Suspensão autóloga de queratinócitos versus suspensão de queratinócitos de células-tronco derivadas de tecido adiposo para área cruenta pós-queimadura

Lesões por queimaduras são feridas complicadas de lidar com uma taxa de mortalidade relativamente alta em queimaduras de grandes áreas e pacientes idosos.

Danos substanciais nos tecidos e extensa perda de fluidos podem causar comprometimento das funções vitais da pele. Quando a cicatrização é retardada, as possíveis complicações comuns de curto prazo incluem infecção da ferida que afeta o processo de cicatrização local ou respostas inflamatórias e imunológicas sistêmicas que subsequentemente podem causar sepse com risco de vida e falência de múltiplos órgãos.

Felizmente, as taxas de sobrevivência melhoraram drasticamente ao longo do último século devido aos avanços no tratamento de queimaduras, como intervenção cirúrgica precoce, suporte de cuidados intensivos e tratamento de feridas.

Por muitos anos, o "padrão ouro" para o tratamento de feridas de pacientes queimados foi o transplante com enxerto autólogo de pele dividida. Em pacientes com queimaduras extensas, os locais doadores podem ser limitados. Para cobrir todas as feridas, os pacientes geralmente precisam de várias operações e/ou a pele deve ser expandida o máximo possível.

No entanto, as diferentes técnicas de expansão e tratamentos atuais [malha e Meek-Wall] freqüentemente levam à formação de cicatrizes, especialmente nos intersites de grandes telas.

A taxa de fechamento da ferida depende da rapidez com que as células epidérmicas migram para fora do enxerto automático em malha e/ou bordas da ferida para fechar a ferida. Acelerar a reepitelização poderia potencialmente melhorar o resultado do processo de cicatrização em termos de redução da formação de tecido de granulação, reduzindo o tempo de cicatrização e, assim, reduzindo o risco de colonização e infecção, bem como a formação de cicatrizes.

Desde que os casos clínicos foram tratados pela primeira vez com sucesso com camadas epiteliais cultivadas, as folhas de queratinócitos tornaram-se uma ferramenta importante no tratamento de queimaduras. No entanto, a aplicação clínica pode ser limitada pelo longo tempo de cultura e fragilidade das lâminas de queratinócitos. Há, portanto, uma demanda clínica por outras opções para cobrir grandes áreas de queimaduras na ausência de áreas doadoras viáveis.

Um novo conceito consiste em tratar feridas com suspensões de células epiteliais. Em 1998, Fraulin et al. desenvolveram um método de espalhar a suspensão de células em feridas usando um spray de aerossol em um modelo suíno.

O uso de suspensões de queratinócitos não cultivados foi relatado pela primeira vez por Hunyadi et al., mostrando que um grupo de pacientes com queimaduras ou úlceras crônicas nas pernas, tratados com matriz de fibrina contendo queratinócitos, cicatrizaram completamente, ao contrário do grupo controle.

Em modelos de feridas porcinas, as suspensões de queratinócitos não cultivadas demonstraram acelerar a cicatrização de feridas, melhorar a qualidade da epitelização e restaurar a população de melanócitos, em comparação com o respectivo grupo controle.

As principais vantagens no uso de suspensões de células não cultivadas são uma redução drástica do tempo de preparo e, possivelmente, um manuseio mais fácil em comparação com as folhas de queratinócitos. Particularmente, a qualidade da cicatriz pode ser melhorada aumentando a velocidade de epitelização e o desbotamento dos padrões de malha em enxertos de pele divididos.

Por outro lado, terapias baseadas em células-tronco ganharam interesse como uma abordagem promissora para aumentar a regeneração tecidual.

As células-tronco são caracterizadas por sua multipotência e capacidade de autorrenovação. Seu potencial terapêutico se deve em grande parte à capacidade de secretar citocinas pró-regenerativas, tornando-os uma opção atraente para o tratamento de feridas crônicas.

Células-tronco de várias fontes estão atualmente sendo testadas em ensaios pré-clínicos e clínicos por sua capacidade de acelerar a cicatrização de feridas e a regeneração de tecidos. Esses estudos não apenas provaram que a terapia com células-tronco autólogas é tolerada com segurança, mas também demonstraram resultados clínicos positivos.

Segundo a Sociedade Internacional de Terapia Celular, as células-tronco mesenquimais são definidas pela capacidade de aderir a uma superfície plástica, pela expressão dos marcadores de superfície CD73, CD90 e CD105, pela ausência de expressão dos marcadores hematopoiéticos CD14, CD34, CD45, CD11b/CD79 e CD19/HLA-DR, e por sua capacidade de se diferenciar ao longo das vias osteoblástica, adipocítica e condrocítica.

Isoladas de tecidos, incluindo medula óssea, tecido adiposo, sangue do cordão umbilical, tecido nervoso e derme, as MSCs foram administradas sistemicamente e localmente para o tratamento de feridas cutâneas.18 Embora as células-tronco mesenquimais tenham mostrado baixos níveis de incorporação de longo prazo em feridas em cicatrização, um crescente corpo de pesquisa sugere que seu benefício terapêutico é atribuído à liberação de mediadores tróficos, em vez de uma contribuição estrutural direta.19 Através da liberação de fator de crescimento endotelial vascular, fator-1 derivado de células estromais, fator de crescimento epidérmico, fator de crescimento de queratinócitos, fator de crescimento semelhante à insulina e metaloproteinase-9 da matriz, as células-tronco mesenquimais promovem a formação de novos vasos, recrutam células progenitoras endógenas, e diferenciação celular direta, proliferação e formação de matriz extracelular durante o reparo de feridas.

As células-tronco mesenquimais também exibem propriedades imunomoduladoras importantes por meio da secreção de interferon-λ, fator de necrose tumoral-α, interleucina-1α e interleucina-1β, bem como pela ativação da sintase de óxido nítrico induzível. A secreção de células-tronco mesenquimais de prostaglandina E2 regula ainda mais a fibrose e a inflamação, promovendo a cicatrização do tecido com cicatrização reduzida.

Finalmente, as células-tronco mesenquimais exibem propriedades bactericidas através da secreção de fatores antimicrobianos e regulando positivamente a morte bacteriana e a fagocitose por células imunes.

As células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo são uma população pluripotente e heterogênea de células presentes no tecido adiposo humano.

No entanto, o isolamento de células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo é prontamente realizado usando aspirados de lipoaspiração ou amostras de gordura excisadas, que podem ser obtidas com morbidade mínima do doador.

As células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo podem ser diferenciadas em linhagens celulares adipogênicas, condrogênicas, miogênicas e osteogênicas em resposta a estímulos específicos. Alternativamente, células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo podem ser imediatamente administradas sem expansão in vitro ou diferenciação em cultura.

O rendimento celular extraordinariamente alto do lipoaspirado (até 1 x 107 células de 300 ml de lipoaspirado com pelo menos 95% de pureza), em comparação com a aspiração de medula óssea, torna as células-tronco mesenquimais derivadas de Adipose uma fonte celular particularmente atraente para o tratamento agudo ajuste da ferida.