NGF urinaire comme biomarqueur de la cystite bactérienne aiguë

Les infections urinaires récurrentes sont un problème très gênant et populaire dans la pratique clinique de l'urogynécologie. Selon le rapport conjoint de l'Association internationale d'urogynécologie (IUGA) et de l'International Continence Society (ICS) sur la terminologie du dysfonctionnement du plancher pelvien féminin, une infection urinaire récurrente est définie comme au moins trois infections urinaires symptomatiques et médicalement diagnostiquées au cours des 12 derniers mois. Les infections urinaires précédentes doivent avoir disparu avant qu'une autre infection urinaire ne soit diagnostiquée. Les infections urinaires récurrentes sont l'un des diagnostics les plus courants de dysfonctionnement du plancher pelvien féminin.

Les patients atteints d'infections urinaires récurrentes peuvent également présenter des symptômes d'irritation de la vessie. Des études antérieures ont révélé que les patients atteints d'infections urinaires récurrentes ont un NGF urinaire élevé, ce qui suggère qu'une inflammation chronique est présente dans la vessie de ces patients après la résolution de l'infection urinaire. Les résultats préliminaires des chercheurs ont montré que l'inflammation chronique, l'apoptose des cellules urothéliales et l'altération de la fonction de barrière des cellules urothéliales pourraient être la physiopathologie sous-jacente des infections urinaires récurrentes chez les femmes. L'inflammation chronique pourrait résider dans la paroi de la vessie après la résolution de l'UTI, ce qui pourrait également entraîner un dysfonctionnement urothélial et une fonction de barrière défectueuse et l'UTI sera facile à récidiver chez ces patients. Ces preuves fournissent une nouvelle orientation pour la gestion clinique et les recherches futures sur les infections récurrentes des voies urinaires.

Sur la base de ces connaissances, les chercheurs ont émis l'hypothèse que l'inflammation chronique pourrait résider dans la paroi de la vessie, ce qui pourrait également entraîner un dysfonctionnement urothélial et une fonction de barrière défectueuse. Les infections urinaires pourraient être faciles à récidiver chez ces patients présentant une inflammation chronique résiduelle de la vessie. Si les chercheurs peuvent déterminer la résolution complète de l'inflammation chronique après un épisode de cystite aiguë, il est possible d'inhiber la cystite récurrente en traitant l'inflammation avec des agents anti-inflammatoires.

Le facteur de croissance nerveuse (NGF) est une petite protéine sécrétée qui induit la différenciation et la survie de neurones cibles particuliers. Le NGF a été impliqué en tant que médiateur chimique des changements induits par la pathologie dans l'excitabilité nerveuse afférente à la fibre C et l'activité réflexe de la vessie. Les niveaux de facteurs neurotrophiques, y compris l'augmentation de NGF dans la vessie après une lésion de la moelle épinière (SCI) et des niveaux accrus de NGF ont été détectés dans la moelle épinière lombo-sacrée et le ganglion de la racine dorsale de rats après une SCI. L'administration chronique de NGF dans la vessie de rats induit une hyperactivité de la vessie et augmente la fréquence de déclenchement des neurones afférents dissociés de la vessie. Des niveaux accrus de NGF urinaire ont également été détectés chez des patients BOO présentant des symptômes d'hyperactivité vésicale (OAB). Une augmentation du NGF tissulaire de la vessie a été notée chez les patients atteints de cystite interstitielle/syndrome de la vessie douloureuse (IC/PBS). Des recherches récentes se sont concentrées sur les niveaux de NGF urinaires dans la détection de l'hyperactivité vésicale et de l'IC/PBS dans le dysfonctionnement des voies urinaires inférieures (LUTD). Des preuves ont montré que les protéines urinaires telles que les taux de NGF et de prostaglandine E2 augmentent chez les patients atteints d'hyperactivité vésicale, d'urgence sensorielle et d'hyperactivité du détrusor (OD). Les patients atteints d'hyperactivité vésicale sèche et d'hyperactivité vésicale humide ont des taux de NGF urinaire significativement plus élevés par rapport au groupe témoin et aux patients présentant une sensation vésicale accrue. Les niveaux de NGF urinaire augmentent physiologiquement à petite échelle chez les sujets normaux à l'envie d'uriner mais augmentent pathologiquement à grande échelle chez les patients OAB à petit volume de vessie et à la sensation d'urgence. Les taux urinaires de NGF diminuent après un traitement antimuscarinique et diminuent davantage après des injections de toxine botulique dans le détrusor dans l'hyperactivité vésicale réfractaire. Ensemble, les taux de NGF urinaire semblent être un biomarqueur potentiel pour le diagnostic de l'hyperactivité vésicale et de l'inflammation chronique sous-jacente.

Plusieurs maladies urologiques, notamment la cystite bactérienne, les calculs urétéraux inférieurs et le carcinome à cellules urothéliales, peuvent développer des symptômes de stockage imitant l'hyperactivité vésicale ou l'IC/PBS. Les taux urinaires de NGF sont également élevés dans ces troubles. Dans l'étude précédente, les enquêteurs ont découvert que les infections urinaires pouvaient augmenter la production de NGF dans l'urine associée aux calculs des voies urinaires. Les patients avec une résolution de l'IU mais aussi avec une vessie hyperactive persistante peuvent avoir des niveaux élevés de NGF urinaire. Ces résultats fournissent la preuve que le NGF urinaire est un produit de l'inflammation dans les voies urinaires. Par conséquent, le NGF urinaire peut être considéré comme un produit de deuxième ligne après une lésion urothéliale ou des changements de l'environnement urothélial qui initient l'excitation nerveuse sensorielle et provoquent une hypersensibilité vésicale ou DO. La mesure du NGF urinaire est un outil non invasif pour évaluer l'état inflammatoire chronique et pour la comparaison longitudinale du traitement.

Il est essentiel de savoir si les taux urinaires de NGF peuvent également augmenter lors d'un épisode de cystite aiguë et si la production a une relation avec les symptômes de stockage associés à différents stades après un traitement antibiotique. Cette étude est conçue pour mesurer les taux urinaires de NGF chez les patients atteints de cystite aiguë et à différents stades après un traitement antibiotique. Si les taux de NGF urinaire sont associés à l'inflammation sous-jacente de la paroi de la vessie, les chercheurs pourraient l'utiliser comme biomarqueur pour déterminer l'état de résolution de l'inflammation et permettre aux médecins de décider pendant combien de temps les chercheurs devraient traiter les patients atteints de cystite aiguë.

Matériaux et méthodes

Cette étude recrutera 30 patientes avec une première infection urinaire et 30 patientes avec une infection urinaire récurrente (au moins deux épisodes antérieurs d'infection urinaire au cours des 12 derniers mois) mais qui ont un épisode aigu récent. Dix femmes appariées selon l'âge (30 à 50 ans) sans aucun antécédent d'infection urinaire ou de pathologie des voies urinaires seront invitées à servir de témoins. Des échantillons d'urine seront prélevés chez les patients au départ, 7 jours après le traitement antibiotique, et 2 semaines, 4 semaines, 8 semaines et 12 semaines après l'épisode d'infection urinaire. Une analyse d'urine sera effectuée à chaque visite et une culture d'urine sera effectuée au départ et aux visites de 2 semaines et de 3 mois. Des échantillons d'urine au départ et à 3 mois seront prélevés sur les témoins à des fins de comparaison.

Il faut prouver que tous les patients ont une infection urinaire en détectant une pyurie dans l'analyse d'urine (WBC> 10 par champ de puissance élevée) et ont eu un résultat de culture d'urine positif. De plus, un film du rein, de l'uretère et de la vessie (KUB) et une échographie rénale seront effectués pour exclure la possibilité d'une lithiase urinaire ou d'une autre pathologie des voies urinaires. Le journal mictionnel d'une journée sera demandé à enregistrer à chaque visite pour déterminer la capacité fonctionnelle de la vessie (FBC) et la fréquence des épisodes par jour. Les symptômes de la vessie seront enregistrés par le score des symptômes de la vessie hyperactive (OABSS) et l'échelle visuelle analogique de la douleur (EVA). De plus, l'urodébitmétrie, y compris le débit maximal (Qmax), le volume vidé et le volume résiduel post-mictionnel (PVR) seront également mesurés lors de la visite 2. Des échantillons d'urine au départ et à chaque visite après le traitement seront prélevés à une vessie confortablement pleine et envoyés pour Mesures NGF. Les antibiotiques (Céphalexine 500 mg Q6H) pendant 1 à 2 semaines seront commencés au départ jusqu'à ce que l'analyse d'urine se révèle négative et que la culture d'urine devienne négative. Ensuite, un agent antimicrobien (Baktar 800 mg h.s.) ou un agent anti-inflammatoire (Celecoxib 200 mg QD) sera prescrit au hasard pour la prophylaxie des infections urinaires pendant 3 mois après la résolution complète de la cystite aiguë. Tous les patients seront suivis jusqu'à un an pour vérifier s'ils présentent une infection urinaire récurrente.

Tous les échantillons d'urine seront prélevés avec une vessie pleine et une miction naturelle. La mesure des taux urinaires de NGF sera effectuée par la méthode ELISA. Les échantillons d'urine ne sont pas dilués. L'urine évacuée est immédiatement mise sur glace et centrifugée à 3000 g pendant 10 min à 4 ◦C. Le surnageant est séparé en aliquotes dans des tubes de 1,5 mL et conservé dans un congélateur à -80 ◦C. En même temps, 3 ml d'urine sont prélevés pour mesurer les taux de créatinine urinaire. La concentration urinaire de NGF est déterminée à l'aide du système Emax ImmunoAssay (Promega, Madison, Wisconsin, États-Unis) avec un kit ELISA spécifique et très sensible, qui a une sensibilité minimale de 7,8 pg/mL. La quantité de NGF dans les échantillons d'urine tombant en dessous des limites de détection du dosage du NGF a été extraite d'une courbe standard de NGF. Tous les échantillons seront exécutés en triple, les niveaux de NGF urinaire sans valeur cohérente dans trois mesures seront répétés et les valeurs seront moyennées. Les taux de NGF urinaire total sont ensuite normalisés par la concentration de créatinine urinaire (taux de NGF/Cr). Les taux de NGF/Cr sont comparés entre tous les sous-groupes.

Les analyses statistiques seront effectuées par un test t apparié pour des données appariées à des moments consécutifs. Le test de Mann-Whitney sera utilisé pour l'analyse non paramétrique entre différents sous-groupes. Une valeur P inférieure à 0,05 est considérée comme significative.

Résultats attendus

Les enquêteurs ont émis l'hypothèse que les patients atteints d'infections urinaires récurrentes peuvent avoir des taux de NGF urinaire constamment élevés par rapport à ceux qui en sont à leur première infection urinaire. Les taux urinaires de NGF resteront élevés chez les patients qui présentent des symptômes persistants d'hyperactivité vésicale après un épisode de cystite aiguë et pourraient être constamment plus élevés que les témoins après 3 mois. Les patients traités avec un agent anti-inflammatoire pourraient avoir des taux de NGF urinaire plus faibles lors de la visite de 3 mois par rapport à ceux qui prennent des antimicrobiens. L'incidence des infections urinaires récurrentes au cours de l'année suivante pourrait être plus élevée chez les patients traités avec des antimicrobiens que chez ceux traités avec des agents anti-inflammatoires.