尿 NGF 作为急性细菌性膀胱炎的生物标志物

复发性尿路感染是泌尿妇科临床实践中一个非常麻烦和普遍的问题。 根据国际泌尿妇科协会（IUGA）/国际尿控协会（ICS）关于女性盆底功能障碍术语的联合报告，复发性尿路感染被定义为在过去 12 个月内至少有 3 次有症状且经医学诊断的尿路感染。 在诊断出进一步的 UTI 之前，先前的 UTI 应该已经解决。 复发性尿路感染是女性盆底功能障碍最常见的诊断之一。

复发性 UTI 患者也可能有膀胱刺激症状。 先前的研究表明，复发性 UTI 患者的尿液 NGF 升高，表明这些患者在 UTI 消退后的膀胱中存在慢性炎症。 研究人员的初步结果表明，慢性炎症、尿路上皮细胞凋亡和尿路上皮细胞屏障功能受损可能是女性复发性尿路感染的潜在病理生理学。 UTI消退后，膀胱壁可能存在慢性炎症，这也可能导致尿路上皮功能障碍和屏障功能缺陷，这些患者UTI容易复发。 这一证据为复发性尿路感染的临床管理和未来研究提供了新的焦点。

基于这些知识，研究人员假设慢性炎症可能存在于膀胱壁中，这也可能导致尿路上皮功能障碍和屏障功能缺陷。 在这些残留有慢性膀胱炎症的患者中，UTI 可能很容易复发。 如果研究人员能够确定急性膀胱炎发作后慢性炎症完全消退，则有可能通过用抗炎药治疗炎症来抑制复发性膀胱炎。

神经生长因子 (NGF) 是一种小的分泌蛋白，可诱导特定靶神经元的分化和存活。 NGF 被认为是病理学诱导的 C 纤维传入神经兴奋性和反射性膀胱活动变化的化学介质。 在脊髓损伤（SCI）后膀胱中神经营养因子（包括 NGF）水平升高，在 SCI 后大鼠腰骶脊髓和背根神经节中检测到 NGF 水平升高。 将 NGF 长期注入大鼠膀胱会诱导膀胱过度活跃并增加分离的膀胱传入神经元的放电频率。 在表现出膀胱过度活动症 (OAB) 症状的 BOO 患者中也检测到尿 NGF 水平升高。 在间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征 (IC/PBS) 患者中观察到膀胱组织 NGF 增加。 最近的研究集中在检测下尿路功能障碍 (LUTD) 中 OAB 和 IC/PBS 的尿液 NGF 水平。 有证据表明，患有 OAB、感觉紧迫感和逼尿肌过度活跃 (DO) 的患者的尿蛋白（例如 NGF 和前列腺素 E2）水平升高。 与对照组和膀胱感觉增加的患者相比，干性 OAB 和湿性 OAB 患者的尿液 NGF 水平显着升高。 尿 NGF 水平在正常受试者的排尿冲动中以小规模生理性增加，但在膀胱体积小和有紧迫感的 OAB 患者中以病理性大规模增加。 抗毒蕈碱治疗后尿液 NGF 水平降低，并且在难治性 OAB 中注射逼尿肌肉毒杆菌毒素后进一步降低。 总之，尿 NGF 水平似乎是诊断 OAB 和潜在慢性炎症的潜在生物标志物。

包括细菌性膀胱炎、输尿管下段结石和尿路上皮细胞癌在内的几种泌尿系统疾病可能会出现类似于 OAB 或 IC/PBS 的贮积症状。 在这些疾病中，尿 NGF 水平也会升高。 在之前的研究中，研究人员发现 UTI 可能会增加与尿路结石相关的尿液中 NGF 的产生。 UTI 消退但 OAB 持续存在的患者可能具有高尿液 NGF 水平。 这些结果提供了尿 NGF 是泌尿道炎症产物的证据。 因此，尿液 NGF 可被视为尿路上皮损伤或尿路上皮环境变化引发感觉神经兴奋并引起膀胱超敏反应或 DO 后的二线产品。 测量尿 NGF 是一种非侵入性工具，可用于评估慢性炎症状态和纵向比较治疗。

有必要了解急性膀胱炎发作时尿NGF水平是否也会升高，其产生与抗生素治疗后不同阶段的相关贮积症状有关。 本研究旨在测量急性膀胱炎患者和抗生素治疗后不同阶段的尿液NGF水平。 如果尿 NGF 水平与膀胱壁的潜在炎症有关，研究人员可能会将其用作生物标志物来确定炎症消退的状态，并让医生决定研究人员应治疗急性膀胱炎患者多长时间。

材料和方法

这项研究将招募 30 名首次患有 UTI 的女性患者和 30 名患有复发性 UTI（最近 12 个月内至少有两次 UTI 发作）但最近有急性发作的女性患者。 十名年龄匹配的女性（30 至 50 岁）将被邀请作为对照，她们之前没有任何 UTI 或泌尿道病理学病史。 将在基线、抗生素治疗后 7 天以及 UTI 发作后 2 周、4 周、8 周和 12 周收集患者的尿液样本。 将在每次访视时进行尿液分析，并且将在基线以及 2 周和 3 个月的访视时进行尿培养。 将从对照中收集基线和 3 个月时的尿液样本用于比较。

所有患者都应通过在尿液分析中检测脓尿（WBC>10/高倍视野）来证明患有尿路感染，并且尿液培养结果呈阳性。 此外，将进行肾脏、输尿管和膀胱 (KUB) 胶片和肾脏超声检查，以排除尿路结石或其他泌尿道病变的可能性。 将要求在每次访问时记录一天的排尿日记，以确定每天的功能性膀胱容量 (FBC) 和频率发作。 膀胱症状将通过膀胱过度活动症状评分 (OABSS) 和视觉模拟疼痛量表 (VAS) 进行记录。 此外，还将在第 2 次就诊时测量尿流率，包括最大流速 (Qmax)、排尿量和排尿后残余量 (PVR)。基线时和治疗后每次就诊时的尿液样本将在舒适充盈的膀胱中收集并送去NGF 测量。 将在基线开始使用抗生素（头孢氨苄 500mg Q6H）1 至 2 周，直至尿液分析证实为阴性且尿液培养转为阴性。 然后，在急性膀胱炎完全消退后，将随机开出抗菌剂（Baktar 800mg h.s.）或抗炎剂（Celecoxib 200mg QD）用于 UTI 预防 3 个月。 所有患者将接受长达一年的随访，以监测他们是否发生复发性 UTI。

所有尿液样本都将在膀胱充盈和自然排尿的情况下收集。 尿液 NGF 水平的测量将通过 ELISA 方法进行。 尿样未稀释。 立即将排空的尿液置于冰上并在 4°C 下以 3000 g 离心 10 分钟。 上清液在 1.5 mL 试管中分成等份，并保存在 -80 °C 冰箱中。 同时取尿3mL测定尿肌酐水平。 使用 Emax 免疫测定系统（Promega，麦迪逊，威斯康星州，美国）和特异性且高度灵敏的 ELISA 试剂盒测定尿液 NGF 浓度，其最低灵敏度为 7.8 pg/mL。 从NGF标准曲线中提取尿样中NGF的量低于NGF测定的检测限。 所有样品将一式三份运行，将重复三次测量中没有一致值的尿液 NGF 水平，并将值取平均值。 总尿 NGF 水平通过尿肌酐浓度（NGF/Cr 水平）进一步标准化。 比较所有亚组的 NGF/Cr 水平。

统计分析将通过配对 t 检验对连续时间点的配对数据进行。 Mann-Whitney 检验将用于不同亚组之间的非参数分析。 小于 0.05 的 P 值被认为是显着的。

预期成绩

研究人员假设，与首次 UTI 患者相比，复发性 UTI 患者的尿液 NGF 水平可能持续升高。 在急性膀胱炎发作后有持续性 OAB 症状的患者中，尿 NGF 水平将保持升高，并且可能在 3 个月后持续高于对照组。 与服用抗微生物药物的患者相比，接受抗炎药物治疗的患者在 3 个月就诊时的尿液 NGF 水平可能较低。 接受抗菌药物治疗的患者在接下来的一年内复发性 UTI 的发生率可能高于接受抗炎药物治疗的患者。