Bevarelse af kvinders fertilitet: Evaluering af innovative metoder til kryopræservering af ovarievæv (FERTIOVO)
25. juni 2025 opdateret af: University Hospital, Clermont-Ferrand
De seneste innovationer inden for kræftdiagnostik og -terapi har forbedret femårsoverlevelsen for patienter. Anticancerbehandlinger kan dog forringe patientens fertilitet; derfor anbefales fertilitetsbevarelse før behandlingsstart. Den eneste metode til at bevare unge præpubertære pigers fertilitet, som også kan bruges til pubertære kvinder, er ovarievævskryopreservation (OTC) med senere autotransplantation. Selvom 200 fødsler er blevet rapporteret på verdensplan efter OTC og transplantation, er der behov for betydelige forbedringer. Indfrysnings- og optøningsprotokoller varierer faktisk afhængigt af laboratorier (medier, kryobeskyttelsesmidler, frysekurve osv.), og udvælgelseskriterier er ikke berettigede. Derudover bruger de fleste laboratorier usikre enheder (f.eks. cryovials med skruelåg) til OTC, der udsætter ovarievæv for biologiske farer under prøveopbevaring i nitrogentanke. For at eliminere disse risici er nye "højsikkerheds"-enheder blevet kommercialiseret (svejsede kryorør). Selvom termisk svejsning kan ændre vævskvaliteten, er funktionaliteten af det menneskelige ovarievæv frosset med disse innovative enheder endnu ikke blevet evalueret. Formålet med vores undersøgelse er i) at optimere frysnings- og optøningsprotokollerne for human OTC i henhold til termodynamiske egenskaber af frysemediet og typen af enhed (svejset eller skruet kryorør) og ii) at bestemme, om typen af kryorør påvirker kvaliteten af humant ovarievæv.
Dette projekt vil gøre det muligt at opnå en bedre forståelse af virkningen af frysning på ovarievævsfunktionalitet, samt implementering af en optimal protokol for OTC inden for ART-laboratoriet på Clermont-Ferrand hospital for at optimere patientbehandlingen.
Studieoversigt
Status
Aktiv, ikke rekrutterende
Betingelser
Intervention / Behandling
Detaljeret beskrivelse
Formålet med dette projekt er at afgøre, om typen af kryogent rør (med skruelåg eller termoloddet) påvirker kvaliteten og funktionaliteten af ovarievæv efter kryokonservering.
Først vil en karakterisering af frysemediets termodynamiske egenskaber ved hjælp af et differentielt scanningkalorimeter (Diamond DSC, PerkinElmer) blive udført for at optimere fryse- og optøningsprotokoller.
Denne analyse vil definere vigtige parametre såsom krystallisationstemperatur (Tc), smeltetemperatur (Tm) og overgangstemperaturer (Tg'1).
Når fryse- og optøningsprotokollerne er optimeret, vil vi bruge human ovariecortex, der omgiver godartede cyster, en model, der tidligere er valideret af vores laboratorium, for at bestemme, om typen af kryorør påvirker kvaliteten af humant ovarievæv.
Disse ovariekortikale prøver, der normalt ødelægges på klinikker, deler lignende karakteristika med normal ovariebark.
Ovarievæv vil blive skåret i 1 mm3 fragmenter og opdelt i tre grupper: frisk ovarie cortex (gruppe 1, kontrol), ovarie cortex kryokonserveret i termoloddede kryogene rør (gruppe 2) eller i skruelåg (gruppe 3).
Vi vil vurdere ovarievævskvalitet umiddelbart efter resektion for gruppe 1 eller efter optøning for gruppe 2 og 3 ved at analysere follikeldensitet og morfologi (HES-farvning) og proliferation/apoptosebalance (Immunohistokemi (IHC) for KI67 og spaltet caspase 3).
For at vurdere funktionaliteten af ovarievævet efter optøning vil ovarie cortex fragmenter blive in vitro dyrket.
Vi vil analysere i) follikeltæthed, -type og -morfologi (HES-farvning), ii) proliferation/apoptose-balancen (IHC for KI67 og spaltet caspase 3), iii) ekspressionsniveauerne af store follikulogeneseregulatorer (IHC for GDF-9) og iv) niveauerne af follikulogenese-associerede hormoner (AMH, østrogen) udskilt i kultur medium.
Undersøgelsestype
Observationel
Tilmelding (Faktiske)
30
Kontakter og lokationer
Dette afsnit indeholder kontaktoplysninger for dem, der udfører undersøgelsen, og oplysninger om, hvor denne undersøgelse udføres.
Studiesteder
-
-
-
Clermont-Ferrand, Frankrig, 63100
- University Hospital
-
-
Deltagelseskriterier
Forskere leder efter personer, der passer til en bestemt beskrivelse, kaldet berettigelseskriterier. Nogle eksempler på disse kriterier er en persons generelle helbredstilstand eller tidligere behandlinger.
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
- Voksen
Tager imod sunde frivillige
Ingen
Prøveudtagningsmetode
Ikke-sandsynlighedsprøve
Studiebefolkning
Voksen kvinde er planlagt til godartet ovariecysteresektion i University Hospital Center i Clermont-Ferrand.
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- Voksen kvinde planlagt til godartet ovariecysteresektion (dermoide, funktionelle, mucinøse eller serøse cyster)
- Under 37 år og over 18 år
- I stand til at give skriftligt informeret samtykke til at deltage i forskningsstudiet
- Tilknyttet socialvæsen
Ekskluderingskriterier:
- Kvinder over 37 år og under 18 år
- Polycystisk ovariesyndrom
- Nedsat ovariereserve
- Svær endometriose
- Maligne og endometriecyster
Studieplan
Dette afsnit indeholder detaljer om studieplanen, herunder hvordan undersøgelsen er designet, og hvad undersøgelsen måler.
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Friske ovarie cortex fragmenter
Pericystisk ovariecortex vil blive skåret i 1 mm3 fragmenter og enten analyseret direkte på dagen for indsamling (D0) eller efter organotypisk dyrkning (D7 og D14).
|
|
|
Fragmenter af ovariebark frosset i termoloddede kryovialer.
Pericystisk ovariecortex vil blive skåret i 1 mm3 fragmenter, frosset ved hjælp af en langsom programmerbar fryseanordning (Nano Digitcool, Cryo Bio System) i termoloddede kryovaller og opbevaret i flydende nitrogen (-196°C).
Derefter vil fragmenter blive optøet før de analyseres på optøningsdagen (D'0) og efter 7 og 14 dage (D7 og D14) af organotypisk kultur.
|
Humant ovarievæv Kryokonservering: Umiddelbart efter cysteresektion skæres pericystisk ovariebark i 1 mm3 fragmenter og kryokonserveres i skruede eller termoloddede cryovials ved hjælp af en langsom programmerbar fryseanordning (Nano Digitcool, Cryo Bio System).
|
|
Fragmenter af ovariebark frosset i skruede cryovials.
Pericystisk ovariecortex vil blive skåret i 1 mm3 fragmenter, frosset ved hjælp af en langsom programmerbar fryseanordning (Nano Digitcool, Cryo Bio System) i skruede kryovials og opbevaret i flydende nitrogen (-196°C).
Derefter vil fragmenter blive optøet før de analyseres på optøningsdagen (D'0) og efter 7 og 14 dage (D7 og D14) af organotypisk kultur.
|
Humant ovarievæv Kryokonservering: Umiddelbart efter cysteresektion skæres pericystisk ovariebark i 1 mm3 fragmenter og kryokonserveres i skruede eller termoloddede cryovials ved hjælp af en langsom programmerbar fryseanordning (Nano Digitcool, Cryo Bio System).
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Morfologi efter optøning af æggestokkene
Tidsramme: 24 måneder
|
Follikelmorfologi af friske versus frosne (med termoloddede eller skruede cryovials)/optøet ovariecortex vil blive vurderet på serielle snit farvet med hæmatoxylin-eosin-saffron. Fragmenter vil blive fikseret på opsamlingsdagen for gruppe 1 og direkte efter optøning for gruppe 2 og 3. Morfologi af follikler vil blive evalueret i henhold til parametrene beskrevet af Keros et al.
Hum Reprod.
2009.
|
24 måneder
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Efter optøning Ovariefollikeldensitet
Tidsramme: 24 måneder
|
Follikeltæthed (=antal follikel/mm2) af friske versus frosne (med termoloddede eller skruede cryovials)/optøet ovariecortex vil blive vurderet på serielle snit farvet med hæmatoxylin-eosin-safron. Fragmenter fikseres på afhentningsdagen for gruppe 1 og umiddelbart efter optøning for gruppe 2 og 3.
|
24 måneder
|
|
Ovariefollikelstadiet efter organotypisk dyrkning
Tidsramme: 36 måneder
|
Follikelstadier (% af primordiale, primære, sekundære og antrale follikler) i friske versus frosne (med termoloddede eller skruede cryovials)/optøet ovariecortex vil blive vurderet på serielle snit farvet med hæmatoxylin-eosin-safron. Fragmenter vil blive fikseret efter 7 eller 14 dages organotypisk dyrkning.
|
36 måneder
|
|
Ovariefollikelmorfologi efter organotypisk dyrkning
Tidsramme: 36 måneder
|
Follikelmorfologi af friske versus frosne (med termoloddede eller skruede cryovials)/optøet ovariecortex vil blive vurderet på serielle snit farvet med hæmatoxylin-eosin-saffron. Fragmenter vil blive fikseret efter 7 eller 14 dages organotypisk dyrkning.
Morfologi af follikler vil blive evalueret i overensstemmelse med parametrene beskrevet af Keros et al.
Hum Reprod.
2009.
|
36 måneder
|
|
GDF-9-ekspression efter organotypisk dyrkning
Tidsramme: 36 måneder
|
procentdelen af GDF9 positive follikler (dvs. med en oocyt positiv for GDF-9) i friske og frosne (med termoloddede eller skruede cryovials)/optøet ovariebark vil blive vurderet på immunfarvede serielle snit.
Fragmenter vil blive fikseret efter 7 eller 14 dages organotypisk dyrkning.
|
36 måneder
|
|
Termodynamiske egenskaber af frysemediet
Tidsramme: 12 måneder
|
Et differentielt scanningkalorimeter (DiamondDSC, PerkinElmer) vil blive brugt til at bestemme krystallisationstemperaturen (Tc), smeltesluttemperaturen (Tm) og overgangstemperaturen (Tg'1) af frysemediet (Leibovitz med 4 mg/mL) HSA, 1,5 M DMSO og 0,1 M saccharose).
|
12 måneder
|
|
Post-optøning af æggestokkens follikelproliferation
Tidsramme: 24 måneder
|
Procentdelen af proliferative (oocyt- eller granulosa-celler, der er positive for KI-67 i frisk og frosset (med termosolderede eller skruede kryovials) /optøet ovariecortex, vil blive vurderet på immunfarvede serielle sektioner.
Fragmenter vil blive fastlagt på samlingsdagen for gruppe 1 og direkte efter optøning for gruppe 2 og 3.
|
24 måneder
|
|
Post-optøning af æggestokkens apoptose
Tidsramme: 24 måneder
|
Procentdelen af apoptotisk (oocyt- eller granulosa -celler positive spaltede caspase 3) i frisk og frosset (med termosolderede eller skruede kryovials) /optøet ovariecortex vil blive vurderet på immunfarvede serielle sektioner.
Fragmenter vil blive fastlagt på samlingsdagen for gruppe 1 og direkte efter optøning for gruppe 2 og 3.
|
24 måneder
|
|
Spredning efter organotypisk kultur
Tidsramme: 36 måneder
|
Procentdelen af proliferative (oocyt- eller granulosa-celler, der er positive for Ki-67) i frisk og frosset (med termosolderede eller skruede kryovials) /optøet ovariecortex, vil blive vurderet på immunfarvede serielle sektioner.
Fragmenter rettes efter 7 eller 14 dages organotypisk kultur.
|
36 måneder
|
|
Apoptose efter organotypisk kultur
Tidsramme: 36 måneder
|
Procentdelen af apoptotisk (oocyt- eller granulosa -celler positive spaltede caspase 3) i frisk og frosset (med termosolderede eller skruede kryovials) /optøet ovariecortex vil blive vurderet på immunfarvede serielle sektioner.
Fragmenter rettes efter 7 eller 14 dages organotypisk kultur.
|
36 måneder
|
|
AMH sekretion efter organotypisk kultur
Tidsramme: 36 måneder
|
AMH -niveauer vil blive kvantificeret i kulturmedium under organotypisk kultur af frisk og frosset (med termosolderede eller skruede kryovials) /optøet æggestokkekortex.
Kulturmedier høstes hver tredje dags kultur i 14 dage.
AMH kvantificeres ved elektrokemiluminescens
|
36 måneder
|
|
Østrogensekretion efter organotypisk kultur
Tidsramme: 36 måneder
|
Østrogenniveauer vil blive kvantificeret i kulturmedium under organotypisk kultur af frisk og frosset (med termosolderede eller skruede kryovials) /optøet æggestokkeskive.
Kulturmedier høstes hver tredje dags kultur i 14 dage.
Østrogen kvantificeres ved elektrokemiluminescens
|
36 måneder
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Det er her, du vil finde personer og organisationer, der er involveret i denne undersøgelse.
Efterforskere
- Ledende efterforsker: Florence BRUGNON, MD, PhD, University Hospital, Clermont-Ferrand
Datoer for undersøgelser
Disse datoer sporer fremskridtene for indsendelser af undersøgelsesrekord og resumeresultater til ClinicalTrials.gov. Studieregistreringer og rapporterede resultater gennemgås af National Library of Medicine (NLM) for at sikre, at de opfylder specifikke kvalitetskontrolstandarder, før de offentliggøres på den offentlige hjemmeside.
Studer store datoer
Studiestart (Faktiske)
5. maj 2022
Primær færdiggørelse (Faktiske)
1. juni 2025
Studieafslutning (Anslået)
31. december 2025
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
5. december 2024
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
5. december 2024
Først opslået (Faktiske)
9. december 2024
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Faktiske)
29. juni 2025
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
25. juni 2025
Sidst verificeret
1. juni 2025
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- 2022_Brugnon_FERTIOVO
Lægemiddel- og udstyrsoplysninger, undersøgelsesdokumenter
Studerer et amerikansk FDA-reguleret lægemiddelprodukt
Ingen
Studerer et amerikansk FDA-reguleret enhedsprodukt
Ingen
produkt fremstillet i og eksporteret fra U.S.A.
Ingen
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .