A vizelet NGF az akut bakteriális cystitis biomarkere

A visszatérő húgyúti fertőzés nagyon zavaró és népszerű probléma az urogynekológiai klinikai gyakorlatban. A Nemzetközi Uroginekológiai Szövetség (IUGA)/Nemzetközi Kontinencia Társaság (ICS) közös jelentése szerint a női medencefenéki diszfunkció terminológiájáról visszatérő UTI-nek minősül az elmúlt 12 hónapban legalább három tüneti és orvosilag diagnosztizált UTI. A korábbi UTI-nek meg kellett volna oldódnia, mielőtt újabb UTI-t diagnosztizáltak volna. A visszatérő UTI a női medencefenék diszfunkciójának egyik leggyakoribb diagnózisa.

A visszatérő húgyúti fertőzésben szenvedő betegek húgyhólyag-irritatív tüneteit is mutathatják. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a visszatérő húgyúti fertőzésben szenvedő betegeknél megemelkedett a vizelet NGF-szintje, ami arra utal, hogy az UTI megszűnése után krónikus gyulladás van jelen ezeknél a betegek hólyagjában. A kutatók előzetes eredményei azt mutatták, hogy a krónikus gyulladás, az uroteliális sejt apoptózisa és az uroteliális sejtek barrier funkciójának károsodása lehet a visszatérő húgyúti fertőzés hátterében a nőknél. A húgyúti fertőzés megszűnése után krónikus gyulladás jelenhet meg a hólyag falában, ami uroteliális diszfunkciót és hibás barrier funkciót is okozhat, és ezeknél a betegeknél az UTI könnyen kiújulhat. Ez a bizonyíték új fókuszt biztosít a klinikai kezelés és a visszatérő húgyúti fertőzések jövőbeli kutatása számára.

Ezen ismeretek alapján a kutatók azt feltételezték, hogy a húgyhólyag falában krónikus gyulladás lehet, amely uroteliális diszfunkciót és hibás barrier funkciót is okozhat. Az UTI könnyen kiújulhat ezeknél a krónikus húgyhólyag-gyulladásban szenvedő betegeknél. Ha a kutatók meg tudják állapítani a krónikus gyulladás teljes megszűnését az akut cystitis epizód után, lehetséges a visszatérő cystitis gátlása a gyulladás gyulladásgátló szerekkel történő kezelésével.

Az Idegnövekedési faktor (NGF) egy kis mennyiségben szekretált fehérje, amely bizonyos célneuronok differenciálódását és túlélését indukálja. Az NGF-et a C-rost afferens idegek ingerlékenységében és a reflex húgyhólyag aktivitásában bekövetkező patológia által kiváltott változások kémiai közvetítőjeként tartják számon. A neurotróf faktorok szintjét, beleértve az NGF-növekedést a hólyagban gerincvelő-sérülés (SCI) után, és megnövekedett NGF-szinteket, kimutatták patkányok lumbosacralis gerincvelőjében és dorsalis gyökér ganglionjában SCI után. Az NGF patkányok húgyhólyagjába történő krónikus beadása hólyaghiperaktivitást vált ki, és növeli a disszociált hólyag afferens neuronjainak tüzelési gyakoriságát. A vizelet NGF megnövekedett szintjét olyan BOO-betegeknél is kimutatták, akik túlműködő hólyag (OAB) tüneteit mutatták. Megnövekedett hólyagszövet NGF-et figyeltek meg interstitialis cystitisben/fájdalmas hólyag szindrómában (IC/PBS) szenvedő betegeknél. A legújabb kutatások a vizelet NGF-szintjére összpontosítottak az OAB és az IC/PBS kimutatása során alsó húgyúti diszfunkcióban (LUTD). A bizonyítékok azt mutatják, hogy a vizeletfehérjék, például az NGF és a prosztaglandin E2 szintje emelkedik OAB-ban, szenzoros sürgősségben és detrusor-túlműködésben (DO) szenvedő betegeknél. Az OAB-száraz és OAB-nedves betegek vizelet NGF-szintje szignifikánsan magasabb, mint a kontrollcsoportban és a fokozott hólyagérzettel rendelkező betegeknél. A vizelet NGF-szintje fiziológiailag kis léptékkel emelkedik a normál alanyokban, amikor ürítési kényszer van, de kórosan nagy léptékben emelkedik OAB-betegeknél kis hólyagtérfogat és sürgősségi érzés esetén. A vizelet NGF szintje csökken az antimuscarin terápia után, és tovább csökken a detrusor botulinum toxin injekciók után refrakter OAB-ban. Összességében a vizelet NGF-szintjei potenciális biomarkernek tűnnek az OAB és a mögöttes krónikus gyulladás diagnosztizálásában.

Számos urológiai betegség, például a bakteriális cystitis, az alsó húgycső és az uroteliális sejtes karcinóma olyan tárolási tüneteket okozhat, amelyek az OAB-t vagy az IC/PBS-t utánozzák. A vizelet NGF szintje szintén emelkedett ezekben a rendellenességekben. Az előző tanulmányban a kutatók azt találták, hogy az UTI növelheti az NGF-termelést a vizeletben a húgyúti kövekkel kapcsolatban. Azoknál a betegeknél, akiknél a húgyúti fertőzés megszűnt, de a perzisztáló OAB-ban is előfordulhat, hogy a vizelet NGF szintje magas. Ezek az eredmények bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy a vizelet NGF a húgyúti gyulladás terméke. Ezért a vizelet NGF második vonalbeli terméknek tekinthető az uroteliális károsodás vagy az uroteliális környezet olyan megváltozása után, amely megindítja az érzőideg-ingerlést és hólyag túlérzékenységet vagy DO-t okoz. A vizelet NGF mérése nem invazív eszköz a krónikus gyulladásos állapot felmérésére és a kezelés longitudinális összehasonlítására.

Fontos tudni, hogy a vizelet NGF szintje emelkedhet-e akut cystitis epizódban is, és a termelés összefüggésben van-e a kapcsolódó raktározási tünetekkel az antibiotikum kezelést követő különböző szakaszokban. Ez a vizsgálat célja a vizelet NGF-szintjének mérése akut cystitisben és az antibiotikum-kezelést követő különböző stádiumokban szenvedő betegeknél. Ha a vizelet NGF-szintje összefüggésben van a hólyagfal alapjául szolgáló gyulladással, a kutatók biomarkerként használhatják a gyulladás megszűnésének állapotának meghatározására, és az orvosok rendelkezésére bocsáthatják, hogy eldöntsék, mennyi ideig kell kezelniük az akut cystitisben szenvedő betegeket.

Anyagok és metódusok

Ebbe a vizsgálatba 30 nőbeteget vonnak be, akiknek először UTI-je van, és 30 olyan nőbeteget, akiknek visszatérő UTI-je van (legalább két korábbi UTI-epizód az elmúlt 12 hónapban), de a közelmúltban akut epizódjuk volt. Tíz azonos korú (30-50 éves) nőt hívnak meg kontrollként, akiknek a kórtörténetében nem szerepelt húgyúti fertőzés vagy húgyúti patológia. Vizeletmintát vesznek a betegektől a kiinduláskor, 7 nappal az antibiotikum-kezelés után, valamint 2 héttel, 4 héttel, 8 héttel és 12 héttel az UTI-epizód után. Minden vizit alkalmával vizeletvizsgálatot végeznek, és vizelettenyésztést végeznek az alapvonalon, valamint a 2 hetes és 3 hónapos vizitek alkalmával. A kiindulási és 3 hónapos vizeletmintákat összehasonlítás céljából gyűjtik a kontrolloktól.

Minden betegnél igazolni kell a húgyúti fertőzést a pyuria kimutatásával a vizeletvizsgálat során (WBC>10 nagy teljesítménymezőnként), és a vizelettenyésztés eredménye pozitív volt. Ezenkívül vese-, ureter- és húgyhólyag-filmet (KUB), valamint vese-sonográfiát végeznek, hogy kizárják az urolithiasis vagy más húgyúti patológia lehetőségét. Az egynapos ürítési naplót minden vizit alkalmával rögzíteni kell a funkcionális hólyagkapacitás (FBC) és a napi gyakorisági epizódok meghatározásához. A hólyag tüneteit a túlzott húgyhólyag tünet pontszáma (OABSS) és a fájdalom vizuális analóg skálája (VAS) rögzíti. Ezenkívül a 2. vizit alkalmával uroflowmetriát is mérnek, beleértve a maximális áramlási sebességet (Qmax), az ürített térfogatot és az üreges maradványtérfogatot (PVR). A vizeletmintákat a kiinduláskor és a kezelés utáni minden egyes látogatás során kényelmesen megtelt hólyagban gyűjtik, és elküldik NGF mérések. Az 1-2 hétig tartó antibiotikumok (Cephalexin 500 mg Q6H) kezelését a kiinduláskor kezdik, amíg a vizeletvizsgálat negatívnak nem bizonyul, és a vizelettenyésztés negatívvá nem válik. Ezután véletlenszerűen antimikrobiális szert (Baktar 800 mg h.s.) vagy gyulladáscsökkentőt (Celecoxib 200 mg QD) írnak fel húgyúti fertőzés megelőzésére 3 hónapig az akut cystitis teljes megszűnése után. Minden beteget legfeljebb egy évig követnek nyomon, hogy ellenőrizzék, nem fordul-e elő visszatérő húgyúti fertőzés.

Minden vizeletmintát teli hólyaggal és természetes ürítéssel veszünk. A vizelet NGF-szintjének mérése ELISA módszerrel történik. A vizeletmintákat nem hígítják. A kiürült vizeletet azonnal jégre tesszük, és 3000 g-vel centrifugáljuk 10 percig 4 °C-on. A felülúszót 1,5 ml-es csövekben alikvot részekre osztjuk, és -80 ◦C-os fagyasztóban tároljuk. Ezzel egyidejűleg 3 ml vizeletet veszünk a vizelet kreatininszintjének mérésére. A vizelet NGF-koncentrációját az Emax ImmunoAssay System (Promega, Madison, Wisconsin, USA) segítségével határozzuk meg egy specifikus és nagyon érzékeny ELISA készlettel, amelynek minimális érzékenysége 7,8 pg/ml. Az NGF mennyisége a vizeletmintákban az NGF vizsgálat kimutatási határa alá esik, az NGF standard görbéből vontuk ki. Minden mintát három párhuzamosban futtatnak, a vizelet NGF-szintjeit három mérésnél konzisztens érték nélkül megismétlik, és az értékeket átlagolják. A vizelet teljes NGF-szintjét tovább normalizálja a vizelet kreatinin koncentrációja (NGF/Cr szint). Az NGF/Cr szinteket az összes alcsoportban összehasonlítjuk.

A statisztikai elemzéseket páros t-próbával végzik el a párosított adatokra, egymást követő időpontokban. A Mann-Whitney tesztet a különböző alcsoportok közötti nem-paraméteres elemzéshez használjuk. A 0,05-nél kisebb P-érték szignifikánsnak tekinthető.

Várható eredmények

A kutatók azt feltételezték, hogy a visszatérő húgyúti fertőzésben szenvedő betegeknél tartósan emelkedett a vizelet NGF-szintje azokhoz képest, akiknél először UTI-t szenvedtek. A vizelet NGF szintje emelkedett marad azoknál a betegeknél, akiknél az akut cystitis epizódot követően tartósan fennállnak az OAB tünetei, és 3 hónap elteltével tartósan magasabbak lehetnek, mint a kontrolloké. A gyulladáscsökkentő szerrel kezelt betegek vizeletben az NGF szintje alacsonyabb lehet a 3 hónapos vizit során, mint az antimikrobiális szereket szedőknél. A következő egy évben ismétlődő húgyúti fertőzések előfordulási gyakorisága nagyobb lehet az antimikrobiális szerekkel kezelt betegeknél, mint a gyulladáscsökkentő szerekkel kezelt betegeknél.