单独使用氯喹 (CQ) 与同时使用 CQ 和伯氨喹治疗间日疟原虫感染的疗效

目标 - 评估联合给予氯喹 + 伯氨喹 (CQ+PQ) 与单独使用 CQ（PQ 被推迟到 CQ 治疗的第 28 天）作为杀裂虫疗法（28 天随访）和根治的疗效在无并发症的间日疟疾中（6 个月随访）。 具体来说：

• 在超过 28 天的随访中，测量 CQ+PQ 与单独使用 CQ 的临床和寄生虫学疗效。
• 测量第 29 天到第 180 天随访间日疟疾首次复发的时间。

方法 - 这是一个随机、开放标签的方法。 评估 CQ 作为杀裂殖药物的疗效的随访持续时间为 28 天。 通过被动监测检测复发性间日疟原虫感染的完整随访持续时间为六个月。 从随访的第 28 天开始，单独使用 CQ 组的所有患者都接受了 7 天的 PQ（总剂量为 3.5mg/kg）。

2.1 研究地点和人口——该研究在巴西亚马逊盆地最西部的阿克里州南克鲁塞罗市进行。 研究人群是 5 岁以上被诊断患有无并发症的间日疟原虫疟疾且同意纳入研究的患者。

2.2 纳入标准——间日疟原虫单一感染，年龄 >5 岁，能够吞咽口服药物，腋温≥37.5ºC（或过去 48 小时内有发热史）或同意遵守研究并提供书面材料知情同意。

2.3 入组排除标准——需要住院治疗的严重疟疾、严重营养不良（年龄别体重≤平均值以下 3 个标准偏差）、与任何其他疟原虫物种共感染、严重贫血（Hg<8g/100 毫升）、对以下物质过敏CQ 或 PQ、由疟疾以外的疾病引起的发热状况、严重或慢性疾病、孕妇或哺乳期妇女、既往溶血病史或严重贫血或可能干扰抗疟药代动力学的常规药物治疗。

2.4 注册程序 2.4.1。 临床评估——对所有患者进行了除疟疾以外的发热性疾病体征和严重疾病/危险体征的评估，以将患者排除在参与研究之外。 育龄女性被问及怀孕和哺乳期。 在筛选和随后的每次访问中，询问患者在过去 48 小时内是否发烧，并测量他/她当前的体温。 记录任何疾病/手术状况、药物过敏、药物或草药补充剂的使用。 记录患者的脉率、呼吸频率、身高、体重和基线体检结果。 这是在筛选和随后的每次访问时完成的。

2.5. 现场实验室评估 a - 对 13-49 岁的女性进行了尿液 β-HCG 妊娠试验 b - 在第 0 天和每次随访时（第 1、2、3、7、14 天）准备了两份厚血涂片, 21, 28, 180). 现场检查了一张厚涂片，以验证寄生虫种类和正式的寄生虫计数。 第二张幻灯片已存档以供日后检查。 两名合格的显微镜专家独立阅读所有幻灯片。 不一致的结果由第三位显微镜师重新检查，寄生虫密度是通过平均两个最接近的计数来计算的。 在第 0、1、2、3、28 天和任何寄生虫复发当天，通过实时定量 PCR 进一步证实了疟疾的显微镜诊断（寄生虫特异性 DNA 和配子体特异性 RNA 转录本）。

c - 在第 0、1、2、3、7、28 天和任何寄生虫复发当天收集静脉血样。 除了准备厚涂片外，它还用于现场 G6PD 测试和全血细胞计数和血红蛋白测量。 血浆样本储存在-80°C（或液氮）并运送到圣保罗的中央实验室进行免疫学测量（抗体、细胞因子）。 将剩余的全血等分试样冷冻保存，用于 DNA 和 RNA 提取以及 CQ 测量（后者在第 0 天和第 28 天以及任何寄生虫复发当天）。 在第 0 天和任何寄生虫复发当天收集的全血样本被冷冻保存，用于离体耐药性测定。

d - 在第 14、21 和 180 天收集的手指采血样本用于血红蛋白测量和制备厚涂片。 剩余的手指采血样本被点在 FTA 膜上，以便在 4°C 下长期储存 DNA。

e - 在第 0 天现场进行 G6PD 测试。如果患者缺乏 G6PD，她/他将被排除在外。

2.6 随后的随访 在第 1、2、3、7、14、21、28 和 180 天对每位患者进行临床重新评估。 每次就诊时检查静脉血（第 1、2、3、7、28 天）或毛细血管（手指采血）血样（第 14、21、180 天）是否有疟原虫，如果患者自发发烧，则在其他任何一天检查或症状恶化。

血红蛋白状态 - 在第 0、1、2、3、7、14、21、28、180 天和任何寄生虫复发当天测量。

药物水平测试——应在第 0、7、28 天和寄生虫血症复发当天采集静脉血，以测量 CQ 的浓度。

分子检测——使用一组 14 种高度多态性的微卫星标记，将第 28 天之前从反复感染中分离出的间日疟原虫与第 0 天的分离株进行基因分型比较，以确定复发是否是由于感染中唯一或主要的寄生虫种群所致原始感染，可以在第 0 天检测到的次要寄生虫亚群或完全不同的寄生虫种群。

2.7 治疗 所有参与者都接受了由研究护士监督的 CQ（总剂量，25 mg 碱基/kg）和 PQ（总剂量，3.5mg/kg）。

CQ：第 0 天（10mg/kg）、第 1 天和第 2 天（7.5mg/kg）。 PQ：每天一次（0.5 mg/kg），持续 7 天，从 CQ 治疗的第 0 天（并发 CQ-PQ 治疗组）或第 28 天（单独 CQ 组）开始。

2.8 后续程序 2.8.1。 主动监测——研究参与者在第 0、1、2、3、7、14、21、28 和 180 天接受访问。 每次就诊时，完成一份问卷，询问当前或前一个月的病史或发烧情况，并采集静脉或毛细血管样本进行血玻片检查和检查寄生虫血症。

2.8.2. 被动监测——建议患者在任何一天返回健康中心，如果出现症状、危险迹象（无法饮水或母乳喂养、呕吐一切、出现抽搐、昏昏欲睡或失去知觉、无法坐立或站立、出现呼吸困难） ，如果他们仍然生病或者是否有任何值得担心的事情。 在 PQ 给药期间，任何报告尿液变黑或腹部绞痛（中毒迹象）的人都应就医。

2.8.3. 抢救治疗 - 28 天内复发的间日寄生虫血症可能是复发性感染。 这些患者将接受标准 CQ-PQ 共同给药方案的再治疗，并继续参与研究。 28 天后，复发性间日寄生虫血症更可能是复发或新感染。 这些患者将接受标准的 CQ-PQ 联合给药方案治疗。 患上严重疟疾的患者将被送往医院并根据巴西卫生部的指导方针进行治疗。

2.8.4. 参与者中止/退出研究治疗 每个参与者都有权随时退出研究。 如果参与者输血或 Hb 降至低于 7g/dL 或肉眼可见血红蛋白尿或 Hb 下降 >25%（在前 14 天或 8 周内，如上所述）或显着的方案偏差、疾病进展、失访、使用具有抗疟活性的药物、重要的不良事件或紧急事件。

终点 3.1 氯喹的杀裂殖体效力 它是根据仅 CQ 组中直到第 28 天的复发风险得出的。

• Schizontocidal Therapeutic Failure (TF)：无论临床情况如何，临床恶化需要住院治疗，存在无性寄生虫血症或第 3 天至第 28 天温度 > 37.5°C 的无性寄生虫血症或第 7 天至第 28 天寄生虫血症。
• 充分的裂殖体杀灭反应 (ACR)：在第 7、14、21 和 28 天没有寄生虫血症，之前没有达到 TF 的标准。

3.2 安全终点 PQ 的主要问题在于严重溶血反应和血红蛋白下降的风险。 然而，血红蛋白减少也可能发生在间日疟原虫疟疾之后。 因此，监测溶血和 Hb 临床显着下降的证据至关重要。 在第 0、1、2、3、7、14、21、28 和 180 天评估血红蛋白浓度，预计第 3 至 14 天的水平最低。

3.2.1. 不良事件 (AE)：与研究药物的使用暂时相关的任何不利和意外的体征、症状或疾病，不一定存在因果关系。

3.2.2. 不良反应 (AR)。 被判断为与研究药物有可疑因果关系的不良和意外体征、症状或疾病。

3.2.3. 严重不良事件 (SAE)。 任何剂量导致死亡或死亡风险、需要住院治疗、导致持续或严重残疾/无能力的任何不良医疗事件。

治疗结果的定义

• 早期治疗失败（ETF）

  • 在存在寄生虫血症的第 1、2 或 3 天出现危险迹象或严重疟疾
  • 第 2 天的寄生虫血症高于第 0 天，与腋窝温度无关
  • 第 3 天出现寄生虫血症，腋温 ≥ 37.5 ºC
  • 第 3 天寄生虫血症≥第 0 天计数的 25%
• 晚期治疗失败

• 晚期临床失败 (LCF)

  • 在第 4 天和第 28 天之间的任何一天出现寄生虫血症的危险体征或严重疟疾，之前未达到任何早期治疗失败标准的患者
  • 先前未达到任何早期治疗失败标准的患者在第 4 天和第 28 天之间的任何一天出现寄生虫血症且腋温≥37.5ºC（或有发热史）
• 晚期寄生虫病学失败 (LPF) - 在第 7 天和第 28 天之间的任何一天，腋温 <37.5ºC 的寄生虫血症发生在先前未达到任何早期治疗失败或晚期临床失败标准的患者中。
• 充分的临床和寄生虫学反应——在第 28 天没有寄生虫血症，无论温度如何，在之前不符合任何 ETF、LCF 或 LPF 标准的患者中。