정맥주사로 치료받은 후 6-12개월 간격으로 최대 8회 과정의 IT 또는 IV MSC 주사(동일 용량)로 치료받게 됩니다. 재판 기간은 4년이다.

환자는 안전성 평가 및 장애 점수(EDSS)의 변경을 위해 전체 시험 기간 동안 3개월마다 후속 조치를 받게 됩니다.

면역학적 분석은 첫 번째 MSC 처리 후 4 시점(1일, 1개월, 3개월 및 6개월)에 수행되며 면역 마커를 발현하는 림프구의 비율을 평가하기 위한 형광 세포 분류기(FACS) 분석을 포함합니다. 활성화 또는 조절 세포 표현형.