Mucomyst na wirusowe zapalenie wątroby typu C

Wpływ N-acetylocysteiny na stres oksydacyjny w przewlekłym wirusowym zapaleniu wątroby typu C

Cel:

Istnieją dowody sugerujące, że stres oksydacyjny odgrywa rolę w patologicznym mechanizmie progresji choroby w przewlekłym zakażeniu wirusem zapalenia wątroby typu C (HCV). To badanie przetestuje hipotezę, że N-acetylocysteina podawana przez jeden miesiąc zmniejszy stres oksydacyjny, a tym samym spowolni postęp choroby.

Tło:

Przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu C jest najczęstszą infekcją przenoszoną przez krew w Stanach Zjednoczonych. Średnio 230 000 nowych infekcji miało miejsce każdego roku w latach 80., chociaż od 1989 r. roczna liczba nowych infekcji spadła o ponad 80% do 36 000 w 1996 r.1,2,3 Ankieta CDC przeprowadzona w 2003 roku wykazała, że ​​liczba nowych przypadków rocznie spadła do 30 000,4 Trzecie badanie National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES III), przeprowadzone w latach 1988-1994, wykazało, że około 3,9 miliona (1,8%) Amerykanów zostało zakażonych HCV. W populacji ogólnej najwyższe wskaźniki zachorowań na HCV występują wśród osób w wieku 30-49 lat oraz wśród mężczyzn. W przeciwieństwie do rasowego/etnicznego wzorca ostrej choroby, u Afroamerykanów znacznie częściej występuje zakażenie HCV niż u rasy białej.5 Badania populacyjne wskazują, że 40% przewlekłych chorób wątroby jest związanych z zakażeniem HCV, co powoduje szacunkową śmierć od 8 000 do 10 000 osób rocznie. Według CDC szacunkowe koszty leczenia i utraty pracy związane z ostrymi i przewlekłymi chorobami wątroby związanymi z HCV przekraczają 600 milionów USD rocznie, a schyłkowa choroba wątroby związana z HCV jest najczęstszym wskazaniem do przeszczepienia wątroby u dorosłych.1

Po ostrym zakażeniu u większości osób rozwija się przewlekła infekcja HCV (75%-85%). 6 Przebieg przewlekłego zakażenia HCV jest podstępny, postępuje powoli, bez objawów i objawów fizycznych u większości pacjentów w ciągu pierwszych dwóch lub więcej dekad. Marskość rozwija się u 10-20% osób z przewlekłym zakażeniem HCV w okresie 20-30 lat, a rak wątrobowokomórkowy u 1-5%.7

HCV replikuje się w hepatocytach, ale nie jest bezpośrednio hepatotoksyczny. Limfocyty rozpoznają zainfekowane komórki i inicjują odpowiedź immunologiczną. W uszkodzeniu miąższu wątroby pośredniczą cytokiny zapalne, chociaż mechanizm progresji choroby nie jest do końca poznany. Jain i in. oraz Pratico i in. wykazali, że stres oksydacyjny może być czynnikiem progresji do zwłóknienia i marskości wątroby.8,9 Uważa się, że stres oksydacyjny występuje poprzez różne mechanizmy, w tym redukcję NAD do NADH, która powoduje zmianę redoks i hamowanie aktywności dehydrogenazy ksantynowej, co skutkuje przesunięciem utleniania puryn do oksydazy ksantynowej, promując w ten sposób wytwarzanie wolnych rodników tlenowych. Ubytek glutationu (GSH) stwierdzono również w przewlekłych chorobach wątroby, co upośledza obronę przed stresem oksydacyjnym.10 W kilku innych badaniach podjęto próbę oceny stresu oksydacyjnego związanego z HCV, ale do niedawna nie określono dokładnych markerów do oceny stresu oksydacyjnego. Badania próbujące leczyć przewlekły HCV kombinacją interferonu i przeciwutleniaczy były niejednoznaczne ze względu na brak możliwości odpowiedniego pomiaru stresu oksydacyjnego.11, 12

Guha i in. dyskutują, że przez długi czas ocena peroksydacji lipidów in vivo ograniczała się do tkankowych pomiarów alkanów, dialdehydu malonowego lub hydroksynonenalu, z których wszystkie mają poważne ograniczenia w dokładnej ocenie stresu oksydacyjnego. Roberts i współpracownicy odkryli serię nowych prostaglandyn, obecnie określanych jako F2-izoprostany, które są obecnie uważane za złoty standard oceny uszkodzeń oksydacyjnych in vivo. Te prostaglandyny powstają początkowo in situ przez utlenianie fosfolipidów zawierających kwas arachidonowy, a następnie są uwalniane przez działanie fosfolipazy. Można je zmierzyć w próbkach osocza lub moczu za pomocą spektrometrii masowej z chromatografią gazową lub testu ELISA.13-16 Ostatnio grupa dr Vallyathana z Wirginii Zachodniej wykazała, że ​​u spawaczy w stoczniach zwiększył się całkowity status przeciwutleniaczy, poziom peroksydazy glutationowej i izoprostanu, co jest zgodne ze stresem oksydacyjnym wtórnym do ich narażenia zawodowego.17

N-acetylocysteina (NAC) jest prekursorem zredukowanego GSH. Jest acetylowaną formą aminokwasu L-cysteiny i jest doskonałym źródłem grup sulfhydrylowych. W organizmie przekształca się w metabolity zdolne do stymulacji syntezy GSH, wspomagające detoksykację i działające bezpośrednio jako wymiatacze wolnych rodników. Jest stosowany klinicznie od ponad 30 lat, głównie jako monolit. Obecnie jest powszechnie stosowany do leczenia wstępnego w celu zapobiegania uszkodzeniu nerek wtórnemu do dożylnego barwnika u pacjentów z niewydolnością nerek. Jest również podstawą leczenia w przypadku przedawkowania acetaminofenu od lat 80. XX wieku. W tym okresie wykazano, że NAC jest bezpieczny bez żadnej znaczącej toksyczności lub skutków ubocznych.18 Inne badania wykazały, że NAC może zapobiegać apoptozie i promować przeżycie komórek. Zmniejsza dysfunkcję śródbłonka, zapalenie, zwłóknienie, erozję chrząstki i wydłużenie przeszczepu.19 Był również przydatny w poprawie uszkodzenia wątroby związanego z niedokrwieniem i reperfuzją, uszkodzenia wątroby związanego z kokainą i metanolem.20-23

Biorąc pod uwagę powyższe informacje, warto byłoby ocenić wyjściowy stres oksydacyjny u chorych na wirusowe zapalenie wątroby typu C i odnotować ewentualne zmiany po 6-miesięcznej kuracji NAC. Jak dotąd nie przeprowadzono badań prospektywnych, które oceniałyby wyjściowy stres oksydacyjny u pacjentów z WZW typu C w trakcie leczenia interferonem i bez niego, z oceną F2-izoprostanu i obserwowano markery laboratoryjne po leczeniu NAC.

Projekt badawczy:

Dziesięciu pacjentów z HCV potwierdzonym metodą PCR, niebędących w trakcie leczenia, zostanie zrekrutowanych z populacji pacjentów kliniki VA GI. Dane podstawowe zostaną zebrane z wykresów i kwestionariusza. U wszystkich pacjentów zostanie pobrana krew do podstawowych badań czynnościowych wątroby, w tym ferrytyny w surowicy, izoprostanu w surowicy, akonitazy w surowicy, glutationu w osoczu (GSH), peroksydazy glutationowej (GPx) i całkowitego statusu antyoksydacyjnego (TAS). Testy te zostaną powtórzone u każdego pacjenta po 15 dniach i 1 miesiącu przyjmowania NAC w dawce 1000 mg doustnie dwa razy dziennie. Testy zostaną ponownie powtórzone 30 dni po zaprzestaniu przyjmowania badanego leku. mRNA Hep c będzie mierzone na linii podstawowej i po 30 dniach. Protokół badania zostanie wyjaśniony pacjentowi, a świadoma zgoda zostanie uzyskana przed włączeniem do badania. Z tytułu kosztów podróży i czasu wolontariuszy na początku i na końcu badania zostanie przyznane 25 USD za udział.

Kryteria włączenia będą następujące: Ochotnicy zostaną podzieleni na 2 grupy: zdrowych pacjentów i pacjentów HCV nieprzyjmujących interferonu. Kryteriami wykluczającymi będą: istotnie zdekompensowana marskość wątroby klasy C Childa, pacjenci z objawami masy wątroby lub rakiem wątrobowokomórkowym. Pacjenci w ciąży lub przyjmujący przeciwutleniacze, takie jak witamina E lub witamina C, również zostaną wykluczeni. Wykluczeni będą również pacjenci ze stwierdzoną alergią na N-acetylocysteinę

Obliczenie wielkości próbki:

Ponieważ każdy pacjent będzie swoją własną kontrolą (zmniejszając potencjalne zamieszanie związane z wiekiem,

palenie, medycyna, styl życia itp.) zakładając wariancję 5% w systemie testowym biomarkerów, 15 pacjentów da 90% mocy, aby zobaczyć 10% lub więcej różnic w łącznym poziomie biomarkerów utleniających.

Analizy statystyczne:

Dla każdego pacjenta zostaną zebrane wyjściowe dane demograficzne (wiek, płeć) i kliniczne (objawy, klasyfikacja dziecięca). Dane te zostaną porównane między trzema grupami przy użyciu testu t-Studenta dla zmiennych ciągłych oraz testów chi-kwadrat lub dokładnych testów Fishera dla zmiennych nieparametrycznych. Zmierzone wartości laboratoryjne w trzech grupach, dla linii podstawowej i po N-acetylocysteinie, zostaną porównane za pomocą sparowanego testu t.