NGF urinario como biomarcador de cistitis bacteriana aguda

La ITU recurrente es un problema muy molesto y popular en la práctica clínica de uroginecología. Según el informe conjunto de la Asociación Internacional de Uroginecología (IUGA) y la Sociedad Internacional de Continencia (ICS) sobre la terminología de la disfunción del suelo pélvico femenino, la ITU recurrente se define como al menos tres ITU sintomáticas y diagnosticadas médicamente en los 12 meses anteriores. Las ITU anteriores deberían haberse resuelto antes de que se diagnostique una ITU adicional. La ITU recurrente es uno de los diagnósticos más comunes para la disfunción del piso pélvico femenino.

Los pacientes con UTI recurrente también pueden tener síntomas de irritación de la vejiga. Estudios previos han revelado que los pacientes con UTI recurrente tienen NGF urinario elevado, lo que sugiere que la inflamación crónica está presente en la vejiga de estos pacientes después de la resolución de la UTI. Los resultados preliminares de los investigadores mostraron que la inflamación crónica, la apoptosis de las células uroteliales y el deterioro de la función de barrera de las células uroteliales podrían ser la fisiopatología subyacente de las infecciones urinarias recurrentes en las mujeres. La inflamación crónica puede residir en la pared de la vejiga después de la resolución de la ITU, lo que también puede causar disfunción urotelial y función de barrera defectuosa, y la ITU será fácil de reaparecer en estos pacientes. Esta evidencia proporciona un nuevo enfoque para el manejo clínico y la investigación futura de la infección urinaria recurrente.

Sobre la base de estos conocimientos, los investigadores plantearon la hipótesis de que la inflamación crónica podría residir en la pared de la vejiga, lo que también podría causar disfunción urotelial y función de barrera defectuosa. La UTI podría ser fácil de reaparecer en estos pacientes con inflamación vesical crónica residual. Si los investigadores pueden determinar la resolución completa de la inflamación crónica después de un episodio de cistitis aguda, es posible inhibir la cistitis recurrente mediante el tratamiento de la inflamación con agentes antiinflamatorios.

El factor de crecimiento nervioso (NGF) es una pequeña proteína secretada que induce la diferenciación y la supervivencia de determinadas neuronas diana. El NGF ha sido implicado como un mediador químico de los cambios inducidos por la patología en la excitabilidad del nervio aferente de la fibra C y la actividad de la vejiga refleja. Los niveles de factores neurotróficos, incluido el aumento de NGF en la vejiga después de una lesión de la médula espinal (SCI) y los niveles aumentados de NGF, se han detectado en la médula espinal lumbosacra y el ganglio de la raíz dorsal de ratas después de SCI. La administración crónica de NGF en la vejiga de ratas induce hiperactividad de la vejiga y aumenta la frecuencia de descarga de las neuronas aferentes disociadas de la vejiga. También se han detectado niveles elevados de NGF urinario en pacientes con BOO que presentan síntomas de vejiga hiperactiva (OAB). Se observó un aumento del NGF en el tejido de la vejiga en pacientes con cistitis intersticial/síndrome de vejiga dolorosa (IC/PBS). Investigaciones recientes se han centrado en los niveles de NGF en orina para detectar OAB y IC/PBS en la disfunción del tracto urinario inferior (LUTD). Las evidencias han demostrado que las proteínas urinarias como el NGF y los niveles de prostaglandina E2 aumentan en pacientes con vejiga hiperactiva, urgencia sensorial e hiperactividad del detrusor (DO). Los pacientes con OAB-seca y OAB-wet tienen niveles de NGF urinario significativamente más altos en comparación con el grupo de control y los pacientes con aumento de la sensación de vejiga. Los niveles urinarios de NGF aumentan fisiológicamente a pequeña escala en sujetos normales con urgencia de orinar, pero aumentan patológicamente a gran escala en pacientes con OAB con un volumen vesical pequeño y con sensación de urgencia. Los niveles urinarios de NGF disminuyen después de la terapia antimuscarínica y disminuyen aún más después de las inyecciones de toxina botulínica en el detrusor en la OAB refractaria. En conjunto, los niveles de NGF en orina parecen ser un biomarcador potencial para el diagnóstico de OAB y la inflamación crónica subyacente.

Varias enfermedades urológicas, como la cistitis bacteriana, los cálculos ureterales inferiores y el carcinoma de células uroteliales, pueden desarrollar síntomas de almacenamiento que simulan la OAB o IC/PBS. Los niveles urinarios de NGF también están elevados en estos trastornos. En el estudio anterior, los investigadores encontraron que la UTI puede aumentar la producción de NGF en la orina asociada con cálculos en el tracto urinario. Los pacientes con resolución de UTI pero también con OAB persistente pueden tener niveles elevados de NGF en orina. Estos resultados proporcionan evidencia de que el NGF urinario es un producto de la inflamación en el tracto urinario. Por lo tanto, el NGF urinario se puede considerar como un producto de segunda línea después de un daño urotelial o cambios en el entorno urotelial que inician la excitación del nervio sensorial y causan hipersensibilidad vesical o DO. La medición del NGF urinario es una herramienta no invasiva para evaluar el estado inflamatorio crónico y para la comparación longitudinal del tratamiento.

Es fundamental saber si los niveles urinarios de NGF también pueden aumentar en el episodio de cistitis aguda y si la producción tiene relación con los síntomas de almacenamiento asociados en diferentes etapas después del tratamiento con antibióticos. Este estudio está diseñado para medir los niveles de NGF en orina en pacientes con cistitis aguda y diferentes etapas después del tratamiento con antibióticos. Si los niveles urinarios de NGF están asociados con la inflamación subyacente en la pared de la vejiga, los investigadores podrían usarlo como un biomarcador para determinar el estado de resolución de la inflamación y permitir que los médicos decidan cuánto tiempo deben tratar los investigadores a los pacientes con cistitis aguda.

Materiales y métodos

Este estudio inscribirá a 30 pacientes con ITU por primera vez y 30 pacientes con ITU recurrente (al menos dos episodios de ITU anteriores en los últimos 12 meses) pero que tengan un episodio agudo reciente. Se invitará a diez mujeres de la misma edad (de 30 a 50 años) sin antecedentes de UTI o patología del tracto urinario a servir como controles. Se recolectarán muestras de orina en los pacientes al inicio del estudio, 7 días después del tratamiento con antibióticos y 2 semanas, 4 semanas, 8 semanas y 12 semanas después del episodio de ITU. Se realizará un análisis de orina en cada visita y un cultivo de orina al inicio y en las visitas de 2 semanas y 3 meses. Se recolectarán muestras de orina al inicio ya los 3 meses de los controles para comparar.

Se debe demostrar que todos los pacientes tienen ITU mediante la detección de piuria en el análisis de orina (leucocitos > 10 por campo de gran aumento) y un cultivo de orina positivo. Además, se realizará una radiografía de riñón, uréter y vejiga (KUB) y una ecografía renal para descartar la posibilidad de urolitiasis u otra patología del tracto urinario. Se solicitará el diario miccional de un día para registrar en cada visita para determinar la capacidad vesical funcional (FBC) y la frecuencia de episodios por día. Los síntomas de la vejiga se registrarán mediante la puntuación de síntomas de vejiga hiperactiva (OABSS) y la escala analógica visual de dolor (VAS). Además, en la visita 2 también se medirá la uroflujometría, incluida la tasa de flujo máximo (Qmax), el volumen miccional y el volumen residual posmiccional (PVR). Las muestras de orina al inicio y en cada visita después del tratamiento se recolectarán en una vejiga cómodamente llena y se enviarán para su Mediciones de NGF. Se iniciarán antibióticos (cefalexina 500 mg Q6H) durante 1 a 2 semanas en la línea de base hasta que el análisis de orina resulte negativo y el urocultivo resulte negativo. Luego, se recetará aleatoriamente un agente antimicrobiano (Baktar 800 mg h.s.) o un agente antiinflamatorio (Celecoxib 200 mg QD) para la profilaxis de las ITU durante 3 meses después de la resolución completa de la cistitis aguda. Se realizará un seguimiento de todos los pacientes durante un máximo de un año para controlar si presentan una ITU recurrente.

Todas las muestras de orina se recogerán con la vejiga llena y evacuación natural. La medición de los niveles de NGF en orina se realizará mediante el método ELISA. Las muestras de orina no se diluyen. La orina evacuada se pone inmediatamente en hielo y se centrifuga a 3000 g durante 10 min a 4 ◦C. El sobrenadante se separa en alícuotas en tubos de 1,5 mL y se conserva en un congelador a -80 ◦C. Al mismo tiempo, se toman 3 mL de orina para medir los niveles de creatinina urinaria. La concentración de NGF en orina se determina utilizando el sistema de inmunoensayo Emax (Promega, Madison, Wisconsin, EE. UU.) con un kit ELISA específico y de alta sensibilidad, que tiene una sensibilidad mínima de 7,8 pg/mL. La cantidad de NGF en las muestras de orina cae por debajo de los límites de detección del ensayo de NGF que se extrajo de una curva estándar de NGF. Todas las muestras se procesarán por triplicado, se repetirán los niveles de NGF en orina sin un valor constante en tres medidas y se promediarán los valores. Los niveles urinarios totales de NGF se normalizan aún más por la concentración de creatinina urinaria (nivel de NGF/Cr). Los niveles de NGF/Cr se comparan entre todos los subgrupos.

Los análisis estadísticos se realizarán mediante una prueba t pareada para datos pareados en puntos de tiempo consecutivos. Se utilizará la prueba de Mann-Whitney para el análisis no paramétrico entre diferentes subgrupos. Un valor P de menos de 0,05 se considera significativo.

Resultados previstos

Los investigadores plantearon la hipótesis de que los pacientes con ITU recurrente pueden tener niveles de NGF urinario persistentemente elevados en comparación con aquellos con ITU por primera vez. Los niveles de NGF en orina permanecerán elevados en pacientes que tienen síntomas persistentes de vejiga hiperactiva después de un episodio de cistitis aguda y podrían ser persistentemente más altos que los controles después de 3 meses. Los pacientes tratados con agentes antiinflamatorios pueden tener niveles más bajos de NGF en orina en la visita de 3 meses en comparación con los que toman antimicrobianos. La incidencia de IU recurrente en el siguiente año podría ser mayor en los pacientes tratados con antimicrobianos que en los tratados con agentes antiinflamatorios.