세네갈 홍역 신속검사의 임상진단성능평가 원문보기 KCI 원문보기 인용

가. 평가 중인 제품

DIATROPIX(세네갈 다카르 소재)에서 제조한 항홍역 IgM 측면 유동 면역크로마토그래피 분석. RDT(신속 진단 테스트)는 혈청 및 모세혈관액과 함께 사용하기 위한 키트로 준비되며 구강액으로 실험적으로 사용할 수 있는 추가 장치가 있습니다.

B. 연구 설계

이것은 발병 감지 및 국가 감시를 목적으로 비 실험실 인력에 의한 홍역 사례 확인을 위한 RDT의 성능(민감도 및 특이도)을 평가하기 위해 설계된 전문가용 홍역 RDT의 전향적 진단 평가 연구입니다. 모세혈관 혈액 및 구강액을 사용한 RDT 성능은 의심 사례의 혈청에서 ELISA에 의한 항홍역 IgM 검출 또는 홍역에 대한 양성 PCR 결과(비인두 면봉 샘플 또는 구강액에서)의 결합 참조 표준과 비교됩니다. (일반적인 감시 관행의 일부로) 참조 테스트를 위해 혈청 샘플을 수집한다는 점을 감안할 때, 연구 설계에는 혈청에 대한 실험실 직원의 RDT 사용 평가도 포함됩니다.

C. 샘플 크기

10,000개의 결과에 기반한 시뮬레이션 접근 방식을 사용하여 목표를 충족하기 위한 민감도 및 특이도 추정의 충분한 정밀도를 보장하기 위해 최소 672개의 홍역 IgM 음성 및 172개의 IgM(또는 PCR) 양성 사례(참조 테스트 결과 기준)가 필요하다고 추정합니다. 제품 프로필 요구 사항 테스트 샘플의 양성률(%)에 따라 총 대상 샘플 크기가 최소 844개입니다.

D. 채용

모집은 사례 기반 홍역 감시 전략에 따라 진행되며, 연구 현장에 있는 연속 적격 환자는 감시에 참여하도록 초대됩니다. 모든 홍역 의심 사례는 국가 사례 기반 감시 접근 방식(역학적으로 연결된 임상 사례 포함)에 따라 검사를 받을 수 있습니다.

연구 포함 기준을 충족하는 환자에게는 연구에 관한 정보와 임상 치료 또는 일상적인 감시에 필요한 것 이상으로 관련된 추가 진단 테스트가 제공됩니다. 포함은 정보에 입각한 동의 절차를 따르며 참여를 원하지 않는 개인은 일상적인 감시 활동을 포함할 수 있는 일상적인 임상 치료를 계속 받게 됩니다.

긴급한 임상 치료, 개입 또는 다른 기관으로의 의뢰/이전은 지연되지 않으며 환자는 담당 임상 담당관이 판단한 임상적으로 안정적인 경우에만 포함할 수 있습니다.

E. 임상 샘플링 전략

모든 참가자는 정맥, 모세혈 및 구강액 샘플링을 받습니다(특정 제외 사항이 적용되지 않는 한). 정맥 채혈은 감시를 위한 보건부 표준 운영 절차에 맞춰져 있습니다. 연구의 목적을 위해 구강 유체 샘플링은 홍역 RNA 검출을 위한 동등한 기술로서 비인두 면봉 채취를 대체할 것입니다.

정맥혈/혈청 샘플링

정맥 전혈은 모든 연령의 환자로부터 평범하고 건조한 튜브에서 채취됩니다(연구 현장에서 어린 영아의 힐스틱 모세관 샘플링을 사용하여 혈청 샘플을 얻는 것이 현재 관행이 아닌 한). 전혈 샘플은 RDT(10 마이크로리터)와 ELISA를 모두 사용하여 IPD(Institut Pasteur de Dakar) 실험실에서 홍역 IgM에 대한 혈청 운반 및 테스트를 준비하기 위해 참여 현장에서 혈청 분리를 용이하게 하기 위해 저장되거나 원심분리됩니다. 100마이크로리터). 이러한 혈청은 또한 풍진 및 지카 IgM을 포함하여 일상적인 감시의 일부로 추가 검사를 받을 수 있습니다.

구강 유체 샘플링

부적격(구강액 제외 기준 참조)이 아닌 한 구강액 샘플을 모든 참가자로부터 채취하여 제조업체의 지침에 따라 바이러스 수송 배지(VTM)/완충액에 추가합니다. 샘플 준비 후 구강액은 RDT를 사용하여 현장에서 IgM의 존재 여부를 테스트합니다. 잔류 액체 샘플은 PCR +/- 기타 분자 테스트를 위해 저장되어 홍역 국가 표준 실험실로 이송됩니다.

구강액으로 RDT 성능을 평가할 뿐만 아니라 혈청과 함께 이 샘플을 수집하면 새로운 RDT가 평가되는 참조 표준이 강화됩니다. 또한 국가 감시를 알리고 공중 보건 결정을 안내하기 위해 순환하는 홍역 변종의 분자 분석의 부가가치를 평가할 수 있습니다. 따라서 참가자가 구강 유체 샘플링에 부적격하지만 비인두 면봉이 가능한 경우 대신 수행됩니다. 그러나 비인두 면봉 샘플은 RDT에 적용되지 않습니다.

모세혈

모든 참가자는 세계보건기구(WHO) 권장 기술을 사용하여 모세혈관 혈액 샘플을 채취합니다. 모세혈관 혈액(5마이크로리터)은 표준 운영 절차/제조업체의 지침에 따라 샘플 버퍼에 직접 추가되고 희석 후 지체 없이 RDT에 적용됩니다. RDT에서 유효한 결과를 확인한 후 잔여 희석 모세혈은 폐기됩니다.

F. 신속한 진단 테스트

각 신속 검사(혈청, 모세혈액, 구강액)에 대해 두 명의 독립적인 실험실 직원(혈청의 경우) 또는 비실험실 직원(모세혈액 및 구강액의 경우)이 결과를 읽고 양성 또는 음성으로 해석합니다. 참조 카드에 따른 정성적 해석과 대조군 및 테스트 라인의 강도는 판독 타이밍과 함께 문서화됩니다.

결과를 판독한 후 사진을 찍고 모세혈관 또는 구강액과 함께 사용된 RDT를 건조하고 건조제와 함께 보관한 다음 추가 분자 분석을 위해 IPD로 옮깁니다.

직원은 연구 실행 중에 RDT 사용에 대한 교육을 받고 프로토콜 및 제품 정보/제조업체의 사용 지침을 제공받습니다.

이 정보에는 보관 온도, 키트 내용물, 작동 온도, 최소 및 최대 배양 시간, 개봉 후 제품의 안정성, 필요하지만 키트에 제공되지 않는 추가 장비 또는 소모품, 절차의 단계 수가 포함됩니다.

G. 독자 간 가변성

수행된 모든 RDT는 두 번째 조사자가 판독하고 판독기 간 가변성을 평가하기 위해 결과를 비교합니다. 모든 불일치는 숙련된 연구 팀원이 세 번째로 독립적으로 판독하여 해결합니다. 각 RDT 결과를 기록하는 직원의 이름이 기록됩니다. 각 참여 사이트/실험실의 연구 팀은 각 판독이 독립적으로 수행되도록 교육을 받을 것입니다. ELISA 결과가 알려지기 전에 RDT가 수행되고 해석됩니다.

아. 연구 기간

이 연구는 6개월 이내에 완료하고 9개월까지 연장할 수 있는 가능성과 함께 필요한 예상 샘플 크기(최소 양성 및 음성 의심 사례 수)를 포함하는 데 필요한 시간 동안 지속됩니다. RDT 결과를 볼 수 없는 IPD의 바이러스 참조 테스트 실험실 직원은 매주 (참조 테스트에 따라) 양성 및 음성 사례 수를 모니터링합니다. 연구 팀은 격월로 참조 실험실 팀의 입력과 함께 매주 전체 모집 진행 상황을 검토합니다.

많은 수의 음성 사례가 필요하고 잠재적인 규제 승인 제출에 대한 불필요한 지연을 피하기 위해 데이터 팀과 연구 조사관의 결과에 대한 중간 검토는 172개의 양성 사례가 모집되면 수행됩니다. 조사관은 규제 승인 목적을 위해 특이성 추정치에 대한 충분한 정밀도가 이미 달성되었는지 여부와 추가 모집이 필요한지 여부를 평가할 것입니다.

I. 사용 용이성 설문지

연구 시작(교육 후)과 종료 시 RDT 수행을 담당하는 모든 직원은 사용하기 쉬운 간단한 질문에 답해야 합니다. 질문은 사용 지침의 명확성 및 패키지 라벨, 임상 샘플링 절차, 판독 시간, 사용할 검체의 양, 사용 단계의 용이성/어려움을 포함하여 RDT 사용의 인지된 용이성을 포착하려고 합니다. 테스트 수행(샘플 준비 및 샘플 적용 포함), 결과 읽기 및 해석의 용이성 및 인지된 생물학적 안전성.

J. 데이터 입력

데이터는 샘플 수집 전에 전자 사례 보고서 양식(eCRF) 양식을 사용하여 수집되며 필수 국가 감시 문서 양식에서 수집된 데이터와 일치합니다. 데이터는 Institut Pasteur de Dakar의 보안 감시 및 임상 데이터 수집 시스템인 TERANGA Mobile에 입력되며, 연구 수행 중에 연구 팀이 교육을 받게 됩니다. 각 사이트의 연구 촉진자는 eCRF가 올바르게 완료되고 저장되도록 할 책임이 있습니다. 환자 또는 간병인 면담 외에도 국가 종이 감시 양식 또는 예방접종 기록(예: 예방접종 날짜 확보)을 통해 추가 정보를 보완할 수 있습니다.

K. 품질 관리(모니터링) 및 보증(감사)

모든 데이터가 신뢰할 수 있고 올바르게 처리되었는지 확인하기 위해 데이터 처리의 각 단계에서 품질 관리가 수행됩니다. 연구 기관은 포함된 모든 환자가 동의서를 가지고 있고 필요한 모든 샘플링 절차를 거쳤는지 여부를 포함하여 생성하는 데이터의 품질을 정기적으로 확인할 책임이 있습니다.

IPD는 세부 모니터링 계획에 설명된 대로 연구 및 관련 품질 관리 검사에 대한 위험 기반 모니터링을 수행합니다. 스터디 모니터는 소스 데이터를 검토하고 확인하여 입력된 데이터가 정확하고 완전하며 소스 문서에서 확인할 수 있는지 확인합니다. 참가자의 안전과 권리가 보호됩니다. 현재 승인된 프로토콜, GCP(Good Clinical Practice) 및 적용 가능한 모든 규제 요건에 따라 연구가 수행되고 있음을 확인합니다. 모니터링 계획은 연구 현장에서 모니터링 방문 및 감사의 빈도를 자세히 설명합니다.