Wpływ donosowego podawania insuliny na tkankową wrażliwość na insulinę (NASO-PET)

Celem tego badania jest zbadanie wpływu insuliny podawanej donosowo w porównaniu z placebo na tkankowo specyficzny wychwyt glukozy przez kluczowe narządy metaboliczne, jak również na endogenną produkcję glukozy.

WIELKOŚĆ PRÓBKI:

Planuje się włączenie w sumie dziesięciu (n=10) zdrowych mężczyzn, a badanie zostanie przeprowadzone w układzie naprzemiennym, w którym każdy uczestnik będzie badany dwukrotnie, raz z użyciem insuliny donosowej i raz z użyciem donosowego placebo w losowej kolejności z pojedynczą ślepą próbą .

WIZYTA PROJEKCYJNA/KWALIFIKOWALNOŚĆ:

Główne kryteria włączenia i wykluczenia zostaną ocenione podczas wizyty przesiewowej. Wizyta ta będzie obejmować często pobierany doustny test obciążenia 75 g glukozy, a także pomiary antropometryczne i badanie kliniczne.

WIZYTY STUDYJNE ZWIERZĄT:

W dniach badania PET zostaną wprowadzone dwie kaniule, jedna w żyle promieniowej lub przedłokciowej do wstrzyknięcia znacznika i wlewu glukozy i insuliny, druga w przeciwległej żyle promieniowej lub przedłokciowej w celu pobrania krwi. Ramię, z którego pobierane są próbki, będzie utrzymywane w cieple w celu uzyskania arterializowanej krwi żylnej. Pacjenci podczas badania będą odpoczywać w pozycji leżącej na łóżku skanera PET/CT.

HIPERINSULINEMICZNY ZACISK EUGLIKEMICZNY:

Wrażliwość całego ciała na insulinę zostanie oceniona za pomocą hiperinsulinemicznego klamry euglikemicznej z szybkością wstępnego wlewu insuliny 0,25 mU/kg/min. W celu utrzymania poziomu glukozy na poziomie 5,0 mmol/l dożylny wlew glukozy jest podawany indywidualnie w razie potrzeby w celu utrzymania euglikemii.

PODANIE SPRAYU DO NOSA:

Po 30 minutach dożylnego wlewu insuliny, pacjenci otrzymają donosowo 160 IU insuliny ludzkiej lub placebo. Niewielka ilość insuliny, o której wiadomo, że została wchłonięta do krążenia po podaniu insuliny w aerozolu do nosa, zostanie naśladowana w dniu placebo. Dlatego pacjentom zostanie podane 2,5 mU/kg dodatkowej insuliny dożylnej w ciągu 15 minut razem z podawaniem sprayu placebo.

PRÓBKI LABORATORYJNE:

Aby zweryfikować porównywalne poziomy insuliny w krążeniu podczas badania, poziomy insuliny i peptydu C w surowicy będą oznaczane na czczo i wielokrotnie przez cały czas trwania eksperymentu.

OŚLEPIAJĄCY:

Lekarz klinicysta i pielęgniarka badająca są świadomi, jaki spray jest podawany, ale osoby badane są zaślepione, a dodatkowy wlew insuliny w dniu placebo jest wykonywany w taki sposób, że osoby badane pozostają zaślepione. Spraye są podawane w losowej kolejności. Kod randomizacji został wygenerowany przez statystyka używającego SAS, wersja 9.3 dla Windows. Rozmiar bloku randomizacji wynosił cztery, a metodą była randomizacja bloków permutowanych. Randomizację przeprowadzono dla 16 pacjentów w przypadku przerwania leczenia.

ZMIENNOŚĆ RYTMU SERCA:

Rejestruje się zmienność rytmu serca w celu oceny zmian w aktywności autonomicznego układu nerwowego po podaniu sprayu podczas obu wizyt. Używany jest monitor pracy serca Polar RS800CX (Polar Electro Ltd., Kempele, Finlandia) z dwiema elektrodami.

OBRAZOWANIE FDG-PET:

70 minut po rozpoczęciu zaciskania i 40 minut po zastosowaniu aerozoli do nosa, rozpoczyna się skanowanie pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) z wstrzyknięciem analogowego znacznika glukozy znakowanego emitującym pozytrony fluorem-18 ([18F]-fluorodeoksyglukoza, [ 18F]-FDG). Zastosowano PET/CT, GE DiscoveryTM ST System (General Electric Medical Systems, Milwaukee, WI, USA) z końcową rozdzielczością 3,75 mm w obrazach PET. Wszystkie dane zostaną skorygowane pod kątem czasu martwego, rozpadu i zmierzonego tłumienia fotonów. Dynamiczne skany PET będą rekonstruowane metodą rekonstrukcji iteracyjnej. Radioznacznik [18F]-FDG jest produkowany w laboratorium radiochemicznym Centrum PET. Radioaktywność osocza jest mierzona za pomocą automatycznego licznika gamma przez technologa medycznego w laboratorium Centrum PET w Turku (Wizard 1480 3, Wallac, Turku, Finlandia).

ANALIZA OBRAZU PET:

W celu określenia tkankowo-specyficznego wychwytu glukozy podczas stymulacji insuliną z danych PET, krzywe czas-aktywność-aktywność tkanki i aktywność zmierzona z osocza podczas skanowania są analizowane graficznie w celu określenia ułamkowego wychwytu znacznika (Ki). Aby obliczyć szybkość wychwytu glukozy (podawana jako µmol/kg/min), Ki mnoży się przez poziom glukozy w osoczu, dzieli się przez stałą, która uwzględnia różnice w szybkości transportu i defosforylacji między D-glukozą a FDG (stała skupiona, LC) i podzielone ciężarem właściwym tkanki. Na podstawie wcześniejszych badań LC wynosi 1,2 dla mięśni szkieletowych; 1,0 dla serca i wątroby; 1,14 dla tkanki tłuszczowej; 1,1 dla jelit i 0,8 dla mózgu. Po badaniu PET/CT zostanie pobrana próbka moczu w celu ilościowego określenia endogennej produkcji glukozy (EGP). Zostanie to określone przez odjęcie utraty moczu i szybkości wlewu glukozy od szybkości zanikania glukozy.