재발성 이식 실패 환자의 ERA에 따른 FET와 표준 타이밍을 비교한 RCT

시험 설계 이는 RIF가 있는 불임 여성의 임신율 개선에 있어 ERA 유도 냉동 배아 이식의 임상적 효과를 평가하는 다기관 무작위 이중 맹검 대조 시험입니다. 모든 참가자는 먼저 ERA에 대한 자궁내막 생검을 얻기 위해 생검 주기를 거친 후 무작위로 중재 그룹 또는 대조군에 배정됩니다. 이식 주기에서 중재 그룹의 참가자는 ERA 결과에 따라 냉동 배아 이식을 받게 되며, 대조군의 참가자는 표준 타이밍에 따라 냉동 배아 이식을 받게 됩니다.

선별, 모집 및 동의 RIF가 있는 여성은 중국 전역의 10개 병원에서 모집됩니다. 재발성 착상 실패는 신선 배아와 냉동 배아 모두 3회 배아 이식 후에도 임신에 실패하는 것으로 정의됩니다.3 포함 및 제외 기준은 표 1에 요약되어 있습니다.

표 1. 포함 및 제외 기준 포함 기준

1. RIF를 사용하는 여성
2. 40세 미만의 여성
3. 18.5(포함)~30(제외) kg/m² 사이의 여성 체질량 지수
4. 하나 이상의 고품질 냉동 배반포(BB 등급 이상)를 보유하고 있으며 단일 배반포 이식을 계획 중인 여성
5. 서면 동의를 제공할 여성

제외 기준

1. 반복적인 유산이 있는 여성(3회 이상의 생화학적 유산 또는 자연유산)
2. 균형 전좌를 포함하여 알려진 염색체 이상이 있는 파트너
3. 착상 전 유전자 검사를 받는 여성
4. IVF 주기에서 자궁내막 두께가 7mm 미만인 여성
5. 자궁강 형태에 영향을 미치는 III-IV기 자궁내막증 또는 자궁선근증 진단이 확인된 여성
6. 항인지질증후군 진단이 확인된 여성
7. 폴립, 점막하 근종, 4cm 이상의 벽내 근종 또는 난관수종을 포함하여 자궁강에 영향을 미치는 병리학

적격 여성은 모집 중 임상시험의 성격, 목적, 절차, 예상 기간, 잠재적 위험 및 이점, 발생할 수 있는 불편함에 대해 상담을 받게 됩니다. 참여는 자발적입니다. 모든 참가자는 서면 동의서에 서명해야 하며 동의 없이는 연구 관련 절차가 수행되지 않습니다.

연령, 키, 체중, 체질량 지수, 흡연 및 교육 수준을 포함하는 모든 참가자의 인구 통계 데이터가 기록됩니다. IVF 적응증, 이전 배아 이식 세부정보, 산부인과 기록, 이전 의료, 수술 또는 감염 기록을 포함하여 병력 및 신체 검사도 기록됩니다. 가능하다면 혈청 항뮐러관 호르몬 수치와 갑상선 기능 검사와 같은 기본 내분비 검사를 포함하는 실험실 검사 결과도 기록됩니다.

생검 주기 모든 참가자는 ERA 테스트를 위한 자궁내막 샘플을 얻기 위해 호르몬 치료 주기에 따라 생검 주기를 거칩니다. 경구 에스트라디올(Estrofem, Novo Nordisk A/S, Bagsværd 덴마크) 2mg을 하루 3회 월경 주기의 첫 번째 또는 두 번째 날에 10~15일 동안 시작하며 최대 22일입니다. 그런 다음 자궁내막 두께를 측정하기 위해 질경유 초음파를 실시하고 혈청 에스트라디올과 프로게스테론 수치를 확인하기 위해 혈액을 채취합니다. 자궁내막 두께가 7mm 이상인 경우, 혈청 에스트라디올 수치는 > 150 pg/ml(또는 500 pmol/ml)이고 혈청 프로게스테론 수치는 < 1 ng/ml(또는 3.18 nmol/L)인 경우, 경구용 디드로게스테론(Duphaston, Abbott, Illinois) , 미국) 10mg 1일 3회, 질 프로게스테론겔(Crinone) 8%, Merck KGaA, Darmstadt, Germany) 경구용 에스트라디올 외에 매일 90mg을 24시간 이내에 투여하기 시작합니다.

프로게스테론 P+0을 시작으로 연속 5일(120+3시간) 동안 프로게스테론을 사용한 후 외래 진료소에서 자궁내막 생검을 실시합니다. 자궁내막 검체는 중앙 실험실(Hangzhou Yizhen Medical Laboratory, Hangzhou Yizhen Medical Laboratory, 중국) ERA 테스트용입니다.

검체 수집 및 전달 자궁내막 생검은 무균 기술에 따라 ERA 키트에 제공된 피펠을 사용하여 수행됩니다. 플런지를 빼내 음압을 생성하고 자궁내막 조직 조각을 안저에서 내부 경추까지 수집합니다. 약 50~70mg의 조직 샘플이 수집됩니다.

자궁내막 샘플은 즉시 1.5ml의 RNA-later 안정제 액체가 들어 있는 냉동 튜브로 옮겨지며, 이는 실험실로 운반되는 동안 RNA가 분해되는 것을 방지합니다. RNA 분해를 방지하기 위해 샘플 내의 과도한 혈액이나 점액이 제거됩니다. 자궁내막 샘플이 들어 있는 수집 튜브를 흔들어서 RNA 용액과 자궁내막 샘플이 완전히 혼합되도록 합니다. 라벨링 후 채취관에 담긴 자궁내막 검체는 냉장고에 4℃에서 최소 4시간 동안 보관한 후 ERA를 위해 실온에서 중앙검사실로 운반됩니다.

자궁내막 수용성 분석 RNA-Seq 고처리량 시퀀싱 기술을 사용하여 자궁내막 수용성과 관련된 약 250개 유전자의 발현을 검출합니다. 분석된 샘플의 자궁내막 이식 창은 생물정보학 분석을 통해 얻을 수 있습니다.

이식 주기 참가자는 생검 주기 1~3개월 이내에 냉동 배아 이식을 받아야 합니다. 냉동 배아 이식은 생검 주기와 동일한 자궁내막 준비 요법을 사용하는 호르몬 치료 주기로 수행됩니다. 배아 이식 시기는 그룹 배정에 따라 결정됩니다. 중재군 참가자의 경우, 냉동배아 이식 시기는 ERA 결과에 따라 조정됩니다. 대조군의 경우, 냉동 배아 이식은 표준 시기, 즉 연속 프로게스테론 사용 5일 이후에 이루어집니다. 최고 품질의 배반포가 먼저 해동되어 옮겨집니다.

자궁내막 두께 측정, 혈청 프로게스테론 수치, 프로게스테론 시작 날짜 및 시간, 배아 이식 날짜 및 시간, 수정 방법 및 배아의 Gardner 등급 지정을 포함하여 이식 주기에 대한 세부 사항이 기록됩니다.

후속 조치 냉동 배아 이식 14일 후, 참가자는 혈청 베타 인간 융모성 성선 자극 호르몬(β-hCG), 에스트라디올 및 프로게스테론 수치에 대한 혈액 검사를 받게 됩니다. 참가자가 임신하지 않은 경우 연구는 종료됩니다.

참가자가 임신한 경우, 후속 조치는 산후 1주일까지 계속됩니다. 태아 수와 태아 심장 상태에 대한 초음파 소견은 배아 이식 후 5주와 10~12주에 기록됩니다. 산전 합병증, 분만 세부사항 및 신생아 정보도 기록됩니다. 연구는 산후 1주일 후 또는 추적 기간 동안 임신 소실이 발생한 경우 종료됩니다.

무작위화 및 눈가림 무작위화 무작위화는 자궁내막 샘플을 받은 후 ERA로 진행하기 전에 중국 Hangzhou Yizhen Medical Laboratory에서 수행됩니다. 여성은 중재군 또는 대조군에 1:1 비율로 무작위로 배정됩니다. 무작위화는 무작위 숫자표를 사용하여 센터와 여성 연령(<35세 대 ≥35세)에 따라 계층화됩니다.16 각 여성은 연구에 한 번만 포함되고 무작위 배정됩니다.

맹검 이것은 이중 맹검 연구이며 참가자나 연구자 모두 그룹 할당을 알지 못합니다. 각 참여 센터의 연구는 연구실에서 각 참가자의 권장 배아 이식 시간을 통보받게 됩니다. 보고서에는 다음과 같이 명시되어 있습니다. "이 여성은 P+X 시간에 냉동 배반포 이식을 받는 것이 좋습니다."

맹검 해제 맹검 해제는 참가자가 배아 이식 후 14일 동안 β-hCG, 에스트라디올 및 프로게스테론 수치에 대한 혈액 검사를 받을 때 발생합니다. 참가자와 연구자 모두에게 그룹 할당에 대한 정보가 제공됩니다. 임신하지 않은 대조군 참가자는 ERA 결과에 따라 후속 주기에서 남은 냉동 배반포를 교체하도록 선택할 수 있습니다.

연구 결과 일차 결과 일차 결과는 10~12주에 태아 박동이 있는 임신으로 정의되는 지속적인 임신율입니다.

2차 결과 2차 결과는 자궁내막 수용성 상태, 생화학적 임신율, 임상 임신율, 생화학적 유산율, 조기 유산율, 자궁외 임신율 및 정상 출산율입니다. 그 정의는 표 2에 나열되어 있습니다. 산과 결과에는 임신성 당뇨병, 자간전증, 전치 태반, 태반 조기 박리 및 분만 방식의 발생률이 포함됩니다. 신생아 결과에는 재태 연령, 출생 체중, Apgar 점수, 조산 비율, 기형 비율 및 신생아 사망률이 포함됩니다.

표본 크기 주요 결과 측정은 진행 중인 임신율이며, 이는 중재 그룹에서 35%, 대조군에서 25%로 예상됩니다. 양면 테스트 수준 α = 0.05 및 검정력(1-β) = 80%에서 PASS15 소프트웨어를 사용하고 Fisher의 정확한 테스트를 기반으로 계산된 표본 크기는 660명의 여성(개입 그룹에서는 330명, 대조군에서는 330명)입니다. ). 10%의 탈락률을 고려하면 총 734명의 참가자의 표본 크기가 필요합니다(개입 그룹 367명, 대조군 367명).

데이터 분석 전체 분석 세트, 프로토콜 세트별, 안전성 분석 세트가 분석됩니다. 전체 분석 세트는 최소 1회 이상의 테스트와 최소 1회의 유효성 평가를 받은 분을 의미합니다. 프로토콜 세트별은 프로토콜 지정 주기를 완료하고 심각한 프로토콜 위반이 없는 전체 분석 세트의 모든 사례를 나타냅니다. 안전성 세트란 등록 후 1회 이상 검사를 받고, 1회 이상의 안전성 평가를 받은 자를 말한다.

카운트 데이터는 빈도와 백분율로 표시되고 측정 데이터는 평균, 표준 편차, 중앙값, 최대값 및 최소값으로 표시됩니다. 다양한 그룹 간의 1차 및 2차 결과를 직접 비교합니다.

ERA 비수용성 결과에 따라 조정된 시기에 이식, ERA 비수용 결과에 따라 표준 시기에 이식, ERA 비수용 결과가 있는 여성의 표준 시기에 이식 등 세 그룹 간의 진행 중인 임신율도 비교됩니다.