Rhinovirus에 의한 천식 악화의 기전

연구자들은 라이노바이러스에 의해 유발된 급성 천식 악화에 뚜렷한 유전자 프로필이 있다는 가설을 세웠습니다. 우리는 유전자 발현의 이러한 변화가 이전에 천식과 관련되지 않은 다른 분자뿐만 아니라 천식 표현형의 알려진 매개체 모두를 포함한다는 가설을 세웁니다.

이 연구의 주요 목적은 유전자 배열 분석을 사용하여 라이노바이러스 감염 전과 생체 내에서 정상 및 천식 환자의 기관지 상피 세포 및 폐포 대식세포에서 차등적으로 발현된 유전자를 결정하는 것입니다. 두 번째 목표는 변경된 표현이 증상 심각도, 바이러스 로드, 폐 기능 또는 생체 내 기도 염증과 관련이 있는지 여부를 확인하는 것입니다.

우리는 45명의 피험자를 모집할 계획입니다: 15명의 건강한 지원자, 흡입 코르티코스테로이드 요법에 순진한 천식 환자 15명, 흡입 코르티코스테로이드를 사용하는 천식 환자 15명은 라이노바이러스 감염 전과 접종 4일 후 두 번의 기관지경 검사를 받을 예정입니다. 기관지 칫솔질, 생검 및 기관지 폐포 세척(BAL)이 수행됩니다. RNA는 TRIzol 시약(Invitrogen, Carlsbad, CA)으로 추출되고 RNeasy 컬럼(Qiagen, Valencia, CA)을 통과하여 정제됩니다. Exon 1.0ST 어레이 칩(Affymetrix, Santa Clara, CA)을 사용하여 유전자 발현의 변화를 분석합니다. 이들은 어레이당 140만 개의 프로브 세트와 550만 개 이상의 기능을 사용할 수 있는 가장 강력한 게놈 발현 도구입니다. 상당히 상향조절된 것으로 밝혀진 유전자는 정량적 RT-PCR에 의해 확인될 것이다.

희석되지 않은 기관지 상피내막액(기관지흡착)을 수집하는 새로운 방법을 사용하여 MesoScale Discovery 다중 배열 시스템(MesoScale Discovery, Gaithersburg, MD)으로 많은 수의 단백질을 측정하여 유전자 배열 결과를 추가로 확인하고 생체 내 제공을 제공합니다. 천식 환자에서 조절 장애가 있는 단백질 생산의 증거. 유전자 발현 및 단백질 수준은 생체 내 바이러스 부하, 증상 점수, 폐 기능 및 기도 염증과 상관관계가 있을 것입니다.

이 연구는 생체 내 라이노바이러스 감염 동안 기관지 상피 유전자 발현의 변화에 ​​대한 최초의 포괄적인 평가를 나타내며 따라서 천식의 숙주 반응에 대한 중요한 통찰력을 제공하고 추가 평가를 위한 잠재적인 새로운 표적을 식별할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다.