IL-6R 차단 후 조직 및 순환에서의 급성 운동 및 NK 세포 조절

목표:

주요 목표:

• 급성 운동, IL-6 봉쇄 및 NK 조절 사이의 연관성을 탐색합니다.
• 단일 세포 RNA 시퀀싱을 사용하여 운동 활성화 NK 세포가 고유한 표현형을 갖는지 여부를 탐색합니다.

보조 목표:

• 건강한 젊은 남성의 NK 세포 수와 순환, 근육 및 지방 조직의 활동에 대한 급성 유산소 운동의 효과를 탐색하여 항암 치료제로서의 운동을 간접적으로 탐색합니다.
• NK 세포 반응의 동역학을 평가하고 가능하면 활성화된 NK 세포의 모양과 소재를 연대순으로 조사합니다.

탐색 목표

• 다양한 면역 세포를 추적하고 인간의 급성 운동 반응에 관여하는 재현 가능한 프로토콜을 확립하기 위해
• 면역학적으로 중요한 운동 중 근육에서 방출되는 새로운 신호 분자를 조사합니다.
• 운동 및 음식 섭취 후 배고픔과 포만감에 대한 운동 유도 IL-6의 가능한 역할을 조사합니다. • 질량 분석법을 사용하여 IL-6 수용체 차단이 운동 프로테옴 및 대사체에 미치는 영향 탐색

행동 양식:

30명의 건강하고 오락적으로 활동적인 젊은 남성이 급성 유산소 운동 및 IL-6R 차단 또는 위약에 대한 반응으로 NK 세포 동역학 및 조절을 연구하는 급성 운동 연구에 포함될 것입니다.

연구는 2회 방문으로 구성됩니다. 포함 시(방문 1) 모든 피험자는 기본 의료 스크리닝(청진, 혈압, ECG), 체성분 결정(DXA), 심혈관 건강(VO2max) 및 즉시 분석되는 표준 공복 혈액-생화학을 포함하는 평가를 받게 됩니다. 방문 2는 우세한 다리와 복부 피하 지방 저장소 각각(둘 다 휴식 상태에서)의 근육 및 지방 생검으로 구성되며, 이후 추가 조직 분석을 위한 참조 조직으로 작용할 것입니다. 그런 다음 IL-6R 주입을 시작하기 전에 18G 팔주위 말초 정맥 접근이 확보됩니다. 주입 절차 2시간 후 피험자는 급성 운동 프로토콜을 받게 됩니다. 그런 다음 피험자는 자전거 에르고미터를 사용하여 고강도 급성 유산소 운동을 하게 됩니다. 혈액 샘플은 식욕 조절 하위 연구에서 운동 후 즉시, 운동 후 ½, 1, 1½ 및 2시간 및 운동 후 최대 4시간 동안뿐만 아니라 주입 및 운동 전, 운동 중 채취될 것입니다. 혈액 샘플은 백혈구 수와 분화, 혈장 생화학에 대해 즉시 분석됩니다. 또한, 혈액 샘플은 후속 단일 세포 RNA 시퀀싱, 면역 세포 분포 및 암세포에 대한 살상 능력과 함께 NK 세포 분리에 활용될 것입니다. 또한, IL-6 및 G-CSF를 포함하되 이에 국한되지 않는 코르티솔, 프로락틴 및 순환 사이토카인의 추후 결정을 위해 혈장 샘플을 수집하고 동결할 것입니다. 마지막으로 식욕 하위 연구에서는 인슐린, GLP-1 및 유리 지방산을 측정합니다.

유전자 발현 분석을 최적화하기 위해 운동 2시간 후 조직 샘플을 채취합니다. 근육 및 지방 조직 샘플 모두는 염증 및 항염증 마커, NK 세포 함량 및 혈액 유래 NK 세포에서 수행된 단일 세포 시퀀싱에서 얻은 마커를 사용하여 이러한 NK 세포의 표현형에 대해 분석됩니다. 또한, 면역 세포 침윤은 조직학을 사용하여 평가될 것이다. 모든 조직 샘플은 샘플과 관련된 불편함이나 감염을 최소화하기 위해 국소 마취 동안 멸균 상태에서 Bergström 바늘을 사용하여 채취합니다.

조직 샘플 후, 임의 식사가 제공되며 피험자는 가능한 한 많이 먹을 수 있지만 남은 음식은 집으로 가져갈 수 있으므로 과식하지 않도록 지시받습니다. 파라세타몰(1.5g)은 위 배출 엉덩이에 제공됩니다.

모든 참가자는 하루 중 대략 같은 시간(오전 9시)에 2번의 연구 방문을 받게 됩니다. 연구 완료 후 남은 재료는 CFAS 바이오뱅크로 전송됩니다.

피험자: 포함된 피험자는 18-40세의 건강한 젊은 남성 30명입니다. 제외 기준은 심혈관, 류마티스 및 대사 질환, 엘리트 스포츠 또는 고도의 유산소 훈련 상태입니다. 비스테로이드성 항염증제(NSAID) 또는 기타 면역억제제의 만성 사용.

개입: 피험자는 사전 IL-6R 차단이 있거나(n=15) 또는 없는(n=15) 급성 운동에 무작위 배정됩니다. 운동 개입은 고정식 자전거 에르고미터에서 수행되는 매우 부담스러운 약 45분 간격의 유산소 운동 시합으로 구성됩니다. HRmax의 50-60%에서 처음 5분간 워밍업한 후, 대상자는 90% HRmax 이상에서 3분 간격으로 구두로 권장되는 7번의 저강도 페달링을 3분간 실시합니다. 혈액 샘플은 2시간 시점에서 조직 샘플링과 함께 운동 전, 도중 및 운동 후 ½, 1, 1½ 및 2시간에 채취됩니다.

식욕 조절을 평가하기 위해 운동 후 2시간에서 4시간 사이에 추가 혈액 샘플을 채취합니다.

통계적 고려 사항: 파일럿 연구의 데이터를 기반으로 CON과 비교하여 IL6R 억제 그룹에서 최대 NK 세포 동원이 약 45% 더 낮고 IL6R 억제 그룹에서 얻은 최저 값과 NK 세포 최저값에서 29%의 차이가 있을 것으로 예상합니다. 양측 테스트에서 5% 유의 수준을 가정하면 개입 그룹에서 45%의 상대적인 차이를 감지하기 위해 90% 검정력을 달성하기 위해 각 그룹에 9명의 환자를 포함해야 합니다. 잠재적인 탈락/제외를 설명하기 위해 다소 침습적인 설정으로 인해 총 30명의 환자(그룹당 15명)를 포함합니다.

모집: 피험자는 forsøgsperson.dk 또는 관련 사이트의 광고와 함께 유사한 사이트를 통해 모집됩니다.

피험자는 CFAS에 연락하고 연구 정보 수신 여부를 선택할 수 있습니다. 전화(방관자의 선택권 거부) 또는 CFAS에서의 대면 회의. 이 모든 정보는 1차 조사관이 제공합니다. 피험자가 연구에 대해 더 듣고 싶어하는 경우 관련 문서가 이메일로 전송됩니다. 피험자가 서면 또는 구두 정보를 받은 후 연구 참여에 관심이 있는 경우 연구 참여를 고려할 시간이 24시간 주어집니다. 피험자가 전화 또는 대면으로 통보를 받고 연구 참여를 수락하면 서면 및 사전 동의를 얻을 수 있는 1을 방문하도록 초대됩니다(또는 참여자가 서명하고 집에서 가져옴).

위험 및 부작용: 피험자는 혈액 및 조직 샘플과 관련하여 약간의 불편함을 경험할 수 있습니다. 채혈된 혈액량은 무시할 수 있으며 건강상의 위험과 관련이 없습니다. 조직의 모든 샘플링은 국소 마취 동안 무균 상태에서 수행되므로 통증이나 불편함이 거의 없고 감염 위험이 거의 없습니다. 운동 테스트 중에 참가자는 숨가쁨을 경험할 수 있습니다.

IL-6R 억제는 일반적으로 부작용이 거의 없이 잘 견딥니다. 파라세타몰의 복용량은 적고 위험과 관련이 없습니다.

관련된 의사의 연락처 정보는 모든 부작용을 보고하고 해결할 수 있도록 연구 포함 시 참가자에게 제공됩니다.

연구 결과의 보급: 긍정적, 부정적 및 결정적이지 않은 결과 모두 관련 국제 과학 저널에 게재됩니다.

윤리적 고려: 프로젝트는 제한된 위험, 부작용 및 불편함을 유발할 것으로 예상됩니다. 모든 절차는 관련 안전성을 갖춘 숙련된 의사와 생리학자가 수행합니다. Tocilizumab은 일반적으로 내약성이 좋으며 파라세타몰의 용량은 낮습니다. 포함된 피험자는 언제든지 정당한 이유 없이 연구 참여에 대한 동의를 철회할 수 있습니다. 우리는 이 프로젝트가 중요하며 순환계와 지방 및 근육 조직 모두에서 급성 운동에 대한 IL-6 수정 가능한 NK 세포 반응에 대한 중요한 새로운 정보에 기여할 것이라고 믿습니다(현재 후자에 대한 지식이 매우 제한되어 있기 때문입니다).

이 연구는 Lægemiddelstyrelsen의 도구 상자 연구로 간주되므로 약학 연구가 아닙니다.