Efeitos da Administração Intranasal de Insulina na Sensibilidade à Insulina Específica do Tecido (NASO-PET)

O objetivo deste estudo é investigar os efeitos da insulina administrada por via intranasal versus placebo na absorção de glicose específica do tecido dos principais órgãos metabólicos, bem como na produção endógena de glicose.

TAMANHO DA AMOSTRA:

Um total de dez (n = 10) homens saudáveis ​​está planejado para ser incluído, e o estudo é conduzido com um desenho cruzado com cada sujeito sendo investigado duas vezes, uma vez usando insulina intranasal e uma vez usando placebo intranasal em ordem randomizada simples-cega .

VISITA DE TRIAGEM/ELEGIBILIDADE:

Os principais critérios de inclusão e exclusão serão avaliados em uma visita de triagem. Esta visita incluirá um teste de tolerância oral à glicose de 75 g com amostra frequente, bem como medições antropométricas e exame clínico.

VISITAS DE ESTUDO DE ANIMAIS DE ESTIMAÇÃO:

Nos dias do estudo PET serão inseridas duas cânulas, uma na veia radial ou antecubital para injeção do traçador e infusão de glicose e insulina, outra na veia radial oposta ou antecubital para coleta de sangue. O braço onde serão coletadas as amostras será mantido aquecido para obtenção de sangue venoso arterializado. Os indivíduos ficarão em posição supina na cama do scanner PET/CT durante o estudo.

GRAMPO EUGLICÊMICO HIPERINSULINEMICO:

A sensibilidade à insulina de corpo inteiro será avaliada por clamp euglicêmico hiperinsulinêmico com uma taxa de infusão de insulina preparada de 0,25 mU/kg/min. Para manter o nível de glicose em 5,0 mmol/l, a infusão intravenosa de glicose é administrada individualmente conforme necessário para manter a euglicemia.

ADMINISTRAÇÃO DO SPRAY NASAL:

Após 30 minutos de infusão intravenosa de insulina, os indivíduos receberão 160 UI de insulina humana ou placebo por via intranasal. A pequena quantidade de insulina conhecida por ser absorvida na circulação após o spray nasal de insulina será imitada no dia do placebo. Portanto, os indivíduos receberão 2,5 mU/kg de insulina intravenosa adicional durante 15 minutos juntamente com a administração de spray de placebo.

AMOSTRAS DE LABORATÓRIO:

Para verificar níveis comparáveis ​​de insulina em circulação durante o estudo, os níveis séricos de insulina e peptídeo C serão determinados em jejum e repetidamente ao longo do experimento.

CEGANDO:

O clínico e a enfermeira do estudo estão cientes de qual spray é administrado, mas os sujeitos são cegos e a infusão adicional de insulina no dia do placebo é feita de forma que os sujeitos permaneçam cegos. As pulverizações são dadas em ordem aleatória. O código de randomização foi gerado por um estatístico usando SAS, versão 9.3 para Windows. O tamanho do bloco de randomização foi de quatro e o método foi randomização de blocos permutados. A randomização foi feita para 16 indivíduos em caso de interrupções.

VARIABILIDADE DO BATIMENTO CARDÍACO:

A variabilidade da frequência cardíaca é registrada para avaliar as mudanças na atividade do sistema nervoso autônomo após a administração do spray em ambas as visitas. É usado o monitor de frequência cardíaca Polar RS800CX (Polar Electro Ltd., Kempele, Finlândia) com dois eletrodos.

FDG-PET-IMAGEM:

70 minutos após o início do clamp e 40 minutos após a aplicação de sprays nasais, a tomografia por emissão de pósitrons (PET) é iniciada com a injeção de rastreador análogo de glicose marcado com flúor-18 emissor de pósitrons ([18F]-fluorodesoxiglicose, [ 18F]-FDG). PET/CT, GE DiscoveryTM ST System (General Electric Medical Systems, Milwaukee, WI, EUA) com resolução final de 3,75 mm em imagens PET é usado. Todos os dados serão corrigidos para tempo morto, decaimento e atenuação de fóton medida. PET-scans dinâmicos serão reconstruídos com método de reconstrução iterativa. O radiotraçador [18F]-FDG é produzido no laboratório de radioquímica do PET Center. A radioatividade do plasma é medida com um contador gama automático por um tecnólogo médico no laboratório do Turku PET Center (Wizard 1480 3", Wallac, Turku, Finlândia).

ANÁLISE DE IMAGEM DE PET:

Para determinar a absorção de glicose específica do tecido durante a estimulação de insulina a partir de dados de PET, as curvas tempo-atividade da atividade do tecido e a atividade medida do plasma durante a varredura são analisadas graficamente para definir a absorção fracionada do traçador (Ki). Para calcular a taxa de absorção de glicose (relatada como µmol/kg/min), Ki é multiplicado pelo nível de glicose plasmática, dividido por uma constante que explica as diferenças nas taxas de transporte e desfosforilação entre D-glicose e FDG (constante concentrada, LC) e dividido com a gravidade específica do tecido. Com base em estudos anteriores, o CL é de 1,2 para o músculo esquelético; 1,0 para coração e fígado; 1,14 para tecido adiposo; 1,1 para intestino e 0,8 para cérebro. Após o PET/CT será coletada uma amostra de urina para quantificar a produção endógena de glicose (EGP). Isso será determinado subtraindo a perda de urina e a taxa de infusão de glicose da taxa de desaparecimento da glicose.