Muskelavbildningsprosjekt ved bruk av anatopatologi og fullfelt optisk koherenstomografi (PIMANT)

Introduksjon Myositt representerer en gruppe inflammatoriske sykdommer som påvirker skjelettmuskulatur, karakterisert ved inflammatorisk infiltrasjon av muskelvev. Denne tilstanden kan ha ulike etiologier, som infeksjoner, autoimmune sykdommer (som dermatomyositt eller polymyositt), eller legemiddelinduserte sykdommer. Tidlig diagnose og nøyaktig vurdering av muskulinflammasjon er avgjørende for terapeutisk håndtering av disse pasientene.

Konvensjonelle analytiske teknikker, som histopatologi, tillater visualisering og analyse av muskelskader og inflammasjon ved hjelp av farging av histologiske snitt. Imidlertid krever denne metoden flere ukers arbeid før et resultat kan oppnås. Full-field optisk koherenstomografi (OCT), en ikke-invasiv bildeteknologi, kan tilby betydelige fordeler med hensyn til hastighet på undersøkelsen og oppløsning av muskelstrukturer, spesielt for visualisering av inflammatorisk infiltrasjon.

Dette forskningsprosjektet foreslår å sammenligne konvensjonell histopatologi og full-field optisk koherenstomografi for analyse av muskelbiopsier fra både friske individer og pasienter med mistenkt myositt.

Hovedmålet med denne prospektive og komparative studien vil være å først etablere en referansestandard ved å analysere kontrollbiopsier med begge metoder, og deretter på samme måte evaluere muskulinflammasjon påvist i bekreftede tilfeller av myositt. De respektive fordelene og begrensningene ved hver teknikk vil bli vurdert i påvisningen av denne patologien.

Forskningsmål

1. Å analysere den romlige oppløsningen til begge metoder for visualisering av histopatologiske detaljer på nivået av muskelfibre, bindevev og blodkar.
2. Å sammenligne evnen til konvensjonell histopatologi og full-field optisk koherenstomografi (OCT) til å påvise muskulinflammasjon i muskelbiopsier fra friske individer og pasienter med myositt.
3. Å evaluere begge teknikkers diagnostiske nøyaktighet i å identifisere inflammasjonsrelaterte abnormaliteter, som infiltrasjon av inflammatoriske celler (lymfocytter, makrofager), nedbrytning av muskelfibre og fibrose.
4. Å sammenligne anskaffelsestid og brukervennlighet for hver metode for analyse av muskelvev i kliniske omgivelser.

Hypoteser Full-field optisk koherenstomografi vil muliggjøre sanntidsvisualisering av inflammatorisk infiltrasjon og muskelavvik med mikroskopisk oppløsning, på en ikke-invasiv, rask og dynamisk måte.

Disse resultatene kan meget raskt komplementere de som er oppnådd ved anatopatologi, som har som mål å beskrive de klassiske histopatologiske aspektene ved myositt, som muskelnokrose, inflammatorisk infiltrasjon og fibrose.

Metodikk

1. Prøveutvelgelse

   • Pasientgrupper:

   • Gruppe 1 (friske pasienter): Muskelbiopsier fra omtrent ti friske voksne pasienter uten historie med muskulær, nevrodegenerativ eller inflammatorisk sykdom, som gjennomgår ortopedisk kirurgi. Aldersspennet bør være variabelt (18-90 år) for å være representativt for befolkningen og for å ta hensyn til naturlig aldersrelatert atrofi.
   • Gruppe 2 (pasienter med mistenkt myositt): Muskelbiopsier fra voksne pasienter som presenterer kliniske symptomer forenlig med myositt (muskelureterthet, smerte, muskelsvakhet) og klinisk mistanke bekreftet av andre diagnostiske tester (f.eks. serologi, EMG, klinisk undersøkelse).

   Friskt muskelvev vil bli oppnådd fra en reseksjon nødvendig under ortopedisk kirurgi. Dette kirurgiske avfallet utgjør ikke ekstra prøver.

   Biopsier for mistenkt myositt vil bli utført som en del av diagnostisk prosess og krever ingen ekstra prøvetaking.

   Et informasjonsark vil bli gitt til pasienten, og kirurgen vil innhente deres samtykke før prosedyren. Alle pasienter må være myndige, tilknyttet eller dekket av trygdesystemet, og ikke underlagt noen vergemål eller beskyttelsestiltak. Gravide kvinner og voksne som ikke er i stand til å gi samtykke, kan ikke inkluderes i forskningsprotokollen.

2. Konvensjonell anatopatologisk analyse

   • Prøver vil bli frosset i isopentan, oppbevart ved -80°C, og deretter transportert på tørris til Anatomopatologiavdelingen ved Hospices Civils de Lyon for snittmerking.
   • Histologisk farging av friskt vev: Tre standardfarginger vil bli utført på kontrollbiopsier (hematoxylin og eosin (H&E), Gomori-farging, fibertypebestemmelse) for å samle strukturelle og metabolske data.
   • Histologisk farging ved mistenkt myositt: De tre standardfargene vil også bli utført, samt farginger for inflammasjonsmarkører, nemlig hovedhistokompatibilitetskomplekset (HLA I, HLA DR), komplement (C5b9), autofagi (p62) og differensieringsklynger (CD56, CD31).

3. Full-field optisk koherenstomografi (OCT) analyse

   • Full-field OCT-teknologi tillater bildedanning med mikrometeroppløsning uten behov for forberedelse av prøven. OCT vil bli brukt til å avbilde muskelvevsprøver i sanntid, både strukturelt (FF-OCT) og dynamisk (DCI). En serie på 1 µm snitt vil bli anskaffet. Bildene vil deretter bli konvertert av en algoritme for å gjenskape hematoxylin- og eosinfarging.
   • OCT-bilder kan tillate visualisering av muskelfiberstruktur, omkringliggende bindevev og områder med inflammatorisk infiltrasjon.
4. Sammenligning av metoder Kvalitativ analyse: Bildene oppnådd med OCT vil bli visuelt sammenlignet med bilder oppnådd med konvensjonell histologi etter skanning av glassene. Denne sammenligningen vil bli utført av spesialiserte anatomipatologer for å evaluere hver metodes evne til å påvise muskelavvik og inflammasjon. En kunstig intelligens-algoritme kan brukes for å lette sammenligningen.
5. Forventede resultater Resultatene vil tillate oss å evaluere den kliniske verdien av OCT som en alternativ eller komplementær bildeteknologi til konvensjonell histopatologi. Hvis OCT viser seg effektiv for påvisning av muskulinflammasjon, kan det bli et verdifullt verktøy for ultrarask diagnose.