Kontrola otwarcia mPTP za pomocą pomiarów ex vivo na permeabilizowanych włóknach mięśniowych (COMMEF) (COMMEF)

Rozwój nowej wiedzy specjalistycznej w badaniu mPTP jest częścią podejścia do optymalizacji przetwarzania próbek mięśni. Celem pracy jest ocena wykonalności i powtarzalności metody analizy włókien mięśniowych tylko przepuszczalnych, przy jednoczesnym połączeniu dwóch uzupełniających się technik, oksygrafii i fluorymetrii. Jego zasada opiera się na wiedzy, że otwarcie mPTP prowadzi do zahamowania oddychania na poziomie kompleksu I łańcucha oddechowego. Inhibicja ta jest konsekwencją ucieczki z mitochondriów zredukowanej formy dinukleotydu nikotynoamidoadeninowego (NADH, czyli substratu kompleksu I) towarzyszącej otwarciu mPTP. Zatem oksygrafia musi pozwalać na obserwację zahamowania oddychania równoznacznego z niedostępnością substratu kompleksu I, a więc pośrednio odzwierciedlać otwarcie mPTP. Ze swej strony fluorymetria musi umożliwiać, w obecności fluorescencyjnego wskaźnika wapnia (tj. Calcium Green), obserwacja uwalniania wapnia równoznaczna z otwarciem mPTP.

Po zatwierdzeniu technika ta powinna umożliwić ocenę in situ wrażliwości mPTP na wapń. W kontekście zastosowania w protokołach klinicznych ocena wrażliwości na wapń mPTP powinna przyczynić się do lepszego zrozumienia fizjologicznych i fizjopatologicznych mechanizmów adaptacji tkanki mięśniowej.