ICSI 前的顶体反应诱导 (RA-ICSI)

简介 卵胞浆内精子显微注射 (ICSI) 产生 70% 的受精卵母细胞和受精卵，这些卵母细胞和受精卵大部分发育正常。 为执行 ICSI，在梯度迁移后从精子悬浮液中取出精子。 然后通过使用微量移液器打断其鞭毛将其固定，并引入卵母细胞的细胞质中。

人类自发性顶体反应的发生率低于 20%。 两项关于顶体反应和固定精子百分比的研究表明，95% 的精子膜不稳定，但只有 17.8% 的精子完全 RA。 换句话说，当我们显微注射 10 个精子时，其中只有 2 个完全去除了顶体材料。 所有其他的都与顶体材料一起被引入卵母细胞。 但这种物质通常不会进入卵母细胞，因为顶体反应是卵子周围透明带通过的先决条件。

使用顶体反应精子对 ICSI 成功的重要性先前已在几种动物物种中得到强调。 已经证明在小鼠中诱导顶体反应导致更高的受精率（从 30% 到大约 60%）。 在兔子和马身上也是如此。 木村等。还报道了用顶体完整的兔和仓鼠精子注射的小鼠卵母细胞在未达到双细胞阶段时表现出核激活和胚胎发育停止。 当注射前它们从顶体中释放出来时，相同精子的这种“细胞毒性”就会消失。 在另一项研究中，在金仓鼠身上证明了注射精子头期间顶体的存在对卵母细胞存活的不利影响。 所有显微注射顶体完整精子的卵母细胞均死亡，而只有注射顶体反应精子的卵母细胞不仅存活下来，而且在 79% 的病例中还发育到两个原核阶段，并有助于活产（19%）。

Yanagimachi 团队报告了一项关于将不同物种的精子顶体掺入小鼠卵母细胞的潜在危险影响的研究。 根据这些作者的说法，有害成分可能是胰蛋白酶样顶苷和透明质酸酶等酶，因为它们的注射模拟了 ICSI 对顶体完整精子的影响。 在同一项研究中，证实毒性作用与顶体的大小相关，因此与蛋白酶的含量相关。

Morozumi 和 Yanagimachi 明确描述了顶体及其内容物的毒性作用。 它会导致卵母细胞变形，外观不规则、水肿或细胞溶解，细胞质呈假空泡状。 此外，已经确定由外源性或顶体酶引起的损伤与卵母细胞细胞骨架破坏相关，通过卵母细胞皮质中微管的异常积累。

除了卵母细胞的形态学和超微结构改变外，顶体的掺入可能导致卵母细胞缺乏核活化。 开赛等人。据报道，如果精子从顶体中释放出来，卵母细胞减数分裂的完成速度会更快。 类似地，在猪中观察到 ICSI 与精子顶体反应后受精率增加。 Morozumi 等人的研究。还表明，在 ICSI 之前，来自几个物种的精子顶体反应的诱导导致卵母细胞活化的加速，这在人类精子中很明显。 ICSI 后顶体完整精子或顶体反应精子的钙振荡曲线之间存在显着差异，证明了这一点。 在注射了顶体反应精子的卵母细胞中记录的钙波的特征是早发和振幅以及更高的频率。 相反，在注射了顶体完整精子的卵母细胞中钙反应异常延迟。

因此，改变的钙振荡，即 ICSI 期间的“关键”卵母细胞激活信号，是植入前胚胎异常发育到囊胚阶段的原因。 事实上，当完整或顶体反应的精子分别显微注射时，活的健康小鼠出生的比例从 40% 增加到 71%。

这些相同的研究还表明了两件事：

• 当顶体物质的数量比卵母细胞体积大时，顶体物质的引入更有害。 因此，有兴趣系统地减少引入卵母细胞质中的物质的量以改善胚胎发育。
• 第二件事是在 ICSI 之前诱导顶体反应极大地改善了胚胎发育，从而提高了胚胎移植出生的婴儿数量。

虽然ICSI在人类中给出了非常令人满意的结果，但通过胚胎获得婴儿的比率低于IVF胚胎移植后的婴儿率。 因此，有可能通过在显微注射前诱导顶体反应来改善 ICSI 的结果。

经过几项研究，我们使用精子与伴侣的卵泡液 (FF) 孵育来诱导精子顶体反应 (Karim Rahal, 2011 Master Thesis 2)。 FF 确实是 AR 的有效诱导剂。 由于患者的 FF 仅用于其丈夫的精子，因此不存在可追溯性问题。 该技术可应用于最贫乏的精液。 最后，该技术用于非常简单的例行程序，因为卵泡液总是在取卵过程中恢复并因此可用。