Urinaire NGF als biomarker voor acute bacteriële cystitis

Terugkerende urineweginfecties zijn een zeer vervelend en populair probleem in de urogynaecologische klinische praktijk. Volgens het gezamenlijk rapport van de International Urogynecological Association (IUGA)/International Continence Society (ICS) over de terminologie voor bekkenbodemdisfunctie bij vrouwen, wordt recidiverende UTI gedefinieerd als ten minste drie symptomatische en medisch gediagnosticeerde UWI's in de voorgaande 12 maanden. De eerdere UTI('s) zouden moeten zijn verdwenen voordat een nieuwe UTI wordt gediagnosticeerd. Terugkerende UTI is een van de meest voorkomende diagnoses voor bekkenbodemdisfunctie bij vrouwen.

Patiënten met terugkerende urineweginfecties kunnen ook symptomen van irritatie van de blaas hebben. Eerdere studies hebben aangetoond dat patiënten met recidiverende urineweginfecties een verhoogde NGF in de urine hebben, wat suggereert dat chronische ontsteking aanwezig is in de blaas van deze patiënten na het verdwijnen van de urineweginfectie. De voorlopige resultaten van de onderzoekers toonden aan dat chronische ontsteking, apoptose van urotheelcellen en aantasting van de barrièrefunctie van urotheelcellen de onderliggende pathofysiologie zouden kunnen zijn van recidiverende urineweginfecties bij vrouwen. Chronische ontsteking kan zich in de blaaswand bevinden nadat de urineweginfectie is verdwenen, wat ook urotheliale disfunctie en een defecte barrièrefunctie kan veroorzaken en de urineweginfectie zal bij deze patiënten gemakkelijk terugkeren. Dit bewijs biedt een nieuwe focus voor klinisch management en toekomstig onderzoek naar recidiverende urineweginfecties.

Op basis van deze kennis veronderstelden de onderzoekers dat chronische ontsteking in de blaaswand zou kunnen zitten, wat ook urotheliale disfunctie en defecte barrièrefunctie zou kunnen veroorzaken. UTI kan gemakkelijk terugkeren bij deze patiënten met resterende chronische blaasontsteking. Als de onderzoekers kunnen vaststellen dat de chronische ontsteking volledig is verdwenen na een episode van acute cystitis, is het mogelijk om recidiverende cystitis te remmen door de ontsteking te behandelen met ontstekingsremmende middelen.

Zenuwgroeifactor (NGF) is een klein uitgescheiden eiwit dat de differentiatie en overleving van bepaalde doelneuronen induceert. NGF is betrokken als een chemische bemiddelaar van door pathologie geïnduceerde veranderingen in prikkelbaarheid van de afferente zenuw van de C-vezel en reflexblaasactiviteit. De niveaus van neurotrofe factoren, waaronder NGF-toename in de blaas na ruggenmergletsel (SCI) en verhoogde niveaus van NGF, zijn gedetecteerd in het lumbosacrale ruggenmerg en dorsale wortelganglion van ratten na SCI. Chronische toediening van NGF in de blaas van ratten induceert hyperactiviteit van de blaas en verhoogt de vuurfrequentie van gedissocieerde blaas-afferente neuronen. Verhoogde niveaus van NGF in de urine zijn ook gedetecteerd bij BOO-patiënten die symptomen van overactieve blaas (OAB) vertonen. Verhoogd blaasweefsel-NGF werd opgemerkt bij patiënten met interstitiële cystitis/pijnlijke blaassyndroom (IC/PBS). Recent onderzoek heeft zich gericht op de NGF-spiegels in de urine bij het detecteren van OAB en IC/PBS bij disfunctie van de lagere urinewegen (LUTD). Er zijn aanwijzingen dat urine-eiwitten zoals NGF en prostaglandine E2-spiegels toenemen bij patiënten met OAB, sensorische urgentie en detrusoroveractiviteit (DO). Patiënten met OAB-dry en OAB-wet hebben significant hogere urinaire NGF-spiegels in vergelijking met de controlegroep en patiënten met een verhoogd blaasgevoel. De urinaire NGF-spiegels stijgen fysiologisch op kleine schaal bij de normale proefpersonen met aandrang om te plassen, maar stijgen pathologisch op grote schaal bij OAB-patiënten bij een klein blaasvolume en bij aandrangsensatie. De urinaire NGF-spiegels nemen af ​​na antimuscarinetherapie en nemen verder af na detrusorbotulinumtoxine-injecties bij refractaire OAB. Alles bij elkaar lijken de NGF-spiegels in de urine een potentiële biomarker te zijn voor de diagnose van OAB en de onderliggende chronische ontsteking.

Verschillende urologische ziekten, waaronder bacteriële cystitis, onderste uretersteen en urotheelcelcarcinoom, kunnen opslagsymptomen ontwikkelen die lijken op OAB of IC/PBS. De urinaire NGF-spiegels zijn ook verhoogd bij deze aandoeningen. In de vorige studie ontdekten de onderzoekers dat UTI de NGF-productie in urine geassocieerd met urinewegstenen kan verhogen. Patiënten bij wie de urineweginfectie is verdwenen, maar ook bij aanhoudende OAB, kunnen hoge NGF-spiegels in de urine hebben. Deze resultaten leveren het bewijs dat urinaire NGF een product is van ontsteking in de urinewegen. Daarom kan NGF in de urine worden beschouwd als een tweedelijnsproduct na beschadiging van het urotheel of veranderingen in de urotheliale omgeving die prikkeling van de sensorische zenuw initiëren en overgevoeligheid van de blaas of DO veroorzaken. Het meten van urinaire NGF is een niet-invasief hulpmiddel om de chronische ontstekingsstatus te beoordelen en voor longitudinale vergelijking van de behandeling.

Het is essentieel om te weten of de urinaire NGF-spiegels ook kunnen stijgen tijdens een acute cystitis-episode en of de productie een relatie heeft met de bijbehorende stapelingssymptomen in verschillende stadia na behandeling met antibiotica. Deze studie is opgezet om de NGF-spiegels in de urine te meten bij patiënten met acute cystitis en verschillende stadia na behandeling met antibiotica. Als de urinaire NGF-spiegels verband houden met de onderliggende ontsteking in de blaaswand, kunnen de onderzoekers het gebruiken als een biomarker om de status van het verdwijnen van de ontsteking te bepalen en artsen te laten beslissen hoe lang de onderzoekers patiënten met acute cystitis moeten behandelen.

Materialen en methodes

Deze studie zal 30 vrouwelijke patiënten inschrijven met de eerste keer UTI en 30 vrouwelijke patiënten met recidiverende UTI (ten minste twee eerdere UTI-episodes in de laatste 12 maanden) maar hebben een recente acute episode. Tien vrouwen van dezelfde leeftijd (30 tot 50 jaar oud) zonder enige voorgeschiedenis van UTI of urinewegpathologie zullen worden uitgenodigd om als controlegroep te dienen. Urinemonsters zullen worden verzameld bij de patiënten bij baseline, 7 dagen na behandeling met antibiotica en 2 weken, 4 weken, 8 weken en 12 weken na de UTI-episode. Urineonderzoek zal bij elk bezoek worden uitgevoerd en er zal een urinekweek worden uitgevoerd bij aanvang en bij de bezoeken van 2 weken en 3 maanden. Urinemonsters bij baseline en na 3 maanden zullen ter vergelijking worden verzameld bij de controles.

Van alle patiënten moet worden bewezen dat ze UTI hebben door pyurie te detecteren in urineonderzoek (WBC> 10 per hoogvermogenveld) en een positief resultaat van de urinekweek te hebben. Bovendien zullen een nier-, urineleider- en blaasfilm (KUB) en nier-echografie worden uitgevoerd om de mogelijkheid van urolithiasis of andere urinewegpathologie uit te sluiten. Bij elk bezoek zal worden gevraagd om het eendaagse mictiedagboek bij te houden om de functionele blaascapaciteit (FBC) en frequentie-episodes per dag te bepalen. Blaassymptomen worden geregistreerd door de Overactive Bladder Symptom Score (OABSS) en de visuele analoge pijnschaal (VAS). Daarnaast zal uroflowmetrie, inclusief maximale stroomsnelheid (Qmax), volume van de mictie en restvolume na de mictie (PVR) ook worden gemeten bij bezoek 2. Urinemonsters bij aanvang en elk bezoek na de behandeling zullen worden verzameld bij een comfortabel volle blaas en worden opgestuurd voor onderzoek. NGF-metingen. Antibiotica (Cephalexin 500 mg Q6H) gedurende 1 tot 2 weken zal worden gestart bij de basislijn totdat de urineanalyse negatief bleek en de urinekweek negatief bleek te zijn. Vervolgens wordt een antimicrobieel middel (Baktar 800 mg h.s.) of een ontstekingsremmend middel (Celecoxib 200 mg eenmaal daags) willekeurig voorgeschreven voor UTI-profylaxe gedurende 3 maanden nadat de acute cystitis volledig is verdwenen. Alle patiënten zullen gedurende maximaal een jaar worden gevolgd om te controleren of ze terugkerende urineweginfecties hebben.

Alle urinemonsters worden verzameld met een volle blaas en natuurlijke urinelozing. Meting van NGF-spiegels in de urine zal worden uitgevoerd met de ELISA-methode. Urinemonsters worden niet verdund. Geloosde urine wordt onmiddellijk op ijs gezet en gedurende 10 minuten bij 4 ◦C bij 3000 g gecentrifugeerd. Het supernatant wordt gescheiden in aliquots in buisjes van 1,5 ml en bewaard in een vriezer van -80 °C. Tegelijkertijd wordt 3 ml urine afgenomen om de creatininespiegels in de urine te meten. Urine NGF-concentratie wordt bepaald met behulp van het Emax ImmunoAssay-systeem (Promega, Madison, Wisconsin, VS) met een specifieke en zeer gevoelige ELISA-kit, die een minimale gevoeligheid van 7,8 pg/ml heeft. De hoeveelheid NGF in urinemonsters valt onder de detectielimieten van de NGF-test werd geëxtraheerd uit een NGF-standaardcurve. Alle monsters worden in drievoud uitgevoerd, NGF-niveaus in de urine zonder een consistente waarde in drie metingen worden herhaald en de waarden worden gemiddeld. De totale NGF-spiegels in de urine worden verder genormaliseerd door de concentratie van creatinine in de urine (NGF/Cr-spiegel). De NGF/Cr-niveaus worden vergeleken tussen alle subgroepen.

Statistische analyses zullen worden uitgevoerd door een gepaarde t-test voor gepaarde gegevens op opeenvolgende tijdstippen. Mann-Whitney-test zal worden gebruikt voor niet-parametrische analyse tussen verschillende subgroepen. Een P-waarde van minder dan 0,05 wordt als significant beschouwd.

verwachte resultaten

De onderzoekers veronderstelden dat patiënten met recidiverende urineweginfecties aanhoudend verhoogde NGF-spiegels in de urine kunnen hebben in vergelijking met patiënten met de eerste keer urineweginfecties. De urinaire NGF-spiegels blijven verhoogd bij patiënten met aanhoudende OAB-symptomen na een acute cystitis-episode en kunnen na 3 maanden aanhoudend hoger zijn dan de controles. Patiënten die worden behandeld met een ontstekingsremmend middel kunnen na een bezoek van 3 maanden lagere NGF-spiegels in de urine hebben in vergelijking met degenen die antimicrobiële middelen gebruiken. De incidentie van recidiverende urineweginfecties in het volgende jaar kan meer zijn bij patiënten die worden behandeld met antimicrobiële middelen dan bij patiënten die worden behandeld met ontstekingsremmende middelen.