여성의 가임력 보존: 난소 조직 냉동보존을 위한 혁신적인 방법의 평가 (FERTIOVO)
2025년 6월 25일 업데이트: University Hospital, Clermont-Ferrand
최근 암 진단 및 치료법의 혁신으로 환자의 5년 생존율이 향상되었습니다. 그러나 항암 치료는 환자의 생식력을 손상시킬 수 있습니다. 따라서 치료 시작 전에 생식력 보존이 권장됩니다. 사춘기 전 소녀의 생식력을 보존하는 유일한 방법은 사춘기 여성에게도 사용할 수 있으며 나중에 자가 이식을 하는 난소 조직 냉동 보존(OTC)입니다. OTC 및 이식 후 전 세계적으로 200건의 출생이 보고되었지만 상당한 개선이 필요합니다. 실제로 동결 및 해동 프로토콜은 실험실(배지, 동결 보호제, 동결 곡선 등)에 따라 다르며 선택 기준은 타당하지 않습니다. 또한 대부분의 실험실에서는 안전하지 않은 장치(예: 스크류 캡 냉동 바이알)을 사용하여 질소 탱크에 샘플을 보관하는 동안 난소 조직을 생물학적 위험에 노출시킵니다. 이러한 위험을 제거하기 위해 새로운 "높은 보안" 장치(용접 크라이오튜브)가 상용화되었습니다. 그러나 열용접은 조직의 질을 변화시킬 수 있지만, 이러한 혁신적인 장치로 냉동된 인간 난소 조직의 기능은 아직 평가되지 않았습니다. 우리 연구의 목적은 i) 냉동 매체의 열역학적 특성과 장치 유형(용접 또는 나사식 냉동 튜브)에 따라 인간 OTC의 냉동 및 해동 프로토콜을 최적화하고 ii) 냉동 튜브 유형이 냉동 튜브에 영향을 미치는지 확인하는 것입니다. 인간 난소 조직의 품질.
이 프로젝트를 통해 동결이 난소 조직 기능에 미치는 영향을 더 잘 이해할 수 있을 뿐만 아니라 환자 치료를 최적화하기 위해 Clermont-Ferrand 병원의 ART 실험실 내 OTC에 대한 최적의 프로토콜을 구현하는 데 도움이 될 것입니다.
연구 개요
상세 설명
이 프로젝트의 목적은 극저온 튜브의 유형(나사 캡 또는 열납땜)이 냉동 보존 후 난소 조직의 품질과 기능에 영향을 미치는지 여부를 확인하는 것입니다.
먼저, 시차 주사 열량계(Diamond DSC, PerkinElmer)를 사용하여 냉동 매체의 열역학적 특성을 특성화하여 냉동 및 해동 프로토콜을 최적화합니다.
이 분석은 결정화 온도(Tc), 용융 종료 온도(Tm) 및 전이 온도(Tg'1)와 같은 중요한 매개변수를 정의합니다.
동결 및 해동 프로토콜이 최적화되면 우리 실험실에서 이전에 검증한 모델인 양성 낭종을 둘러싼 인간 난소 피질을 사용하여 냉동관의 유형이 인간 난소 조직의 품질에 영향을 미치는지 여부를 결정합니다.
진료소에서 일반적으로 파괴되는 이러한 난소 피질 샘플은 정상적인 난소 피질과 유사한 특성을 공유합니다.
난소 조직을 1mm3 조각으로 자르고 신선한 난소 피질(그룹 1, 대조군), 열 납땜된 극저온 튜브에 냉동 보존된 난소 피질(그룹 2) 또는 나사 캡(그룹 3)의 세 그룹으로 나눕니다.
난포 밀도 및 형태(HES 염색)와 증식/세포사멸 균형(KI67 및 절단된 카스파제 3에 대한 면역조직화학(IHC))을 분석하여 그룹 1의 경우 절제 직후 또는 그룹 2 및 3의 경우 해동 직후 난소 조직의 질을 평가할 것입니다.
해동 후 난소 조직의 기능을 평가하기 위해 난소 피질 조각을 시험관 내에서 배양합니다.
우리는 i) 난포 밀도, 유형 및 형태(HES 염색), ii) 증식/세포사멸 균형(KI67 및 절단된 카스파제 3에 대한 IHC), iii) 주요 난포 형성 조절 인자(GDF-9에 대한 IHC)의 발현 수준을 분석할 것입니다. iv) 배양 배지에서 분비되는 모낭생성 관련 호르몬(AMH, 에스트로겐)의 수준.
연구 유형
관찰
등록 (실제)
30
연락처 및 위치
이 섹션에서는 연구를 수행하는 사람들의 연락처 정보와 이 연구가 수행되는 장소에 대한 정보를 제공합니다.
연구 장소
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Clermont-Ferrand, 프랑스, 63100
- University Hospital
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참여기준
연구원은 적격성 기준이라는 특정 설명에 맞는 사람을 찾습니다. 이러한 기준의 몇 가지 예는 개인의 일반적인 건강 상태 또는 이전 치료입니다.
자격 기준
공부할 수 있는 나이
- 성인
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
아니
샘플링 방법
비확률 샘플
연구 인구
Clermont-Ferrand 대학 병원 센터에서 양성 난소 낭종 절제술이 예정된 성인 여성.
설명
포함 기준:
- 양성 난소 낭종 절제술이 예정된 성인 여성(유피낭종, 기능성 낭종, 점액성 낭종 또는 장액성 낭종)
- 37세 미만 18세 이상
- 연구 참여에 대한 서면 동의를 제공할 수 있습니다.
- 사회복지사업부 소속
제외 기준:
- 37세 이상 18세 이하 여성
- 다낭성 난소 증후군
- 난소예비력 감소
- 심한 자궁내막증
- 악성 및 자궁내막 낭종
공부 계획
이 섹션에서는 연구 설계 방법과 연구가 측정하는 내용을 포함하여 연구 계획에 대한 세부 정보를 제공합니다.
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
코호트 및 개입
그룹/코호트 |
개입 / 치료 |
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신선한 난소 피질 조각
Pericystic ovarian cortex는 1mm3 조각으로 절단되어 수집 당일(D0) 또는 기관형 배양 후(D7 및 D14) 직접 분석됩니다.
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열 납땜된 냉동 바이알에 냉동된 난소 피질 조각.
Pericystic 난소 피질은 1mm3 조각으로 절단되고, 열 납땜된 냉동 바이알에서 저속 프로그래밍 가능 냉동 장치(Nano Digitcool, Cryo Bio System)를 사용하여 냉동되고 액체 질소(-196°C)에 보관됩니다.
그런 다음 해동일(D'0)에 분석하기 전과 기관형 배양 7일 및 14일(D7 및 D14) 후에 단편을 해동합니다.
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인간 난소 조직 냉동 보존: 낭종 절제 직후, 낭포 주위 난소 피질을 1mm3 조각으로 절단하고 저속 프로그래밍 가능 냉동 장치(Nano Digitcool, Cryo Bio System)를 사용하여 나사 고정 또는 열납땜 냉동 바이알에 냉동 보존합니다.
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나사식 냉동 바이알에 냉동된 난소 피질 조각.
Pericystic 난소 피질은 1mm3 조각으로 절단되고, 나사형 극저온 바이알에서 저속 프로그래밍 가능 냉동 장치(Nano Digitcool, Cryo Bio System)를 사용하여 냉동되고 액체 질소(-196°C)에 보관됩니다.
그런 다음 해동일(D'0)에 분석하기 전과 기관형 배양 7일 및 14일(D7 및 D14) 후에 단편을 해동합니다.
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인간 난소 조직 냉동 보존: 낭종 절제 직후, 낭포 주위 난소 피질을 1mm3 조각으로 절단하고 저속 프로그래밍 가능 냉동 장치(Nano Digitcool, Cryo Bio System)를 사용하여 나사 고정 또는 열납땜 냉동 바이알에 냉동 보존합니다.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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해동 후 난소 난포 형태
기간: 24개월
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헤마톡실린-에오신-샤프란으로 염색된 연속 절편에서 신선 대 냉동(열 납땜 또는 나사 고정된 냉동 바이알 포함)/해동된 난소 피질의 난포 형태를 평가합니다. 단편은 그룹 1의 경우 수집 당일에 고정되고 그룹 2 및 3의 경우 해동 직후에 고정됩니다. 모낭의 형태는 Keros et al.에 의해 설명된 매개변수에 따라 평가됩니다.
흠 Reprod.
2009.
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24개월
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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해동 후 난소 난포 밀도
기간: 24개월
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헤마톡실린-에오신-샤프란으로 염색된 연속 절편에서 신선 대 냉동(열 납땜 또는 나사로 고정된 냉동 바이알 있음)/해동된 난소 피질의 난포 밀도(= 난포 수/mm2)를 평가합니다. 조각은 그룹 1의 경우 수집 당일에 고정되고 그룹 2 및 3의 경우 해동 직후 고정됩니다.
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24개월
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기관형 배양 후 난포 단계
기간: 36개월
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헤마톡실린-에오신-사프란으로 염색된 연속 절편에서 신선한 대 냉동(열 납땜 또는 나사로 고정된 냉동 튜브 포함)/해동된 난소 피질의 난포 단계(원시, 1차, 2차 및 유미 난포의 %)를 평가합니다. 조각은 유기형 배양 7일 또는 14일 후에 고정됩니다.
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36개월
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기관형 배양 후 난포 형태
기간: 36개월
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헤마톡실린-에오신-샤프란으로 염색된 연속 절편에서 신선 대 냉동(열 납땜 또는 나사 고정된 냉동 바이알 포함)/해동된 난소 피질의 난포 형태를 평가합니다. 조각은 유기형 배양 7일 또는 14일 후에 고정됩니다.
모낭의 형태는 Keros et al.에 의해 기술된 매개변수에 따라 평가될 것입니다.
흠 Reprod.
2009.
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36개월
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기관형 배양 후 GDF-9 발현
기간: 36개월
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신선 및 냉동(열 납땜 또는 나사 고정된 냉동 바이알 사용)/해동된 난소 피질에서 GDF9 양성 난포(즉, GDF-9에 대해 양성 난모세포 포함)의 비율을 면역염색된 연속 절편에서 평가합니다.
조각은 유기형 배양 7일 또는 14일 후에 고정됩니다.
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36개월
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냉동 매체의 열역학적 특성
기간: 12개월
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시차 주사 열량계(DiamondDSC, PerkinElmer)를 사용하여 동결 매체(4mg/mL의 Leibovitz)의 결정화 온도(Tc), 용융 종료 온도(Tm) 및 전이 온도(Tg'1)를 결정합니다. HSA, 1.5M DMSO 및 0.1M 수크로스).
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12개월
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시동 후 난소 모낭 증식
기간: 24 개월
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신선하고 냉동 된 (열광성 또는 나사로 냉동 화 된 냉동 형제) /해동 난소 피질에서 증식 성 (난 모세포 또는 granulosa 세포의 백분율은 면역 염색 된 연속 섹션에서 평가 될 것이다.
단편은 그룹 1의 수집 당일에 그리고 그룹 2 및 3의 해동 직후에 고정 될 것이다.
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24 개월
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시동 후 난소 모낭 아 pop 토 시스
기간: 24 개월
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신선하고 냉동 된 (열광성 또는 나사로 냉동 된 균열체와 함께) 아 pop 토 시스 (난 모세포 또는 과립 세포 양성 절단 카스파 제 3)의 백분율은 면역 염색 된 연속 섹션에서 평가 될 것이다.
단편은 그룹 1의 수집 당일에 그리고 그룹 2 및 3의 해동 직후에 고정 될 것이다.
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24 개월
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유기형 배양 후 증식
기간: 36 개월
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신선하고 냉동 (열광성 또는 나사로 된 냉동 조상) /해동 난소 피질에서 증식 성 (난 모세포 또는 granulosa 세포의 백분율)은 면역 염색 된 연속 섹션에서 평가 될 것이다.
단편은 7 ~ 14 일의 유기농 배양 후에 고정 될 것이다.
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36 개월
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유기농 배양 후 아 pop 토 시스
기간: 36 개월
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신선하고 냉동 된 (열광성 또는 나사로 냉동 된 균열체와 함께) 아 pop 토 시스 (난 모세포 또는 과립 세포 양성 절단 카스파 제 3)의 백분율은 면역 염색 된 연속 섹션에서 평가 될 것이다.
단편은 7 ~ 14 일의 유기농 배양 후에 고정 될 것이다.
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36 개월
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유기형 문화 후 AMH 분비
기간: 36 개월
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AMH 수준은 신선하고 냉동의 유기농 배양 동안 배양 배지에서 정량화 될 것이다 (열광성 또는 나사로 균일 한 균열이있는) /해동 난소 피질.
문화 매체는 14 일 동안 문화 3 일마다 수확 될 것입니다.
AMH는 전기 화학 발광에 의해 정량화 될 것이다
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36 개월
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유기농 배양 후 에스트로겐 분비
기간: 36 개월
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에스트로겐 수준은 신선하고 냉동의 유기형 배양 동안 배양 배지에서 정량화 될 것이다 (열광성 또는 나사로 균열이있는) /해동 난소 피질.
문화 매체는 14 일 동안 문화 3 일마다 수확 될 것입니다.
에스트로겐은 전기 화학 발광에 의해 정량화 될 것이다
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36 개월
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공동 작업자 및 조사자
여기에서 이 연구와 관련된 사람과 조직을 찾을 수 있습니다.
수사관
- 수석 연구원: Florence BRUGNON, MD, PhD, University Hospital, Clermont-Ferrand
연구 기록 날짜
이 날짜는 ClinicalTrials.gov에 대한 연구 기록 및 요약 결과 제출의 진행 상황을 추적합니다. 연구 기록 및 보고된 결과는 공개 웹사이트에 게시되기 전에 특정 품질 관리 기준을 충족하는지 확인하기 위해 국립 의학 도서관(NLM)에서 검토합니다.
연구 주요 날짜
연구 시작 (실제)
2022년 5월 5일
기본 완료 (실제)
2025년 6월 1일
연구 완료 (추정된)
2025년 12월 31일
연구 등록 날짜
최초 제출
2024년 12월 5일
QC 기준을 충족하는 최초 제출
2024년 12월 5일
처음 게시됨 (실제)
2024년 12월 9일
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (실제)
2025년 6월 29일
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
2025년 6월 25일
마지막으로 확인됨
2025년 6월 1일
추가 정보
이 연구와 관련된 용어
추가 관련 MeSH 약관
기타 연구 ID 번호
- 2022_Brugnon_FERTIOVO
약물 및 장치 정보, 연구 문서
미국 FDA 규제 의약품 연구
아니
미국 FDA 규제 기기 제품 연구
아니
미국에서 제조되어 미국에서 수출되는 제품
아니
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